本文關(guān)鍵詞：針刺對MCAO大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)節(jié)神經(jīng)—血管功能的影響及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 針刺 星形膠質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)-血管功能 MCAO 大鼠

【摘要】：目的：研究針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴對MCAO大鼠神經(jīng)功能損傷恢復(fù)、星形膠質(zhì)細(xì)胞激活、腦微循環(huán)血流量及腦組織葡萄糖代謝的影響，探討針刺對MCAO大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)節(jié)腦微循環(huán)血流量及葡萄糖代謝的作用機(jī)制，為闡釋針刺治療缺血性腦中風(fēng)的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。 方法：采用線栓法建立大腦中動脈栓塞（MCAO）大鼠模型，連續(xù)針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴7天，通過神經(jīng)行為學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)、實(shí)時(shí)定量PCR、WesternBlot等方法，觀察針刺對MCAO大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)、腦微循環(huán)血流量、腦組織谷氨酸含量、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、代謝性谷氨酸受體（mGluR5）mRNA、花生四烯酸細(xì)胞色素P450表氧化酶（CYP2C11）mRNA表達(dá)的影響，探討針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴對星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及其調(diào)節(jié)腦微循環(huán)血流量的影響及作用機(jī)制；通過觀察針刺對MCAO大鼠乳酸及丙酮酸含量、腦組織GFAP蛋白的表達(dá)、微血管內(nèi)皮細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT1和單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體MCT1、神經(jīng)元葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT3、單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體MCT2的表達(dá)的影響，探討針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴治療對MCAO大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞調(diào)節(jié)腦組織糖代謝的影響及作用機(jī)制。 結(jié)果： 1.連續(xù)針刺曲池穴、內(nèi)關(guān)穴7天能夠顯著改善MCAO大鼠神經(jīng)功能損傷，促進(jìn)其運(yùn)動功能的恢復(fù)，針刺曲池穴與針刺內(nèi)關(guān)穴的效應(yīng)無顯著性差異。 2.針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴能夠促進(jìn)MCAO大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞活化，表現(xiàn)為星形膠質(zhì)細(xì)胞的增多及GFAP mRNA、GFAP蛋白表達(dá)的增強(qiáng)。 3.針刺顯著提高M(jìn)CAO大鼠腦微循環(huán)血流量以及MCAO大鼠腦組織中mGluR5mRNA、CYP2C11mRNA的表達(dá)，內(nèi)關(guān)穴在提高mGluR5mRNA的表達(dá)方面明顯優(yōu)于曲池穴。針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴可以有效減少M(fèi)CAO大鼠腦組織中過量的谷氨酸，且內(nèi)關(guān)穴效果優(yōu)于曲池穴。 4.針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴能夠顯著提高M(jìn)CAO大鼠腦組織中丙酮酸含量，以及葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT1、GLUT3，單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體MCT1的表達(dá)，同時(shí)顯著降低MCAO大鼠腦組織中乳酸的含量。 結(jié)論：針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴，能夠激活星形膠質(zhì)細(xì)胞，一方面通過促進(jìn)mGluR5mRNA及CYP2C11mRNA的表達(dá)，使微血管平滑肌舒張，增加MCAO大鼠腦微循環(huán)血流量；另一方面通過星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活，，單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能增強(qiáng)，可以促進(jìn)無氧糖酵解產(chǎn)物乳酸的轉(zhuǎn)運(yùn)及利用，以滿足神經(jīng)元在腦缺血時(shí)的能量需求。這可能是針刺治療缺血性腦中風(fēng)的重要機(jī)制之一。 此外，針刺內(nèi)關(guān)穴、曲池穴，能夠減少缺血腦組織中過度堆積的谷氨酸，減輕其神經(jīng)毒性作用；并顯著增強(qiáng)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在微血管內(nèi)皮細(xì)胞及神經(jīng)元中的表達(dá)，增強(qiáng)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)及利用，有利于缺血腦組織神經(jīng)功能的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：針刺 星形膠質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)-血管功能 MCAO 大鼠
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R245
【目錄】：

