本文關(guān)鍵詞： 結(jié)腸腫瘤 微RNAs 細(xì)胞凋亡 異種移植模型抗腫瘤試驗(yàn) 小鼠 近交BALB/c　出處：《腫瘤》2017年02期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的 :探討反義寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)下調(diào)微RNA-21(micro RNA-21,mi R-21)表達(dá)對(duì)高侵襲性人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)的影響。方法 :首先建立人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞的裸鼠荷瘤模型,并于腫瘤局部分別注射p-mi R-21-ASOs重組質(zhì)�；騪-Cont對(duì)照質(zhì)粒,然后觀(guān)察裸鼠體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)變化。末次注射5 d后,處死裸鼠,剝?nèi)∧[瘤組織,測(cè)量各組腫瘤組織的大小和質(zhì)量。采用HE染色法觀(guān)察腫瘤組織形態(tài)學(xué)變化;TUNEL法檢測(cè)腫瘤局部細(xì)胞凋亡情況;免疫組織熒光法檢測(cè)腫瘤組織中增殖核抗原Ki-67蛋白的表達(dá)變化;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)腫瘤組織中mi R-21成熟體的表達(dá),以及細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)2、CDK3、CDK4和CDK6的表達(dá)變化;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-PKB,又稱(chēng)為p-Akt)和磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinase,p-ERK)的表達(dá)水平。結(jié)果 :與p-Cont對(duì)照組相比,p-mi R-21-ASOs質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組的腫瘤生長(zhǎng)緩慢(P0.05),剝離腫瘤的質(zhì)量明顯減少(P0.01),腫瘤組織中可見(jiàn)大片壞死區(qū)域,而且腫瘤細(xì)胞中mi R-21成熟體的表達(dá)水平明顯下調(diào)(P0.01)。mi R-21表達(dá)下調(diào)后,腫瘤組織中Ki-67的表達(dá)量明顯減少(P0.01),而相對(duì)凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多(P0.05);并且,細(xì)胞周期相關(guān)分子CDK2、CDK3、CDK4和CDK6的表達(dá)均明顯下調(diào)(P值均0.001),Akt和ERK蛋白的磷酸化水平也均明顯下調(diào)(P值均0.05)。結(jié)論 :ASOs下調(diào)mi R-21表達(dá)可顯著抑制人高侵襲性結(jié)腸癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng),提示mi R-21可作為結(jié)腸癌基因治療的一個(gè)潛在新靶標(biāo)。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of antisense oligonucleotides (antisense oligonucleotides, ASOs RNA-21 (micro) by micro RNA-21, MI R-21) on the expression of highly invasive human colon cancer SW620 cells in nude mice. Methods: the growth of nude mice model established human colon cancer cell line SW620, and to the local tumor were injected p-mi R-21-ASOs recombinant plasmid p-Cont or control plasmid, then we observed the growth of nude mice tumor. 5 d after the last injection, mice were sacrificed, stripping of tumor tissue, size and quality were measured in tumor tissue. HE was used to observe the morphological changes of tumor tissue staining; apoptosis detected by TUNEL tumor cells; expression of proliferating cell nuclear antigen Ki-67 immunofluorescence detection of protein expression in tumor tissue; tumor tissues were detected by real time fluorescent quantitative PCR MI in mature R-21, and cyclin dependent kinase Enzyme (cyclin-dependent kinase, CDK 2, CDK3), the expression of CDK4 and CDK6; detection of phosphorylated protein kinase B protein blotting (phosphorylated protein kinase B p-PKB, also known as p-Akt) and phosphorylated extracellular signal regulated kinase (phosphorylated extracellular regulated protein kinase, p-ERK) expression level. Results: compared with the p-Cont control group, p-mi transfection of R-21-ASOs plasmid group (P0.05), slow tumor growth of tumor quality significantly decreased (P0.01), observed in tumor tissue necrosis region, and the expression level of MI in tumor cells of mature R-21 (P0.01).Mi was downregulated after downregulation of R-21 expression of Ki-67 in tumor tissues decreased (P0.01), and the relative number of apoptotic cells increased significantly (P0.05); and the cell cycle related molecules CDK2, CDK3, CDK4 and CDK6 expression were significantly reduced (P 0.001), Akt and ERK. The level of phosphorylation of white was also significantly down regulated (P = 0.05). Conclusion: ASOs downregulation of MI R-21 expression can significantly inhibit the growth of highly invasive colon cancer cells in nude mice, suggesting that MI R-21 can be used as a potential new target for gene therapy of colon cancer.

