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5’-脫氧氟尿苷聯(lián)合干擾素對(duì)轉(zhuǎn)染TP基因結(jié)腸癌細(xì)胞株裸鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷挠绊?/H1>
發(fā)布時(shí)間:2018-02-07 12:07

  本文關(guān)鍵詞: 結(jié)直腸癌 LST 胸苷磷酸化酶 ’-脫氧氟尿苷 干擾素-αa 出處:《中國癌癥雜志》2017年11期  論文類型:期刊論文


【摘要】:背景與目的:人結(jié)直腸癌細(xì)胞基本無胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)主要探討人結(jié)腸癌細(xì)胞株LS174T轉(zhuǎn)染TP基因后,在裸鼠腫瘤組織中對(duì)抗癌藥物5’-脫氧氟尿苷(5’-deoxy-5-fluorouridine,5’-DFUR)、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和干擾素-α2a(interferon-α2a,INF-α2a)干預(yù)效果的影響。方法:以慢病毒為載體轉(zhuǎn)染TP基因至結(jié)腸癌細(xì)胞株LS174T,得到穩(wěn)定傳代的高TP表達(dá)株。將96只BALB/c裸鼠分成2組,分別應(yīng)用野生型及轉(zhuǎn)染TP基因后的LS174T細(xì)胞株接種裸鼠背部皮下,制成結(jié)腸癌TP低、高表達(dá)模型。每組再隨機(jī)分為6組,分別應(yīng)用0.9%Na Cl溶液、INF-α2a、5-FU、5-FU+INF-α2a、5’-DFUR和5’-DFUR+INF-α2a干預(yù)5 d,2周后處死裸鼠,分離腫瘤稱重后,分別應(yīng)用鼠抗人CD34、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和抗PD-ECGF單克隆抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。判定是否有TP表達(dá)及對(duì)微血管進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果:在野生型LS174T裸鼠荷瘤模型中,使用抗腫瘤藥物的3~6組腫瘤質(zhì)量與對(duì)照組相比均明顯降低,抑癌率分別為48%、27%、48%和57%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中5’-DFUR組(48%)與5’-DFUR+INF-α2a組(57%)、5-FU+INF-α2a組與5’-DFUR+INF-α2a組(27%與57%)相比,抑癌率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在LS174T-TP細(xì)胞株裸鼠模型中,5’-DFUR組和5’-DFUR+INF-α2a組抑癌率分別為27%和48%,而使用5-FU的兩組未顯示出良好的抗腫瘤效果(7%和3%)。免疫組織化學(xué)染色顯示,野生型LS174T接種形成的腫瘤組織中TP表達(dá)陰性,微血管數(shù)目較少,而轉(zhuǎn)染TP基因后,腫瘤組織中TP表達(dá)明顯上升,微血管密度明顯增多(P0.05)。結(jié)論:結(jié)腸癌細(xì)胞株LS174T轉(zhuǎn)染TP基因后,在裸鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型中,TP表達(dá)明顯增加,使細(xì)胞內(nèi)激活抗癌藥物5’-DFUR的抗癌作用明顯增強(qiáng),聯(lián)合應(yīng)用INF-α2a能進(jìn)一步增強(qiáng)這種抗癌作用。而轉(zhuǎn)染TP基因或聯(lián)合應(yīng)用INF-α2a對(duì)常規(guī)抗癌藥物5-FU的抗癌效果無明顯影響。
[Abstract]:Background & AIM: there is no thymidine phosphorylase (TPTP) expression in human colorectal cancer cells. This study was designed to investigate the expression of TP gene in human colon cancer cell line LS174T. In nude mice tumor tissues, the effects of anti-cancer drugs 5- deoxy-5-fluorouridine5- deoxy-5-fluorouridine5, fluorouraciline 5-FU) and interferon-偽 2a interferon- 偽 2aF- 偽 2aF- 偽 2a) on the effects of anti-cancer drugs 5- deoxy-5-fluorouridine 5-fluorouraciline (5-FUU) and interferon-偽 2a interferon- 偽 2a- INF- 偽 2a) were obtained by transfection of TP gene into colon cancer cell line LS174T by lentivirus method: high TP was obtained by transfection of TP gene into colon cancer cell line LS174T. 96 BALB/c nude mice were divided into 2 groups. Nude mice were subcutaneously inoculated with wild type and LS174T cells transfected with TP gene to make a low and high expression model of TP in colon cancer. Each group was randomly divided into 6 groups. The nude mice were killed after 5 days of intervention with 0.9% NaCl solution (INF- 偽 2a) -FU 5-FU (5-FU) -5-FU (5-FU) -5-FU (5-FU) -5-FU (5-FU) -5-FU (5-FU). After separating the tumor and weighing it, Mouse anti-human CD34, vascular endothelial growth factor endothelial growth factor-VEGF and anti-#en2# monoclonal antibodies were used for immunohistochemical staining to determine the expression of TP and count the microvessels. Results: in the nude mice model of wild-type LS174T, the expression of TP was determined. Compared with the control group, the tumor quality of the three groups treated with antitumor drugs was significantly lower, and the tumor inhibition rates were 2748% and 57%, respectively. The difference was statistically significant (P 0.05). The difference was significant (P 0.05), and the tumor quality of the 5 + DFUR INF- 偽 2a group was significantly lower than that of the 55-FU INF- 偽 2a group (27% vs 5757%), and the tumor suppressor rate was 27% in the 5-DFUR INF- 偽 2a group and 57% in the 5- DFUR INF- 偽 2a group, respectively, compared with that in the 55-FUINF- 偽 2a group (P < 0.05). There was a significant difference in tumor suppressor rate between the two groups (P 0.05). In the LS174T-TP cell line nude mice model, the tumor inhibition rates of the groups were 27% and 48, respectively, while the two groups with 5-FU showed no good anti-tumor effect (7%) and 3Q (3%). Immunohistochemical staining showed that the tumor suppressor rate of the two groups was higher than that of the control group (P < 0.05), and that the tumor inhibition rates of the two groups were 27% and 48 respectively. TP expression was negative and the number of microvessels was small in tumor tissues inoculated with wild-type LS174T. After transfection of TP gene, TP expression and microvessel density in tumor tissues increased significantly (P 0.05). Conclusion: after transfection of TP gene into colon cancer cell line LS174T, TP gene expression is significantly increased. In nude mice tumor model, the expression of TP was increased, and the anti-cancer effect of the anti-cancer drug 5- DFUR was obviously enhanced. The combination of INF- 偽 2a and INF- 偽 2a could further enhance the anticancer effect, but transfection of TP gene or combined use of INF- 偽 2a had no significant effect on the anticancer effect of 5-FU.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院胃腸外科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81071883)
【分類號(hào)】:R735.35

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