電針對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨中KS表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:電針對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨中KS表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)是一種極為常見的慢性關(guān)節(jié)疾病。關(guān)節(jié)軟骨進(jìn)行性退變是其主要的病理特征,最終可表現(xiàn)為關(guān)節(jié)軟骨軟化、纖維化、斷裂、脫落以及整個(gè)關(guān)節(jié)面的損傷,從而導(dǎo)致長期疼痛和功能障礙。OA是老年人喪失勞動(dòng)力的重要原因之一,且發(fā)病率逐年增加。誘發(fā)該病的因素有性別、年齡、肥胖、職業(yè)活動(dòng)、損傷、遺傳等。OA的診斷主要依據(jù)其臨床表現(xiàn),影像學(xué)以及生化標(biāo)志物的檢測(cè)。近年來,生化標(biāo)志物的檢測(cè)發(fā)展迅速,它對(duì)OA的早期診斷,病變進(jìn)展觀察及藥物療效評(píng)價(jià)都有重要的臨床價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn),硫酸角質(zhì)素(keratan sulfate,KS)是一種幾乎只存在于關(guān)節(jié)軟骨和椎間盤軟骨的聚集蛋白聚糖中的氨基多糖,它具有良好的精確性和可定量性,可作為直接標(biāo)記物來反應(yīng)關(guān)節(jié)軟骨代謝的情況。OA的治療方法較多,主要包括藥物治療和非藥物治療,其中針灸治療是已被廣泛認(rèn)同的較為有效的非藥物治療方法,而電針作為傳統(tǒng)針灸和現(xiàn)代電生理學(xué)相結(jié)合的產(chǎn)物,既有針刺穴位的優(yōu)點(diǎn),又結(jié)合了電的生理效應(yīng),提高了普通針刺的療效,現(xiàn)已普遍運(yùn)用于臨床。因此本實(shí)驗(yàn)以兔膝關(guān)節(jié)伸直位管型石膏造模法造模,用電針為干預(yù)措施,通過檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨中KS的表達(dá),來探討電針治療膝OA的可能作用機(jī)制。方法:(1)干預(yù)措施:選取6月齡健康新西蘭大耳兔30只,然后采用統(tǒng)計(jì)軟件產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)字,依次將動(dòng)物分為正常對(duì)照組,模型對(duì)照組,電針治療組。每組10只,采用兔膝伸直位管型石膏固定法對(duì)模型對(duì)照組和電針治療組建立模型。造模6w后,選用30號(hào)一寸毫針對(duì)電針治療組實(shí)驗(yàn)兔取陽陵泉、梁丘、血海、足三里四個(gè)穴位進(jìn)針,得氣后連接SDZ-Ⅱ型華佗牌電針治療儀,調(diào)整治療劑量為:4Hz疏波,20Hz密波,脈沖寬度0.5ms,每日20min,連續(xù)治療10d。正常對(duì)照組和模型組于喂養(yǎng)6w后采用空氣栓塞法處死,切開左膝關(guān)節(jié),取左側(cè)股骨內(nèi)側(cè)髁至軟骨下骨大約為0.5cm×0.5cm×0.5cm的軟骨塊,用10%中性福爾馬林溶液固定后,石蠟包埋、切片,HE染色,觀察造模后相關(guān)指標(biāo)變化。治療組在進(jìn)行電針治療10d后以同樣方法觀察治療后相關(guān)指標(biāo)改變情況。(2)觀察指標(biāo):①肉眼觀察所有實(shí)驗(yàn)兔左膝關(guān)節(jié)大體形態(tài)變化以及是否有關(guān)節(jié)積液,按Mankin’s評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)軟骨大體形態(tài)進(jìn)行評(píng)分;②光鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨表面的光滑度、色澤、完整性,并按Mankin’s評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)光鏡觀察結(jié)果進(jìn)行評(píng)分;③免疫組化法檢測(cè)兔膝關(guān)節(jié)軟骨中KS的表達(dá):用抗兔KS的試劑盒檢測(cè)兔左膝關(guān)節(jié)軟骨中KS的表達(dá)。(3)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,所有數(shù)據(jù)用x±s表示,對(duì)軟骨結(jié)構(gòu),軟骨細(xì)胞,潮線及HE染色行Mankin’s評(píng)分,并對(duì)評(píng)分及對(duì)各組KS表達(dá)情況分別用t檢驗(yàn)及單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:(1)軟骨大體形態(tài)觀察:正常對(duì)照組軟骨表面光滑完整無裂隙,呈藍(lán)白色透明狀,未見明顯關(guān)節(jié)積液,按Mankin’s軟骨結(jié)構(gòu)評(píng)分均為0分;模型對(duì)照組軟骨表面粗糙,呈灰黃色,關(guān)節(jié)積液呈粘稠渾濁樣變;電針治療組軟骨表面較粗糙,但整體好于模型對(duì)照組,軟骨呈淡黃色,透明度低于正常對(duì)照組,部分可見關(guān)節(jié)積液。(2)HE染色光鏡觀察:正常對(duì)照組鏡下軟骨結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞排列整齊有序,胞體圓潤,潮線完整,基質(zhì)染色均一,Mankin’s評(píng)分記為0分;模型對(duì)照組鏡下軟骨結(jié)構(gòu)粗糙,細(xì)胞排列紊亂,大小不一,可見團(tuán)簇狀聚集,潮線消失,基質(zhì)染色變淺;電針治療組鏡下軟骨結(jié)構(gòu)較完整,細(xì)胞排列比較規(guī)則,少見簇集,潮線基本完整,基質(zhì)染色較正常對(duì)照組稍淺。對(duì)3組軟骨細(xì)胞及結(jié)構(gòu)進(jìn)行Mankin’s評(píng)分,并對(duì)模型對(duì)照組和電針治療組評(píng)分結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)免疫組化測(cè)定KS的表達(dá):進(jìn)行三組間兩兩比較。正常對(duì)照組分別與模型對(duì)照組,電針治療組比較,模型對(duì)照組與電針治療組比較,對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析法統(tǒng)計(jì)分析,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:(1)采用兔膝關(guān)節(jié)伸直位管型石膏固定造模法能夠較好的模擬人類OA的病理特點(diǎn)及發(fā)生發(fā)展過程,本實(shí)驗(yàn)造模成功。(2)關(guān)節(jié)軟骨中的KS含量表達(dá)和OA的病程存在一定的相關(guān)性,可以很好的反映關(guān)節(jié)軟骨代謝的變化,印證其作為直接標(biāo)記物。(3)電針對(duì)治療膝OA有效,其機(jī)制可能是在針刺穴位和輸入脈沖電流的綜合作用下,平衡軟骨細(xì)胞外基質(zhì)聚集蛋白聚糖的合成與分解,,從而改善軟骨代謝,促進(jìn)軟骨修復(fù),延緩病變發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】:骨關(guān)節(jié)炎 電針 軟骨細(xì)胞 關(guān)節(jié)軟骨 蛋白聚糖 硫酸角質(zhì)素
【學(xué)位授予單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R245.97
【目錄】:
- 摘要4-7
- Abstract7-11
- 前言11-14
- 材料與方法14-20
- 結(jié)果20-28
- 討論28-38
- 結(jié)論38-39
- 參考文獻(xiàn)39-45
- 英漢縮略詞對(duì)照表45-46
- 致謝46-47
- 綜述47-56
- 參考文獻(xiàn)52-56
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:電針對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨中KS表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):268638
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