【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室&貴州省生物治療人才基地;遵義醫(yī)學(xué)院貴州省普通高等學(xué)校特色藥物腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)物理學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)組織工程與干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中心;
【基金】：貴州省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃重大專(zhuān)項(xiàng)(編號(hào):黔科合J重大字[2015]2003) 貴州省高層次創(chuàng)新型人才培養(yǎng)項(xiàng)目(編號(hào):黔科合人才[2016]4031號(hào)) 遵義醫(yī)學(xué)院優(yōu)秀青年人才計(jì)劃(編號(hào):15ZY-001)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R735.35

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李洪清;;老年人結(jié)腸癌11臨床分析[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2008年35期

2 喻枝紅;;青年人結(jié)腸癌誤診1例[J];九江醫(yī)學(xué);2008年01期

3 黃智虎;;老年人結(jié)腸癌誤診闌尾膿腫8例分析[J];山西醫(yī)藥雜志(下半月刊);2010年11期

4 解廣玉,竇萬(wàn)強(qiáng),王太星;青年人結(jié)腸癌12例分析[J];腫瘤研究與臨床;1999年03期

5 梁國(guó)林;老年人結(jié)腸癌并腸梗阻32例診治分析[J];大腸肛門(mén)病外科雜志;2001年01期

6 張奕春;;青年人結(jié)腸癌76例臨床分析[J];河北醫(yī)學(xué);2006年01期

7 宋玉;劉曉燕;張萍;吳強(qiáng);徐振山;宋禮華;;抗人結(jié)腸癌相關(guān)抗原單克隆抗體的制備及初步研究[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2006年04期

8 郭愛(ài)珍;李淑德;潘雪;李兆申;;青年人結(jié)腸癌1例[J];胃腸病學(xué);2007年04期

9 李洪清;;老年人結(jié)腸癌11例臨床分析[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2008年29期

10 彭宗玉;徐鵬;王美秋;;腫瘤特異性凋亡基因誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡機(jī)制的探討[J];求醫(yī)問(wèn)藥(下半月);2011年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 賀子彪;楊偉明;焦保庭;宋輝;;原代人結(jié)腸癌裸鼠皮下移植瘤模型建立[A];2007年貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)外科分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

2 曲嫻;徐傳香;;反義EGFR對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的抑制[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第21屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

3 吳燕婉;袁冬;石心泉;楊翠璋;宗書(shū)東;王桂云;李世榮;;人結(jié)腸癌浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)和臨床應(yīng)用前的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

4 李豐;宋今丹;;丁酸鈉誘導(dǎo)的新的人結(jié)腸癌分化相關(guān)基因的克隆[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

5 梁寒;郝希山;王曉娜;李景武;王家倉(cāng);王殿昌;;40歲以下青年人結(jié)腸癌的預(yù)后因素分析[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

6 周凱;曾慶;;老年人結(jié)腸癌致腸梗阻的處理[A];第七屆全國(guó)老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨海內(nèi)外華人老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

7 趙君宇;晉小婷;李文玲;宋莉;;環(huán)境濃度DDT暴露對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究[A];第三屆泛環(huán)渤海（七省二市）生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)——2012年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2012年

8 廖前進(jìn);蘇堅(jiān);周秀田;向姝霖;唐海林;蘇琦;;二烯丙基二硫?qū)β闶篌w內(nèi)人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

9 張瑜;陳婷;郭文浩;莫顯明;盧鈾;;人結(jié)腸癌腫瘤干細(xì)胞的體內(nèi)低氧分布[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射腫瘤治療學(xué)分會(huì)六屆二次暨中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤放療專(zhuān)業(yè)委員會(huì)二屆二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

10 陳衛(wèi)昌;林茂松;張寶峰;方靜;周瓊;胡鶯;郜恒駿;;組織芯片結(jié)合免疫組化研究人結(jié)腸癌中腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)及其臨床意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 ;短鏈脂肪酸對(duì)人結(jié)腸癌Caco－2細(xì)胞增殖分化的影響與臨床意義[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 馮苗;白藜蘆醇抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡及與COX-2關(guān)系的研究[D];南昌大學(xué);2016年

2 王磊;RNA干擾抑制人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞COX-2基因表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2008年

3 介建政;含有NK4基因的重組腺病毒對(duì)人結(jié)腸癌抑制作用的研究[D];吉林大學(xué);2004年

4 向征;人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞株的建立及逆轉(zhuǎn)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王強(qiáng);缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)基因沉默后對(duì)SW480人結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院;2015年

2 趙綠翠;吳茱萸堿對(duì)人結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞體外增殖和遷移的影響及其作用機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 史玉榮;白花蛇舌草調(diào)控人結(jié)腸癌上皮細(xì)胞HCT116 Wnt信號(hào)通路的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 周密;美洛昔康對(duì)人結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞增殖和凋亡的作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王世雄;PUM2基因過(guò)表達(dá)對(duì)人結(jié)腸癌SW620細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡能力的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

6 關(guān)瑞宇;白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響及其抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制探討[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

7 姚藝陽(yáng);VPA誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞自噬的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

8 劉志方;葉黃素基于Nrf-2/ARE信號(hào)途徑對(duì)人結(jié)腸癌HT29細(xì)胞增殖抑制作用的研究[D];鄭州大學(xué);2016年

9 孫一鳴;3-溴丙酮酸誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞死亡的作用及機(jī)制[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2016年

10 陳彬彬;黃連素對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和遷移作用的研究[D];廈門(mén)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1527204