本文關(guān)鍵詞：電針不同穴位對(duì)功能性腸病大鼠雙向調(diào)節(jié)機(jī)制初探

  更多相關(guān)文章： 功能性腸病 電針 腦腸肽 c-kit蛋白 雙向調(diào)節(jié) 機(jī)理

【摘要】：目的針刺對(duì)機(jī)體的影響雖然是多方面的,但同一穴位是否對(duì)同一器官在不同的病理狀態(tài)下存在雙向調(diào)節(jié)作用,也就是在激發(fā)機(jī)體自身固有的調(diào)節(jié)系統(tǒng)的前提條件下,可以起到這種療法防治疾病、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力的作用,是本課題的主要研究目標(biāo)。我們從功能性腸病切入,以功能性腹瀉和功能性便秘這兩種相反病理生理狀態(tài)的疾病為研究對(duì)象,采用電針刺激可調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)的穴位“天樞”、“大腸俞”、“曲池”、“上巨虛”,觀察其對(duì)與大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)相關(guān)的腦腸肽含量和c-kit蛋白表達(dá)的影響,研究不同穴位對(duì)同一內(nèi)臟活動(dòng)的“雙向調(diào)節(jié)機(jī)制”,系統(tǒng)探討電針刺激穴位引起雙向調(diào)節(jié)效應(yīng)的作用靶點(diǎn)以及促使這種效應(yīng)產(chǎn)生的生物學(xué)機(jī)制。 方法本論文分為理論研究和實(shí)驗(yàn)研究?jī)刹糠帧＠碚撗芯坎糠质峭ㄟ^(guò)有關(guān)針灸治療功能性便秘(FC)、功能性腹瀉(FD)的古今文獻(xiàn)、現(xiàn)代研究進(jìn)展回顧、挖掘、分析,預(yù)期證實(shí)針灸是功能性便秘和腹瀉的重要治法。實(shí)驗(yàn)研究部分首先采用番瀉葉灌胃復(fù)制FD大鼠模型,冰水灌胃復(fù)制FC大鼠模型,在造模結(jié)束后,采用ELISA法及免疫印跡動(dòng)態(tài)觀察模型大鼠血清及組織中GAS、SP、 Ghrelin、VIP、SS、GAL及結(jié)腸組織c-kit蛋白的動(dòng)態(tài)表達(dá),探討其在FD和FC發(fā)病中的作用。其次是在成功復(fù)制FD和FC大鼠模型的基礎(chǔ)上,采用電針刺激不同穴位組合對(duì)FD和FC大鼠進(jìn)行干預(yù)治療,觀察其對(duì)FD和FC大鼠血清及組織中GAS、SP、Ghrelin、VIP、SS、GAL含量及結(jié)腸組織中c-kit蛋白表達(dá)的影響,從分子水平探討電針雙向調(diào)節(jié)功能性腸病的作用機(jī)理,探討同一穴位是否對(duì)同一器官在不同的病理狀態(tài)下存在雙向調(diào)節(jié)作用的生物學(xué)機(jī)制。 結(jié)果(1)采用番瀉葉灌胃復(fù)制FD大鼠模型,模型組大鼠隨著造模時(shí)間不同其體質(zhì)量增長(zhǎng)率、腹瀉指數(shù)、稀便率、稀便級(jí),與空白組比較,有顯著性差異(P0.01),模型組大鼠體質(zhì)量呈負(fù)增長(zhǎng)但趨勢(shì)平緩,腹瀉指數(shù)、稀便率、稀便級(jí)均較空白組顯著性增多。模型大鼠結(jié)腸通過(guò)HE染色在光鏡下可以呈現(xiàn)以下表現(xiàn)：結(jié)腸粘膜形態(tài)完好,粘膜下未現(xiàn)充血、水腫,上皮細(xì)胞排列整齊,尚無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。 采用番瀉葉灌胃復(fù)制FC大鼠模型,模型組大鼠隨著造模時(shí)間不同其體質(zhì)量增長(zhǎng)率、24小時(shí)糞便粒數(shù)、24小時(shí)糞便質(zhì)量、糞便含水量及首粒黑便排出時(shí)間,與空白組比較,有顯著性差異(P0.01),模型組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)但趨勢(shì)平緩,24小時(shí)糞便粒數(shù)、24小時(shí)糞便質(zhì)量、糞便含水量均較空白組顯著性減少,首粒黑便排出時(shí)間較空白組顯著性增加。模型大鼠結(jié)腸通過(guò)HE染色在光鏡下可以呈現(xiàn)以下表現(xiàn)：結(jié)腸粘膜形態(tài)完好,粘膜下未現(xiàn)充血、水腫,上皮細(xì)胞排列整齊,尚無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。 (3)對(duì)于FD大鼠,與空白組比較,模型組均可使血清及組織中GAS、SP、 Ghrelin含量顯著增高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.01),同時(shí)模型組均可使血清及組織中VIP、SS、GAL含量顯著降低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.01)。 對(duì)于FC大鼠,與空白組比較,模型組均可使血清及組織中GAS、SP、Ghrelin含量顯著降低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.01),同時(shí)模型組均可使血清及組織中VIP、SS、GAL含量顯著性增高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.01)。 (4)對(duì)于FD大鼠,空白組相比,模型組大鼠c-kit的蛋白表達(dá)明顯增加(P0.01)。對(duì)于FC大鼠,空白組相比,模型組大鼠c-kit的蛋白表達(dá)明顯減少(P0.01)。 (5)對(duì)于FD大鼠,在電針干預(yù)第11天,各電針治療組均可使大鼠1小時(shí)內(nèi)排便粒數(shù)、腹瀉指數(shù)、稀便率和稀便級(jí)顯著降低,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),電針Ⅰ組對(duì)其改善最為明顯。 