本文關(guān)鍵詞：基于新型單分散空心金納米球SERS tags的癌胚抗原檢測研究

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【摘要】：肺癌是所有癌癥中死亡率最高的,死亡人數(shù)約占所有癌癥的25%。早期的臨床診斷對提高癌癥患者生存率和病情預(yù)后分析治療至關(guān)重要。雖然已經(jīng)有許多技術(shù)用于肺癌的檢測,但是它們大多數(shù)是侵入的、昂貴的、費時的并且靈敏度低。最近,一種基于表面增強拉曼散射(SERS)的免疫分析技術(shù)引起科研人員極大興趣,它是通過抗體修飾在金屬納米顆粒并被用于快速靈敏的生物傳感分析。而這其中最關(guān)鍵的工作就是SERS標(biāo)簽(tags)的構(gòu)建。在本研究中,我們構(gòu)建了一種基于新型空心金納米球的SERS tags,同時構(gòu)建磁珠捕獲探針當(dāng)作富集基底�；谶@種免疫分析的策略,我們能快速靈敏的檢測濃度在10pg/mL-100ng/mL范圍內(nèi)的CEA。具體工作內(nèi)容如下：(1)通過種子介導(dǎo)生長法合成單分散性良好的空心金納米球。在這個方法中,首先金納米顆粒先在單分散SiO2表面形成SiO2/GNPs結(jié)構(gòu)并作為生長點繼續(xù)通過還原法來沉積金顆粒。隨著越來越多的Au3-被H2O2還原成Au顆粒,GNPs逐漸變大并形成完整的金納米殼層。最后,通過氫氟酸腐蝕這種單分散金納米殼的SiO2核就可以形成結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,單分散性良好的空心金納米球。雖然這個方法相對較復(fù)雜和耗時,但是所獲得的金納米殼表面光滑且有很好的可控性和可重復(fù)性。對比拉曼信號分子4-巰基苯甲酸(4-MBA)修飾的空心金納米球與金納米殼的SERS圖譜,發(fā)現(xiàn)其他條件一樣時,前者在1080 cml處(4-MBA特征峰)的峰值是后者的10倍,表明了該材料有很好的SERS活性。(2)通過上述種子介導(dǎo)生長法所制備的單分散空心金納米球當(dāng)作SERS基底來構(gòu)建SERS tags.首先,四巰基苯甲酸被當(dāng)作拉曼信號分子標(biāo)記SERS標(biāo)簽(tags),同時它也是一個偶聯(lián)劑。其末端的羧基和CEA單克隆抗體上的氨基經(jīng)過活化后偶聯(lián)。然后二巰基乙醇用來作為保護劑封閉SERS tags上其他未結(jié)合位點并防止空心金納米球聚集,最后修飾上CEA單克隆抗體,SERS tags也就成功構(gòu)建了。另外一方面,粒徑超過1μm的磁性微球先包裹二氧化硅層提高其穩(wěn)定性,然后在其表面修飾CEA多克隆抗體,磁珠捕獲探針同時也用來當(dāng)作富集和分離基底。并用紅外光譜等對空心金納米球SERS tags和磁珠捕獲探針的構(gòu)建過程進行表征。(3)基于表面增強拉曼免疫分析技術(shù),這種CEA單克隆抗體修飾的空心金納米球SERS tags和CEA多克隆抗體修飾的磁性微球被用來定量檢測濃度在100 ng/mL到10 pg/mL的CEA。結(jié)果顯示在該濃度范圍內(nèi),檢測濃度和拉曼信號強度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。這種探針的檢測極限比實心金納米殼SERS tags用于檢測CEA的極限值低兩個數(shù)量級。這表明所制備的單分散空心金納米球是一種理想用于構(gòu)建定量夾心免疫分析的SERS tags材料,并且該探針具有很好臨床癌癥標(biāo)志物診斷的潛在價值。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R734.2

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9 楊U，

本文編號：1259203