本文關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝癌中B7-H4的高表達(dá)對(duì)T細(xì)胞免疫抑制的研究

  更多相關(guān)文章： 原發(fā)性肝癌 B7-H4 T淋巴細(xì)胞 自噬 免疫抑制 免疫逃逸

【摘要】：背景及目的:原發(fā)性肝癌(primary liver cancer,PLC)是我國常見的惡性腫瘤之一,其死亡率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中高居第3位,具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展迅速、治療困難、死亡率高等特點(diǎn),成為世界范圍內(nèi)惡性腫瘤高發(fā)病率和死亡率的主要因素,當(dāng)前治療原發(fā)性肝癌的方式主要是以手術(shù)切除為主,結(jié)合術(shù)前或術(shù)后放化療,微創(chuàng)治療及生物治療的模式。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展及對(duì)腫瘤研究的不斷深入,惡性腫瘤的免疫靶向治療方式成為目前研究的熱點(diǎn),其中T細(xì)胞免疫和B7家族中負(fù)性共刺激分子B7-H4在腫瘤細(xì)胞發(fā)生發(fā)展過程中的免疫應(yīng)答越來越受到重視。在腫瘤免疫應(yīng)答過程中T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫起關(guān)鍵作用,T淋巴細(xì)胞活化及抗原特異性T細(xì)胞免疫應(yīng)答的產(chǎn)生及維持至少需要2個(gè)信號(hào):第一信號(hào)由位于抗原提呈細(xì)胞(APC)上的抗原肽-組織相容性抗原(MHC)與T細(xì)胞表面的受體(TCR)相互識(shí)別作用產(chǎn)生;第二信號(hào)由位于APC上的刺激分子與T細(xì)胞上相對(duì)應(yīng)的受體結(jié)合產(chǎn)生,又稱協(xié)同共刺激信號(hào)。共刺激信號(hào)傳導(dǎo)途徑一方面增強(qiáng)T細(xì)胞免疫應(yīng)答過程中的正性第二信號(hào),另一方面下調(diào)T細(xì)胞免疫應(yīng)答過程中的負(fù)性第二信號(hào),在缺少TCR第二信號(hào)的情況下,會(huì)導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞克隆無能或抑制T淋巴細(xì)胞的活化與功能,最終導(dǎo)致免疫抑制及免疫逃逸。負(fù)性共刺激分子B7-H4屬于B7免疫球蛋白超家族,目前研究表明在腫瘤中B7-H4對(duì)T細(xì)胞免疫應(yīng)答具有顯著的負(fù)性調(diào)節(jié)作用,目前是腫瘤免疫治療的研究熱點(diǎn)。對(duì)于該課題,我們課題組前期已經(jīng)作了一些相關(guān)研究并取得一定成果:(1)采用免疫熒光技術(shù)對(duì)80例人原發(fā)性肝癌和癌旁組織,20例正常肝組織中B7-H4的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明:人原發(fā)性肝癌組織中B7-H4的表達(dá)顯著高于肝癌旁組織和正常肝組織。(2)采用熒光免疫組化染色檢測(cè)80例人肝癌組織中B7-H4的表達(dá)與CD4+T、CD8+T細(xì)胞浸潤程度及功能性細(xì)胞因子TGF-β1、IFN-γ分泌相關(guān)性。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明:人原發(fā)性肝癌組織中B7-H4的表達(dá)水平與肝癌內(nèi)CD4+T,CD8+T淋巴細(xì)胞浸潤程度,功能性細(xì)胞因子TGF-β1和IFN-γ分泌均呈負(fù)相關(guān)。(3)采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)人原發(fā)性肝癌及癌旁組織中純化分離出CD8+T細(xì)胞中B7-H4,IFN-γ及自噬上游信號(hào)通路PI3K-AKT-m TOR相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果表明:與癌旁組織相比,肝癌組織純化分離出CD8+T細(xì)胞中B7-H4表達(dá)明顯上調(diào),細(xì)胞因子IFN-γ表達(dá)明顯下降;CD8+T細(xì)胞中P-AKT/AKT,P-m TOR/m TOR比值上升。提示原發(fā)性肝癌組織CD8+T中B7-H4表達(dá)上調(diào)可能通過PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路促進(jìn)CD8+T細(xì)胞發(fā)生異常自噬。結(jié)合前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果,本次實(shí)驗(yàn)主要檢測(cè)從人原發(fā)性肝癌及癌旁組織中純化分離出CD8+T細(xì)胞中的自噬下游信號(hào)通路中ATG7、ATG5-ATG12、LC3I、LC3II相關(guān)蛋白及ATG7 m RNA、LC3II m RNA的表達(dá)情況,探討人原發(fā)性肝癌組織中B7-H4高表達(dá)對(duì)T細(xì)胞免疫抑制的影響。方法:本次實(shí)驗(yàn)首先采用免疫磁珠分選技術(shù)從同一來源的新鮮人原發(fā)性肝癌組織及癌旁組織中純化分離出CD8+T細(xì)胞,一方面利用Western Blot技術(shù)分別檢測(cè)兩組CD8+T細(xì)胞中自噬下游信號(hào)通路中ATG7、ATG5-ATG12、LC3I、LC3II相關(guān)蛋白的表達(dá)情況;另一方面利用熒光定量PCR技術(shù)分別檢測(cè)兩組CD8+T細(xì)胞中ATG7及自噬標(biāo)志性蛋白LC3II的m RNA表達(dá)情況。應(yīng)用SPSS13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用的統(tǒng)計(jì)方法為:兩樣本的t檢驗(yàn),在P0.05時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從而探討人原發(fā)性肝癌組織中B7-H4高表達(dá)對(duì)T細(xì)胞免疫抑制的影響。結(jié)果:(1)自噬相關(guān)蛋白LC3I在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯低于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.72,P=0.001)。(2)自噬標(biāo)志性蛋白LC3II在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.68,P=0.001)。(3)自噬相關(guān)蛋白ATG7在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.49,P=0.004)。(4)自噬相關(guān)蛋白ATG5-ATG12在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.72,P=0.003)。(5)ATG7 m RNA在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t,=4.14,P=0.025)。(6)LC3II m RNA在原發(fā)性肝癌CD8+T細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于癌旁組織,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.29,P=0.005)。結(jié)論:自噬下游信號(hào)通路中ATG7、ATG5-ATG12、LC3II相關(guān)蛋白的表達(dá)在原發(fā)性肝癌組織CD8+T細(xì)胞中明顯高于癌旁組織,自噬相關(guān)蛋白LC3I的表達(dá)在原發(fā)性肝癌組織CD8+T細(xì)胞中明顯低于癌旁組織;同時(shí),ATG7及LC3II的m RNA的表達(dá)在原發(fā)性肝癌組織CD8+T細(xì)胞中明顯高于癌旁組織,與其蛋白的表達(dá)趨勢(shì)一致,結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們可以推論人原發(fā)性肝癌組織中B7-H4的高表達(dá),導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞中PI3K-AKT-m TOR信號(hào)通路的激活,進(jìn)而激活下游自噬相關(guān)因子,使CD8+T細(xì)胞發(fā)生異常自噬,抑制T細(xì)胞的免疫功能,降低了T細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng),使腫瘤產(chǎn)生免疫抑制和免疫逃逸的現(xiàn)象。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姚玉霞;原發(fā)性肝癌自發(fā)破裂誤診1例[J];臨床薈萃;2000年10期

