本文關鍵詞： 奧沙利鉑 SW480細胞 SW620細胞 細胞周期 細胞凋亡　出處：《蘭州大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的探討奧沙利鉑(L-OHP)體外對人結(jié)腸癌細胞SW480和SW620增殖和凋亡的影響及其可能機制。方法1.MTT比色法檢測用不同質(zhì)量濃度(2、4、8、16、32和64μg/m L)L-OHP與SW480和SW620細胞作用24、48和72 h后對增殖抑制作用的影響。2.DAPI染色觀察經(jīng)不同質(zhì)量濃度(4、16和64μg/m L)L-OHP處理24 h后細胞核形態(tài)的變化。3.流式細胞術檢測用不同質(zhì)量濃度(1/2IC50和IC50)L-OHP處理24 h后SW480和SW620細胞周期和凋亡率。4.Western blot法檢測經(jīng)不同質(zhì)量濃度(4、16和64μg/mL)L-OHP處理24 h后SW480和SW620細胞中凋亡相關蛋白Bax和Caspaes-3蛋白的表達水平以及DNA損傷相關蛋白γHA2X蛋白的表達水平。結(jié)果1.L-OHP對SW480和SW620細胞的增殖有明顯的抑制作用且呈時間-劑量依賴性(P0.05)。SW620細胞對L-OHP的敏感性明顯高于SW480細胞(P0.05)。2.L-OHP作用于SW480和SW620細胞24 h后,隨著藥物濃度的增加正常細胞數(shù)目減少,出現(xiàn)細胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細胞數(shù)目明顯增加(P0.05)。相同濃度L-OHP作用下,SW620細胞中出現(xiàn)細胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細胞的比例明顯較SW480細胞中高(P0.05)。3.L-OHP對SW480和SW620細胞的有明顯的促進早期凋亡的作用且呈時間-劑量依賴性(P0.05)。相同濃度L-OHP作用下對SW620細胞促進早期凋亡的作用明顯大于SW480細胞(P0.05)。4.自然對數(shù)增殖周期,SW620細胞S期細胞比例低于SW480細胞,而G1期細胞比例高于SW480細胞(P0.05)。用不同質(zhì)量濃度的L-OHP(1/2IC50、IC50)作用24 h,SW480細胞G1期細胞比例隨濃度增高而顯著降低,G2/M期細胞比例顯著升高(P0.05),SW620細胞G1期細胞比例隨濃度增高而顯著降低,S期細胞比例顯著升高(P0.05)。5.L-OHP作用于SW480和SW620細胞24 h后,隨著藥物濃度的增加SW480和SW620細胞中凋亡相關蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關蛋白γHA2X蛋白的表達量明顯增加(P0.05)。相同藥物濃度下SW620細胞中凋亡相關蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關蛋白γHA2X蛋白的表達量明顯較SW480高(P0.05)。結(jié)論1.L-OHP對二種結(jié)腸癌細胞株都有明顯的增殖抑制作用,且對SW620細胞的抑制作用明顯大于SW480細胞。2.L-OHP主要通過阻滯細胞于G2/M期或S期抑制二種腫瘤細胞增殖并誘導細胞凋亡。3.L-OHP誘導二種腫瘤細胞凋亡的機制可能是通過上調(diào)促凋亡蛋白Bax和啟動Caspaes級聯(lián)反應來實現(xiàn)的。DNA損傷可能也是其促進凋亡的機制之一。但二者之間的具體聯(lián)系還需進一步實驗來探討。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of oxaliplatin L-OHPin on proliferation and apoptosis of human colon cancer cell line SW480 and SW620 in vitro and its possible mechanism. 2. (4) the cells of SW480 and SW620 were exposed to L-OHP at the level of 64 渭 g / L and 32 渭 g / m ~ (-1), 24 渭 g / m ~ (-1), respectively. Effects of 48 h and 72 h on proliferation inhibition. 2. DAPI staining was performed at different concentrations. Changes of nuclear morphology after 24 h treatment with 16 and 64 渭 g / m L LL-OHP .3. flow cytometry was used to detect nuclear morphology with different mass concentrations of 1 / 2 IC50 and IC50). After treatment with L-OHP for 24 h, the cell cycle and apoptosis rate of SW480 and SW620 were detected by Western blot assay. 16 and 64 渭 g / mL). L-OHP treatment 24. The expression levels of apoptosis-related proteins (Bax and Caspaes-3) and DNA damage associated protein 緯 HA2X (緯 HA2X) were detected in SW480 and SW620 cells for 5 h. Results 1. L-OHP inhibited the proliferation of SW480 and SW620 cells in a time-dose dependent manner. The sensitivity of P0.05N. SW620 cells to L-OHP was significantly higher than that of SW480 cells (P0.05). 2.L-OHP treated SW480 and SW620 cells for 24 h. With the increase of drug concentration, the number of normal cells decreased, the number of cells with nuclear pyknosis, polynuclear, nuclear fragmentation and apoptotic bodies increased significantly. The nuclei of SW620 cells were pyknotic and polynuclear. The percentage of cells with nuclear fragmentation and apoptotic bodies was significantly higher than that of SW480 cells (P 0.05). 3. L-OHP can promote early apoptosis in SW480 and SW620 cells in a time-dose dependent manner (P0.05). The effect of L-OHP at the same concentration on the early apoptosis of SW620 cells was significantly greater than that on SW480 cells (P 0.05N. 4). The natural logarithmic proliferative cycle was observed. The percentage of S phase cells of SW620 cells was lower than that of SW480 cells, while the proportion of G1 phase cells was higher than that of SW480 cells. The ratio of G _ 1 phase cells in G _ 2 / M phase decreased significantly with the increase of the concentration of IC50), and the percentage of G _ 1 phase cells increased significantly (P 0.05). The proportion of SW620 cells in G1 phase decreased significantly with the increase of concentration. The proportion of S phase cells increased significantly (P 0.05). 5. L-OHP treated SW480 and SW620 cells for 24 h. With the increase of drug concentration, the expression of apoptosis-related proteins (Bax and Caspase-3) and DNA damage associated protein 緯 HA2X (緯 HA2X) in SW480 and SW620 cells increased significantly. (. P0.05). The expression of apoptosis-related proteins Bax, Caspase-3 and DNA damage associated protein 緯 HA2X in SW620 cells was significantly higher than that in SW480 at the same drug concentration (P < 0.05). Conclusion 1. L-OHP can inhibit the proliferation of two colon cancer cell lines. Moreover, the inhibitory effect of L-OHP on SW620 cells was significantly greater than that on SW480 cells. 2.L-OHP inhibited the proliferation of two kinds of tumor cells and induced apoptosis mainly by blocking the cells in G _ 2 / M phase or S phase. The mechanism of apoptosis induced by L-OHP may be through up-regulation of apoptosis-promoting protein Bax and initiation of Caspaes cascade reaction. 1. But the specific connection between the two needs further experiment to explore.
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.3

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本文編號：1459234