本文關鍵詞：電針對坐骨神經(jīng)損傷大鼠感覺運動傳導通路中GAP-43表達影響的研究

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【摘要】：[目的] 本實驗用坐骨神經(jīng)夾持損傷模型,模擬臨床坐骨神經(jīng)損傷,并通過電針給予定時、定性、定量的治療。從感覺運動傳導通路的角度探索電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用機理,并通過生長相關蛋白的表達研究電針治療周圍神經(jīng)損傷的起效因子、起效途徑和起效時間等,為臨床應用電針治療周圍神經(jīng)損傷疾病,改善患者的癥狀及預后提供有力科學證據(jù)。 [方法] 制備大鼠坐骨神經(jīng)夾持損傷模型,選取患側環(huán)跳、殷門、陽陵泉、承山穴進行電針治療,通過對其光熱耐痛閾和斜板試驗的檢測,從行為學角度評價電針治療后大鼠感覺和運動恢復情況；通過對脊髓腹角、背根神經(jīng)節(jié)、損傷點神經(jīng)、神經(jīng)肌肉接頭、肌肉這五個關鍵部位進行染色觀察,從形態(tài)學角度觀察電針對神經(jīng)元再生修復的影響；通過免疫組織化學法檢測感覺運動傳導通路關鍵部位中生長相關蛋白表達的變化,綜合分析得出電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用機制和起效途徑等。 [結果] 1.行為學 斜板試驗結果表明,造模后7d模型組與正常組相比有明顯差異(P0.05),說明坐骨神經(jīng)損傷后,大鼠的運動功能和肌力受到影響,造模成功。電針治療10次后,電針治療組與模型組和模型對照組相比均有顯著性升高(P0.05),且已接近正常組水平。電針治療20次后,電針治療組已達到甚至超過正常組水平,且與模型組和模型對照組相比仍有顯著性差異(P0.05)。說明電針可以有效促進坐骨神經(jīng)損傷大鼠運動功能和下肢肌力的恢復。 光熱耐痛閾結果如下：造模后7d、電針治療10次、20次后,左側(健側)光熱耐痛閾各組間均沒有差異；造模后7d右側(患側)光熱耐痛閾和痛敏分數(shù),模型組與正常組相比均有明顯差異(P0.05),說明坐骨神經(jīng)損傷后,大鼠的感覺功能受到影響。電針治療10次、20次后,大鼠右側光熱耐痛閾電針治療組與模型組和模型對照組相比均有降低(P0.05),痛敏分數(shù)電針治療組與模型組相比有顯著性降低(P0.05),說明電針可以促進坐骨神經(jīng)損傷大鼠感覺功能的恢復。 2.形態(tài)學 腓腸肌濕重結果如下：造模后7d、電針治療10次、20次后,各組大鼠左側腓腸肌濕重均沒有差異。造模后7d,假手術組與模型組大鼠右側腓腸肌濕重均有一定程度的降低,且模型組更為明顯.,模型組與正常組和假手術組相比,其腓腸肌濕重和腓腸肌恢復率均具有顯著性差異(P0.05)。電針治療10次后,治療組大鼠腓腸肌濕重和恢復率均有升高,且與模型組和模型對照組相比有顯著性差異(P0.05),但各組大鼠的腓腸肌濕重和恢復率與正常組相比仍存在差異(P0.05)。電針治療20次后,電針治療組大鼠腓腸肌濕重和恢復率仍高于模型組和模型對照組,但與正常組相比仍有一定差距(P0.05)。 造模后7d,大鼠右側腓腸肌肌細胞直徑模型組明顯小于正常組和假手術組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。電針治療10次后,治療組大鼠右側腓腸肌肌細胞直徑與模型組和模型對照組相比有顯著性增高(P0.05),但與正常組相比仍有差距(P0.05)。電針治療20次后,各組大鼠右側腓腸肌肌細胞直徑皆逐漸升高,且電針治療組明顯優(yōu)于模型組和模型對照組(P0.05),但尚未達到正常組水平。 背根神經(jīng)節(jié)HE染色結果：正常組背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)大部分神經(jīng)元呈圓形,體積較大,胞質(zhì)呈嗜酸性,胞核大而圓,呈嗜堿性,染色較淺,核仁清楚,胞體周圍有衛(wèi)星細胞分布；模型組神經(jīng)元細胞出現(xiàn)腫脹、變形和溶解,神經(jīng)元發(fā)生不同程度的壞死,細胞的形態(tài)大小不一,胞漿染色不均勻；經(jīng)電針治療后,神經(jīng)元細胞腫脹及變形等現(xiàn)象不明顯,胞體形狀較規(guī)則,大多為圓形。 脊髓HE染色結果：正常組脊髓腹角內(nèi)神經(jīng)元細胞排列整齊,細胞核位于中央,核仁清晰,尼氏體分布均勻；模型組脊髓腹角神經(jīng)元排列不規(guī)則,數(shù)量減少,細胞出現(xiàn)腫脹、變性等現(xiàn)象,染色較淺,胞核移向邊緣,尼氏體溶解消失；經(jīng)電針治療后,脊髓腹角神經(jīng)元變性、損傷程度較輕,排列較規(guī)則,部分細胞核移向邊緣,可見少量細胞核再生。 