對(duì)于FC大鼠,在電針干預(yù)第11天,各電針治療組均可使大鼠24小時(shí)糞便粒數(shù)、24小時(shí)糞便質(zhì)量、糞便含水量顯著增加,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),電針Ⅱ組對(duì)其改善最為明顯。 (6)對(duì)于FD大鼠,與模型組比較,各電針治療組均可使血清及絕大多數(shù)組織中GAS、SP、Ghrelin含量降低,VIP、SS、GAL含量升高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.05或P0.01),但均不能恢復(fù)到正常水平,電針Ⅰ組可使大鼠血清及絕大多數(shù)組織中GAS、SP、Ghrelin含量下降及VIP、SS、GAL含量升高并接近正常水平。 對(duì)于FC大鼠,與模型組比較,各電針治療組均可使血清及絕大多數(shù)組織中GAS、SP、Ghrelin含量升高,VIP、SS、GAI含量降低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著性差異(P0.05或P0.01),但均不能恢復(fù)到正常水平,電針Ⅱ組可使大鼠血清及絕大多數(shù)組織中GAS、SP、Ghrelin含量升高,VIP、SS、GAL含量降低并接近正常水平。 (7)對(duì)于FD大鼠,與模型組相比,電針治療三組可以使c-kit的蛋白表達(dá)減少,電針1組c-kit的蛋白表達(dá)明顯減少(P0.05),電針Ⅱ組和電針Ⅲ組c-kit的蛋白表達(dá)減少不明顯,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,無(wú)顯著性差異(P0.05)。電針Ⅰ組與電針Ⅱ組、電針Ⅲ組相比c-kit的蛋白表達(dá)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,有顯著差異(P0.05)。 對(duì)于FC大鼠,與模型組相比,電針治療三組c-kit的蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),電針Ⅱ組c-kit的蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),電針Ⅱ組與電針Ⅰ組、電針Ⅲ組相比c-kit的蛋白表達(dá)有顯著差異(P0.05)。 結(jié)論(1)采用番瀉葉灌胃可成功復(fù)制FD模型,冰水灌胃可成功復(fù)制FC模型,模型具有良好的穩(wěn)定性。 (2)腦腸肽GAS、SP、Ghrelin、VIP、SS、GAL和c-kit蛋白的平衡參與了FD和FC的發(fā)生、發(fā)展。 (3)對(duì)于FD和FC模型大鼠,其結(jié)腸組織中c-kit蛋白的表達(dá)與腦腸肽GAS、 SP、Ghrelin的表達(dá)之間均存在程度相等的效應(yīng)關(guān)系,呈正相關(guān),與腦腸肽VIP、 SS、GAI的表達(dá)之間均存在程度不等的效應(yīng)關(guān)系,呈負(fù)相關(guān)。 (4)電針“天樞”、“大腸俞”、“曲池”、“上巨虛”對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用均與相關(guān)腦腸肽含量及c-kit表達(dá)的變化有著密不可分的聯(lián)系。其中“天樞”、“大腸俞”對(duì)胃腸功能發(fā)揮著一定的調(diào)節(jié)作用,這種調(diào)節(jié)作用主要表現(xiàn)為抑制胃腸運(yùn)動(dòng),“曲池”、“上巨虛”對(duì)胃腸功能發(fā)揮著一定的調(diào)節(jié)作用,這種調(diào)節(jié)作用主要表現(xiàn)為促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)。針刺上述穴位對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的這種調(diào)節(jié)作用可能是通過(guò)激活腦腸肽對(duì)胃腸平滑肌細(xì)胞動(dòng)力調(diào)節(jié)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及調(diào)節(jié)c-kit蛋白表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。而且,在本研究中,穴位的雙向調(diào)節(jié)作用并不是按照傳統(tǒng)的共識(shí)表現(xiàn)為同一穴位組合對(duì)不同病理狀態(tài)下的內(nèi)臟器官存在著雙向調(diào)節(jié)效應(yīng),而是表現(xiàn)為不同穴位的組合發(fā)揮綜合的良性的調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：功能性腸病 電針 腦腸肽 c-kit蛋白 雙向調(diào)節(jié) 機(jī)理
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245.97
【目錄】：

• 摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-19
• 第一部分 理論研究19-43
• 1. 祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)功能性腸病病因病機(jī)研究19-26
• 1.1 功能性便秘的中醫(yī)病因病機(jī)研究19-24
• 1.2 功能性腹瀉的中醫(yī)病因病機(jī)研究24-26
• 2. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)功能性腸病機(jī)理的研究26-32
