本文關鍵詞：IFN-γ調節(jié)CIK對T細胞亞群的影響及抗腫瘤作用的評價

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【摘要】：目的:通過研究CIK細胞誘導培養(yǎng)過程中T細胞激活與調節(jié)方式,探索CIK細胞的實質,為CIK細胞免疫治療效果的提升以及應用范圍的延伸提供理論依據。方法一、利用流式細胞術分析CIK細胞誘導培養(yǎng)過程中T細胞凋亡的情況。二、通過分析CIK細胞誘導培養(yǎng)過程中不同的免疫調節(jié)因子對T細胞的調節(jié)作用。三、對比不同實驗組TCRBV亞家族表達譜、細胞分化比例,靶細胞殺傷實驗衡量CIK的胞毒活性。結果:一、IFN-γ使CIK誘導培養(yǎng)過程中CD3+CD4+細胞比例降低。二、IFN-γ在CIK誘導培養(yǎng)過程中抑制Treg細胞,提高CD3+CD56+細胞分化比例,并最終提高CIK抗腫瘤能力。三、體外誘導的CIK細胞對腫瘤患者表達偏移的TCRBV亞家族有糾正作用,能夠使T細胞庫中數量減少或被抑制的T細胞重新激活并增殖。結論:在CIK細胞的誘導培養(yǎng)過程中T細胞受到了免疫調節(jié),其中IFN-γ對Treg細胞的抑制可能是調節(jié)的機制之一;體外誘導培養(yǎng)CIK細胞對T細胞多樣性的恢復有促進作用,這對腫瘤患者免疫功能的恢復可能起到重要作用。
【關鍵詞】：CIK Treg TCR TCRBV
【學位授予單位】：廣東藥學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R73-36
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 第一部分 CIK誘導培養(yǎng)過程中的細胞凋亡10-18
• 引言10
• 1 材料10-11
• 1.1 樣本10
• 1.2 試劑10-11
• 1.3 儀器11
• 2 方法11-13
• 2.1 PBMC分離與CIK誘導培養(yǎng)11-12
• 2.2 流式細胞術分析CIK細胞亞群12
• 2.3 細胞凋亡分析12-13
• 3 結果13-16
• 3.1 CIK誘導培養(yǎng)初期細胞數減少13
• 3.2 CIK誘導培養(yǎng)初期部分細胞凋亡13-14
• 3.3 IFN-γ使T細胞群（CD3+）比例降低14-15
• 3.4 IFN-γ對CD4+T細胞的抑制作用15-16
• 4 小結16-18
• 第二部分 CIK誘導培養(yǎng)過程中Treg細胞受到抑制18-27
• 引言18
• 1 材料18-19
• 1.1 樣本18
• 1.2 試劑18
• 1.3 儀器18-19
• 2 方法19-22
• 2.1 PBMC分離19-20
• 2.2 細胞的誘導培養(yǎng)20
• 2.3 流式細胞術分析CD4+CD25+細胞比例20
• 2.4 CIK細胞總RNA提取20-21
• 2.5 反轉錄合成cDNA第一股鏈21-22
• 2.6 熒光定量PCR與分析FoxP3 基因表達22
• 3 結果22-25
• 3.1 IFN-γ 提高CIK細胞群中CD3+CD56+細胞的比例22-23
• 3.2 IFN-γ 降低CIK細胞群中CD4+CD25+細胞的比例23-24
• 3.3 Fox P3 基因轉錄水平的差異24-25
• 3.4 CIK胞毒活性25
• 4 小結25-27
• 第三部分 CIK對T細胞平衡的調節(jié)27-34
• 引言27
• 1 材料27-28
• 1.1 樣本27
• 1.2 試劑27
• 1.3 儀器27-28
• 2 方法28-31
• 2.1 流式細胞分析與細胞分選28
• 2.2 CD3+CD56+細胞分化比例分析28-29
• 2.3 K562 靶細胞殺傷實驗29
• 2.5 總RNA提取29-30
• 2.6 TCRBV亞家族RT-PCR30
• 2.7 TCRBV亞家族表達分析30-31
• 3 結果31-33
• 3.1 PBMC與CIK細胞TCRBV基因亞家族表達差異31-33
• 4 小結33-34
• 討論34-38
• 參考文獻38-42

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