腓腸肌HE染色結果：正常組腓腸肌肌細胞大小一致,排列整齊,胞核清晰,胞漿染色均勻,肌纖維間隙適中；模型組腓腸肌肌細胞直徑明顯縮小,分布不均勻,胞核清晰,但數(shù)量明顯增多,肌纖維間隙增大,呈現(xiàn)萎縮現(xiàn)象；經(jīng)電針治療后腓腸肌肌細胞直徑較均勻,胞核清晰,肌纖維萎縮程度較輕。 坐骨神經(jīng)HE染色結果：正常組坐骨神經(jīng)內(nèi)軸突及雪旺細胞排列整齊；模型組中部分軸突及雪旺細胞排列不規(guī)則,雪旺細胞出現(xiàn)腫脹、潰破,甚至崩裂,膠質(zhì)細胞出現(xiàn)明顯增生；電針組雪旺細胞及軸突基本正常。 運動終板鍍銀染色結果：正常組運動終板呈棕褐色或黑色,結構清晰,邊緣光滑,呈橢圓或卵圓形,肌肉紋理清晰,各部分之間著色均勻,結構對比明顯,無固縮現(xiàn)象；模型組運動終板分布不均勻,體積變小,結締組織增生顯著,染色模糊、淺淡,部分運動終板崩解,只有殘跡可見,殘存大量胞核堆積；電針治療組運動終板逐漸形成,殘跡逐漸減少。3.生長相關蛋白 正常組及假手術組大鼠GAP-43在背根神經(jīng)節(jié)、脊髓腹角、坐骨神經(jīng)、腓腸肌和神經(jīng)肌肉接頭中均有少量表達,陽性神經(jīng)元的胞核呈藍色,胞漿呈棕褐色；造模7d后,模型組大鼠GAP-43在以上關鍵部位中的表達均較正常組和假手術組增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；電針治療10次后,模型組、模型對照組及電針治療組大鼠GAP-43在以上結構中的平均光密度均較正常組顯著增高,且電針治療組的染色范圍和程度明顯優(yōu)于模型組,與其余四組比較差異均具有統(tǒng)計學意義；電針治療20次后,以上結構中電針治療組的GAP-43表達與其余四組比較仍有顯著性差異,且在腓腸肌和坐骨神經(jīng)中的平均光密度與治療10次相比,有一定程度的降低。 [結論] 電針可以提高坐骨神經(jīng)損傷大鼠腓腸肌的肌力,防止肌肉萎縮,并能提升大鼠的痛覺敏感程度,從而促進坐骨神經(jīng)損傷大鼠運動和感覺功能的恢復；電針治療坐骨神經(jīng)損傷的作用途徑之一是通過營養(yǎng)和保護背根神經(jīng)節(jié)中的感覺神經(jīng)元、脊髓腹角中的運動神經(jīng)元、損傷點神經(jīng)、腓腸肌中的肌細胞和神經(jīng)肌肉接頭處的神經(jīng)突觸,減少感覺和運動神經(jīng)元的變性和死亡,誘導神經(jīng)元軸突的生長和突觸的形成,從而促進損傷神經(jīng)的修復；電針治療坐骨神經(jīng)損傷的起效機理之一為促進感覺運動傳導通路中關鍵部位的生長相關蛋白的表達,為神經(jīng)元提供良好的微環(huán)境,從而促進損傷神經(jīng)的再生修復。
【關鍵詞】：電針 感覺 生長相關蛋白 運動 坐骨神經(jīng)損傷
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R274.9;R246.9
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-13
• 文獻綜述13-37
• 綜述一 坐骨神經(jīng)損傷的中醫(yī)學研究概況13-27
• 1 概述13
• 2 病因病機13-14
• 3 辨證要點14
• 4 治療原則14
• 5 臨床治療14-20
• 6 作用機理20-23
• 參考文獻23-27
• 綜述二 坐骨神經(jīng)損傷的實驗研究進展27-37
• 1 概述27
• 2 坐骨神經(jīng)損傷的行為學研究27-28
• 3 坐骨神經(jīng)損傷的形態(tài)學研究28-30
• 4 坐骨神經(jīng)損傷后修復再生機制研究30
• 5 關于生長相關蛋白(GAP-43)30-33
• 參考文獻33-37
• 前言37-39
• 實驗研究39-65
• 材料和方法39-45
• 實驗一、電針治療坐骨神經(jīng)損傷大鼠的行為學評價39-41
• 實驗二、電針治療坐骨神經(jīng)損傷大鼠的機理研究41-42
• 參考文獻42-43
• 技術路線圖43-45
• 結果45-59
• 討論59-63
• 結論63-65
• 致謝65-67
• 個人簡歷67-69
• 附件69-77
• 附件一、背根神經(jīng)節(jié)HE染色69-70
• 附件二、背根神經(jīng)節(jié)GAP-43免疫組化染色70-71
• 附件三、脊髓腹角HE染色71-72
• 附件四、脊髓腹角GAP-43免疫組化染色72-73
• 附件五、腓腸肌HE染色73-74
• 附件六、腓腸肌GAP-43免疫組化染色74-75
• 附件七、坐骨神經(jīng)HE染色75-76
• 附件八、坐骨神經(jīng)GAP-43免疫組化染色76-77
• 附件九、運動終板鍍銀染色77

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