• 2.1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)功能性便秘(FC)機(jī)理的研究26-30
• 2.2 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)功能性腹瀉(FD)機(jī)理的研究30-32
• 3. 針灸調(diào)節(jié)功能性腸病的文獻(xiàn)研究32-41
• 3.1 針灸調(diào)節(jié)功能性腸病的古代認(rèn)識(shí)32-33
• 3.2 針灸治療功能性腸病的現(xiàn)代研究33-41
• 4. 針刺調(diào)節(jié)胃功能的中樞機(jī)制研究41-43
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究43-110
• 引言43
• 實(shí)驗(yàn)一：腦腸肽GAS、SP、Ghrelin、VIP、SS、GAL和c-kit蛋白在大鼠功能性腸病中動(dòng)態(tài)表達(dá)的研究43-65
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料43-44
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物43
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品43-44
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備44
• 2. 實(shí)驗(yàn)條件44
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法44-52
• 3.1 動(dòng)物分組45
• 3.2 功能性腸病大鼠模型制備45
• 3.3 動(dòng)物模型評(píng)定方法45-46
• 3.4 觀察方法和指標(biāo)測(cè)定46-52
• 3.5 統(tǒng)計(jì)方法52
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果52-61
• 4.1 功能性腹瀉大鼠模型評(píng)定結(jié)果52-57
• 4.2 功能性便秘大鼠模型評(píng)定結(jié)果57-61
• 5. 討論61-64
• 5.1 各組大鼠血清及組織中腦腸肽動(dòng)態(tài)表達(dá)與功能性腸病相關(guān)性分析61-63
• 5.2 各組大鼠結(jié)腸粘膜c-kit蛋白的動(dòng)態(tài)表達(dá)與功能性腸病相關(guān)性分析63-64
• 6. 實(shí)驗(yàn)小結(jié)64-65
• 實(shí)驗(yàn)二：電針不同穴位對(duì)功能性腸病大鼠血清GAS、SP、Ghrelin、VIP、SS、GAL及結(jié)腸粘膜c-kit蛋白表達(dá)的影響及雙向調(diào)節(jié)機(jī)制初探65-110
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料65-66
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物65
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品65-66
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備66
• 2. 實(shí)驗(yàn)條件66-67
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法67-75
• 3.1 動(dòng)物分組67
• 3.2 功能性腸病大鼠模型制備67
• 3.3 治療方案67-68
• 3.4 電針不同穴位對(duì)功能性腸病大鼠糞便形態(tài)學(xué)和結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)影響的評(píng)價(jià)指標(biāo)68-69
• 3.5 觀察方法和指標(biāo)測(cè)定69-75
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果75-90
• 4.1 各組大鼠一般狀態(tài)75
• 4.2 電針不同穴位治療對(duì)功能性腸病大鼠相關(guān)指標(biāo)的影響75-90
• 5. 討論90-110
• 5.1 本課題的立項(xiàng)依據(jù)90-94
• 5.2 功能性腸病的治療現(xiàn)狀94-95
• 5.3 本實(shí)驗(yàn)研究的設(shè)計(jì)思路95-96
• 5.4 腦腸肽對(duì)胃腸平滑肌細(xì)胞動(dòng)力調(diào)節(jié)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制96-97
• 5.5 c-kit對(duì)胃腸動(dòng)力調(diào)節(jié)機(jī)制97-98
• 5.6 電針不同穴位對(duì)功能性腸病大鼠血清及組織腦腸肽含量的影響98-103
• 5.7 電針不同穴位對(duì)功能性腸病大鼠c-kit蛋白表達(dá)的影響103-104
• 5.8 穴位選擇及配伍依據(jù)104-107
• 5.9 電針調(diào)節(jié)功能性腸病的優(yōu)越性與療效評(píng)價(jià)107
• 5.10 電針不同穴位雙向調(diào)節(jié)功能性腸病機(jī)制初探107-110
• 結(jié)論110-111
• 參考文獻(xiàn)111-122
• 附錄122-124
• 攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果124-125
• 致謝125-126
• 作者簡(jiǎn)介126

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：949322