• 提要4-6
• Abstract6-12
• 引言12-14
• 一 連續(xù)針刺七天對 MCAO 大鼠腦功能恢復(fù)及組織形態(tài)學(xué)改變的影響14-25
• 1 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物14
• 1.2 主要試劑14
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器14-15
• 2 實(shí)驗(yàn)方法15-17
• 2.1 模型復(fù)制及動物分組15
• 2.2 針刺穴位及方法15-16
• 2.3 指標(biāo)檢測16-17
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-24
• 3.1 MCAO 大鼠一般狀態(tài)17
• 3.2 針刺對 MCAO 大鼠神經(jīng)體征評分的影響17-18
• 3.3 針刺對 MCAO 大鼠 BWT 評分的影響18-20
• 3.4 針刺對 MCAO 大鼠腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響20-24
• 4 小結(jié)24-25
• 二 針刺對 MCAO 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響25-45
• 1 實(shí)驗(yàn)材料25-27
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物25
• 1.2 主要試劑25-27
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器27
• 2 實(shí)驗(yàn)方法27-38
• 2.1 動物模型復(fù)制及分組27-28
• 2.2 針刺方法28
• 2.3 缺血側(cè)腦組織切片的制作28
• 2.4 免疫組織化學(xué)法檢測缺血腦組織中 GFAP 的表達(dá)28-29
• 2.5 實(shí)時(shí)定量 PCR 檢測缺血腦組織中 GFAP mRNA 的表達(dá)29-32
• 2.6 Western Blot 檢測缺血腦組織中 GFAP 的表達(dá)32-38
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-44
• 3.1 針刺對星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá) GFAP 的影響38-41
• 3.2 針刺對缺血腦組織中 GFAP mRNA 表達(dá)的影響41-43
• 3.3 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織中 GFAP 表達(dá)的影響43-44
• 4 小結(jié)44-45
• 三 針刺對軟腦膜微循環(huán)血流量的影響及其調(diào)節(jié)機(jī)制研究45-55
• 1 實(shí)驗(yàn)材料45
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物45
• 1.2 主要試劑45
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器45
• 2 實(shí)驗(yàn)方法45-47
• 2.1 模型復(fù)制及動物分組45-46
• 2.2 針刺方法46
• 2.3 軟腦膜微循環(huán)血流量檢測46
• 2.4 酶化學(xué)法檢測缺血腦組織中谷氨酸的含量46-47
• 2.5 實(shí)時(shí)定量 PCR 檢測缺血腦組織中 mGluR5 mRNA 及 CYP2C11 mRNA 的表達(dá)47
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-54
• 3.1 針刺對軟腦膜微循環(huán)血流量的影響47-50
• 3.2 針刺對缺血腦組織谷氨酸含量的影響50-51
• 3.3 針刺對缺血腦組織中 mGluR5 mRNA 表達(dá)的影響51-52
• 3.4 針刺對缺血腦組織中 CYP2C11 mRNA 表達(dá)的影響52-54
• 4 小結(jié)54-55
• 四 針刺對 MCAO 大鼠腦組織葡萄糖代謝的影響及相關(guān)機(jī)制研究55-68
• 1 實(shí)驗(yàn)材料55-56
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物55
• 1.2 主要試劑55
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器55-56
• 2 實(shí)驗(yàn)方法56-58
• 2.1 模型復(fù)制及動物分組56
• 2.2 針刺方法56
• 2.3 酶化學(xué)法檢測缺血腦組織中乳酸的含量56
• 2.4 酶化學(xué)法檢測缺血腦組織中丙酮酸的含量56-57
• 2.5 免疫組化檢測缺血腦組織中 GLUT1 蛋白的表達(dá)57
• 2.6 Western Blot 檢測缺血腦組織中 GLUT1、GLUT3、MCT1、MCT2 的表達(dá)57
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法57-58
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果58-67
• 3.1 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織乳酸的影響58-59
• 3.2 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織丙酮酸的影響59-60
• 3.3 針刺對缺血腦組織中內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá) GLUT1 蛋白的影響60-63
• 3.4 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織中 GLUT3 表達(dá)的影響63-64
• 3.5 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織中 MCT1 表達(dá)的影響64-66
• 3.6 針刺對 MCAO 大鼠缺血腦組織中 MCT2 表達(dá)的影響66-67
• 4 小結(jié)67-68
• 討論68-84
• 1.中醫(yī)對缺血性腦中風(fēng)的認(rèn)識68-70
• 1.1 中風(fēng)病因病機(jī)的歷史沿革68
• 1.2 中風(fēng)的辨證要點(diǎn)68-69
• 1.3 中風(fēng)的治療原則69
• 1.4 中風(fēng)的治療方法69-70
• 2. 腦缺血動物模型的復(fù)制方法70-71
• 2.1 常用腦缺血動物模型復(fù)制方法70-71
• 2.2 本實(shí)驗(yàn)的模型復(fù)制情況71
• 3. 腦缺血動物模型神經(jīng)功能的評價(jià)方法71-74
• 3.1 常用腦缺血動物模型神經(jīng)功能評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)71-74
• 3.2 本實(shí)驗(yàn)的神經(jīng)功能評價(jià)情況74
• 4. 針刺治療缺血性腦中風(fēng)的選穴及針法研究74-77
• 4.1 “醒腦開竅”針法74-75
• 4.2 “保肝護(hù)腦”針法75
• 4.3 “調(diào)神通絡(luò)”針法75-76
• 4.4 “子午流注納甲”針法76
• 4.5 本實(shí)驗(yàn)的選穴及針法76-77
• 5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析77-81
• 5.1 針刺對神經(jīng)功能恢復(fù)及腦組織形態(tài)改變的影響77
• 5.2 針刺對星形膠質(zhì)細(xì)胞激活的調(diào)節(jié)作用77-79
• 5.3 針刺對腦微循環(huán)血流量的改善作用79-80
• 5.4 針刺對腦組織葡萄糖代謝的影響80-81
• 6. 針刺與星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化及神經(jīng)-血管功能81-84
• 結(jié)語84-86
• 參考文獻(xiàn)86-92
• 綜述92-99
• 參考文獻(xiàn)96-99
• 附錄99-100
• 致謝100-101
• 查新報(bào)告101-109
• 發(fā)表論文109-117
• 詳細(xì)摘要117-127

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：919648