2 周最明,梁巧明;原發(fā)性肝癌6例臨床病理分析[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2000年01期

3 苑秀軍,鄭有貴,劉東屏,傅寶玉;原發(fā)性肝癌病人血清α轉(zhuǎn)化因子測(cè)定及意義[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年S1期

4 汪耀,曾學(xué)寨,陳巖,陳曼麗,錢貽簡;老年人原發(fā)性肝癌23例臨床病理分析[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

5 顧長虹,孫玉琢,唐淑賢;原發(fā)性肝癌自發(fā)破裂出血25例的診斷和治療[J];中國急救醫(yī)學(xué);2000年05期

6 邱金華,許岸高;以腹瀉為首發(fā)表現(xiàn)的原發(fā)性肝癌15例臨床分析[J];廣州醫(yī)藥;2000年02期

7 白波,李松波;原發(fā)性肝癌誤診原因分析[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2000年04期

8 盛家和,洪西田,王征帆;乙型肝炎病毒感染模式與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究[J];疾病監(jiān)測(cè);2000年04期

9 邱清武;一家族原發(fā)性肝癌9例報(bào)告[J];臨床消化病雜志;2000年02期

10 馮少春,張瑛;一家兄妹四人均患原發(fā)性肝癌[J];蘭州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年03期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 左朝暉;譚春祁;莫?jiǎng)俅?周德善;歐陽永忠;梁趙玉;古善智;柴小立;許若才;;原發(fā)性肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的診治[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 覃曉;梁雪婧;孫振;梁水庭;;原發(fā)性肝癌術(shù)后生存10年以上61例分析[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 潘立陽;李曉楓;馬莉;高曉虹;;非肝炎人群原發(fā)性肝癌危險(xiǎn)因素1:3病例對(duì)照研究[A];全國腫瘤流行病學(xué)和腫瘤病因?qū)W學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 周一汝;陳曉英;;原發(fā)性肝癌切除后經(jīng)皮下藥泵化療50例體會(huì)[A];全國外科護(hù)理學(xué)術(shù)會(huì)議暨專題講座論文匯編[C];2000年

