人原發(fā)性肝癌相關(guān)抗原的蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究
本文關(guān)鍵詞: 肝細(xì)胞癌 蛋白組學(xué) 相關(guān)抗原 Dna J同源B亞家族成員 蛋白酶體亞基α 出處:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的檢測(cè)肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相關(guān)抗原,并予以驗(yàn)證。方法分別提取15例HCC組織及其癌旁組織總蛋白。Western blot分別檢測(cè)各總蛋白與其HCC患者自體血清的雜交情況。雙向電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技術(shù)將15例混合總蛋白中的各蛋白進(jìn)行分離與染色。圖像分析法比對(duì)染色膠上HCC組織及其癌旁組織蛋白的表達(dá)差異,基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間二級(jí)質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two mass analyzers for tandem mass spectrometry,MALDI-TOF MS/MS)技術(shù)及生物信息學(xué)網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)分別對(duì)表達(dá)差異蛋白予以分析鑒定與檢索匹配,免疫組織化學(xué)與Western blot分別檢測(cè)該差異蛋白在人HCC組織及其癌旁組織中的變化情況。結(jié)果 2-DE染色膠圖像分析比對(duì)結(jié)果顯示,HCC及其癌旁組織蛋白表達(dá)差異斑點(diǎn)共90個(gè),MALDI-TOF MS/MS與數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)其中19個(gè)蛋白斑點(diǎn)分析鑒定與檢索匹配發(fā)現(xiàn)15個(gè)蛋白表達(dá)上調(diào),4個(gè)蛋白表達(dá)下調(diào)。免疫組織化學(xué)與Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照比較,上調(diào)蛋白中的Dna J同源B亞家族成員11(dna J homolog subfamily B member 11,DNAJB11)在HCC組織中的表達(dá)明顯增強(qiáng),下調(diào)蛋白中的蛋白酶體亞基α3(proteasome subunit alpha type 3,PSMA3)在HCC組織中的表達(dá)則相反。結(jié)論人原發(fā)性肝癌相關(guān)抗原DNAJB11在HCC組織中的表達(dá)上調(diào),PSMA3在HCC組織中的表達(dá)下調(diào)。
[Abstract]:Objective to detect the related antigens of hepatocellular carcinoma (HCC). Methods Total protein of 15 HCC tissues and their adjacent tissues were extracted. Blot was used to detect the hybridization of total proteins with autologous serum of patients with HCC. Two-dimensional electrophoresis. The proteins in 15 cases of mixed total proteins were separated and stained by 2-DE.The expression of proteins in HCC and its adjacent tissues were compared by image analysis. Matrix assisted laser desorption / ionization time of flight mass spectrometry. Matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two. Mass analyzers for tandem mass spectrometry. MALDI-TOF / MS / MS technique and bioinformatics network database were used to identify and search the differentially expressed proteins. Immunohistochemistry and Western blot were used to detect the changes of the differential protein in human HCC and its adjacent tissues. There were 90 differentially expressed spots in HCC and its adjacent tissues. The expression of 15 proteins was up-regulated by MALDI-TOF MS/MS and database. The expression of four proteins was down-regulated. The results of immunohistochemistry and Western blot showed that the protein expression was lower than that of control. Dna J homologous B subfamily member 11 DNA J homolog subfamily B member 11 was upregulated. The expression of DNA JB11 in HCC was significantly increased, and the proteasome subunit alpha type 3 was down-regulated. Conclusion the expression of human hepatocellular carcinoma associated antigen DNAJB11 in HCC is up-regulated and PSMA3 is down-regulated in HCC.
【作者單位】: 重慶市腫瘤研究所血液腫瘤消化呼吸內(nèi)科;重慶市腫瘤研究所血液腫瘤生物治療科;
【基金】:重慶市應(yīng)用開(kāi)發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(CSTC2014yykfA110031) 中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)研究項(xiàng)目(ZGYSXH20120701)~~
【分類號(hào)】:R735.7
【正文快照】: identified by MALDI-TOF MS/MS,15 proteins were up-regulated,and 4 down-regulated.Immunohistochemicalassay and Western blotting confirmed that compared with the proteins from the adjacent tissues,Dna J homologsubfamily B member 11(DNAJB11)was significantl
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