5 李忱瑞;史仲華;郝玉芝;劉德忠;郭彥君;曾輝英;姜文浩;李槐;周純武;;經(jīng)皮肝穿刺注射無水乙醇配合肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)治療原發(fā)性肝癌[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一次全國介入醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

6 黎樂群;李航;;原發(fā)性肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的再治療選擇[A];第八屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

7 李桂榮;;原發(fā)性肝癌86例分析[A];第八屆全國肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

8 吳麗娟;;老年原發(fā)性肝癌臨床分析[A];中國老年學(xué)學(xué)會(huì)2006年老年學(xué)學(xué)術(shù)高峰論壇論文集[C];2006年

9 楊紅梅;樊靜;;“暈圈”在超聲診斷原發(fā)性肝癌中的價(jià)值[A];2006年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

10 黃建釗;石承先;范偉;茍欣;馮新富;湯可立;張德林;范永峰;顧紅光;吳剛;;區(qū)域性灌注化療在原發(fā)性肝癌手術(shù)切除后的療效觀察[A];2007年貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)外科分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 文一;中西醫(yī)互補(bǔ)治療原發(fā)性肝癌有優(yōu)勢(shì)[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2013年

2 日升;拜耳支持原發(fā)性肝癌規(guī)范化診療推廣項(xiàng)目[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年

3 程祖亨;原發(fā)性肝癌到底要不要手術(shù)[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)(漢);2012年

4 胡繼雄;隱匿殺手原發(fā)性肝癌[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2003年

5 曾運(yùn)紅　譚衛(wèi)仙;原發(fā)性肝癌的主要危險(xiǎn)因素[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2004年

6 金鷗邋岳金鳳 記者 吳天飛;研究發(fā)現(xiàn) 吃樹莓葡萄蘋果能防原發(fā)性肝癌[N];哈爾濱日?qǐng)?bào);2008年

7 馮大夫;原發(fā)性肝癌的特點(diǎn)及診治[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2000年

8 冀京蕊;如何發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2008年

9 忠文;治原發(fā)性肝癌驗(yàn)方[N];民族醫(yī)藥報(bào);2001年

10 朱永康（江蘇省中醫(yī)院普外科主任）;原發(fā)性肝癌不一定有臨床癥狀[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇成豪;廈門地區(qū)HBV感染、環(huán)境因素及基因多態(tài)性與原發(fā)性肝癌的關(guān)聯(lián)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 穆罕默德（Mohammed Alnaggar）;原發(fā)性肝癌冷凍療法對(duì)肝功能的影響[D];華中科技大學(xué);2015年

3 劉志輝;原發(fā)性肝癌微量元素與化療藥物敏感性的相關(guān)性研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

4 劉忠;IER3基因在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及意義[D];青島大學(xué);2015年

5 張豐華;原發(fā)性肝癌證型分布演變規(guī)律及柴胡皂甙D誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞分化的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2009年

6 盧彥達(dá);原發(fā)性肝癌三維適形放療乙型肝炎病毒再激活[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

7 高姍;上海市區(qū)原發(fā)性肝癌的流行病學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 許飛;原發(fā)性肝癌肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)及聯(lián)合調(diào)強(qiáng)放療的臨床研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

9 岳小強(qiáng);舌質(zhì)顏色的模式識(shí)別及原發(fā)性肝癌患者舌色的臨床研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 高春;2型糖尿病對(duì)原發(fā)性肝癌影響的臨床和基礎(chǔ)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李沖;老年原發(fā)性肝癌患者臨床病理特點(diǎn)及治療預(yù)后分析[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

2 劉康;原發(fā)性肝癌TAGE治療后VEGF與HIF-1α的變化及意義[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 劉金明;POSSUM及P-POSSUM評(píng)分系統(tǒng)預(yù)測(cè)原發(fā)性肝癌患者行肝切除術(shù)風(fēng)險(xiǎn)的價(jià)值[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 祝朝前;重組人p53腺病毒聯(lián)合肝動(dòng)脈栓塞化療術(shù)治療原發(fā)性肝癌前后T細(xì)胞亞群變化的臨床研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 劉偉;首次TACE對(duì)原發(fā)性肝癌患者肝腎功能的近期影響[D];石河子大學(xué);2015年

6 趙亞林;HBV相關(guān)原發(fā)性肝癌合并PVTT患者1年生存分析及中醫(yī)證型分析[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

7 李瑩;140例乙肝相關(guān)性原發(fā)性肝癌中醫(yī)證候及心理健康調(diào)查研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 劉文村;MRI對(duì)原發(fā)性肝癌TACE術(shù)后療效的評(píng)估[D];青海大學(xué);2016年

9 李瑞鋒;血清AFP、CA125、TBA單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷價(jià)值[D];青海大學(xué);2016年

10 樊強(qiáng);磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)水平分析及其作為CAR-T靶向分子的可行性研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：1173407