【摘要】：目的： 觀察電針中脘、氣海穴對(duì)慢性疲勞大鼠的治療作用,同時(shí)研究5-羥色胺la受體(5-hydroxytryptamine,5-HTla)、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin releasing hormone, CRH)在其治療過程中的可能作用,從而尋找慢性疲勞綜合征(Chronic Fatigue Syndrome, CFS)新的治療依據(jù)。 方法： 運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR (realtime fluores-cence quantitative PCR, FQ-PCR)的檢測方法觀察空白對(duì)照組、CFS模型組及治療組海馬5-HTla受體、下丘腦CRH的mRNA表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)共60只大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為6組：①空白對(duì)照組；②模型組；③模型+電針中脘、氣海組(簡稱中脘氣海組)；④模型+電針合谷、太沖組(簡稱“四關(guān)”組)；⑤模型+5-HT1a受體阻斷+電針中脘、氣海組(簡稱受體阻斷組)；⑥模型+生理鹽水注射+電針中脘、氣海組(簡稱生理鹽水組)。按以下步驟進(jìn)行：先將上述第⑤、⑥組大鼠進(jìn)行側(cè)腦室埋管,以便于側(cè)腦室給藥。術(shù)后恢復(fù)兩周后,按Nazmun Lyle (Behavioural Brain Research202(2009)285~290)及Masaaki Tanaka (Neuro-science Letters352(2003)159~162)的造模方法并加以改良,除空白對(duì)照組外剩余各組均進(jìn)行每日一次的力竭游泳訓(xùn)練(約15-20min),時(shí)間持續(xù)3周,期間不定時(shí)給予濕潤墊料及晝夜顛倒,以制作CFS模型。模型制作的同時(shí),第⑤、⑥組分別給予每兩日一次的5-HT1a受體阻斷劑及生理鹽水側(cè)腦室注射,并與第③、④組一同接受每兩日一次的電針治療干預(yù),每次治療20分鐘。在模型制作前、模型制作過程每周及模型制作后,各組均需接受一次行為學(xué)評(píng)價(jià),以觀察模型制作情況。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后各組大鼠迅速斷頭取腦,分離出海馬、下丘腦組織稱重后放于—80℃冰箱中保存,再運(yùn)用RT-PCR的檢測方法檢測海馬中5-HTla受體、下丘腦CRH的mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.模型組：(1)行為學(xué)檢測指標(biāo)變化：a.曠場實(shí)驗(yàn)：大鼠造模后體重下降(P0.05),水平運(yùn)動(dòng)次數(shù)減少P0.05)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)無變化(P0.05)；b.高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)：開放臂進(jìn)入次數(shù)無變化(P0.05)、停留縮短(P0.05),閉合臂進(jìn)入次數(shù)增多、停留時(shí)間延長(P0.05)；c.鼠尾懸掛實(shí)驗(yàn)：掙扎次數(shù)減少、不動(dòng)時(shí)間延長(P0.05)；d.糖水消耗實(shí)驗(yàn)：蔗糖偏嗜度降低(P0.05)；(2)海馬指數(shù)及下丘腦指數(shù)無顯著變化(P0.05)；(3)5-HT1a受體及CRHmRNA的表達(dá)：海馬中5-HT1a受體mRNA相對(duì)水平較對(duì)照組明顯下降(P0.05),下丘腦中CRHmRNA相對(duì)水平較對(duì)照組顯著上升(P0.05)。 2.中脘氣海組：(1)行為學(xué)檢測指標(biāo)變化：造模后僅鼠尾懸掛實(shí)驗(yàn)及糖水消耗實(shí)驗(yàn)顯示掙扎次數(shù)減少、蔗糖偏嗜度降低(P0.05),余無顯著變化(P0.05)；(2)海馬指數(shù)及下丘腦指數(shù)無顯著變化(P0.05)；(3)5-HTla受體及CRHmRNA相對(duì)水平較對(duì)照組均無明顯變化(P0.05)。 3.“四關(guān)”組：(1)行為學(xué)檢測指標(biāo)變化：造模后僅高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)及糖水消耗實(shí)驗(yàn)顯示開放臂進(jìn)入次數(shù)增多、蔗糖偏嗜度下降(P0.05),余無顯著變化；(2)海馬指數(shù)及下丘腦指數(shù)無顯著變化(P0.05)；(3)5-HT1a受體及CRHmRNA的表達(dá)：5-HT1a受體mRNA相對(duì)水平較對(duì)照組明顯下降(P0.05),但CRHmRNA相對(duì)水平較對(duì)照組無顯著變化(P0.05)。 4.受體阻斷組：(1)行為學(xué)檢測指標(biāo)變化：a.曠場實(shí)驗(yàn)：造模后體重顯著下降(P0.05),水平運(yùn)動(dòng)次數(shù)前2周顯著減少(P0.05),至第3周顯著增加,較第2周具有顯著差異(P0.05),但較造模前無差異(P0.05),垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)較造模前無差異(P0.05)；b.高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)：開放臂及閉合臂進(jìn)入次數(shù)均較造模前增加(P0.05),開放臂停留時(shí)間較造模前2周顯著延長(P0.05),閉合臂停留時(shí)間較造模前顯著縮短(P0.05)；c.鼠尾懸掛實(shí)驗(yàn)：掙扎次數(shù)逐漸減少、不動(dòng)時(shí)間延長(P0.05)；d.糖水消耗實(shí)驗(yàn)：蔗糖偏嗜度降低(P0.05)；(2)海馬指數(shù)及下丘腦指數(shù)無顯著變化(P0.05)；(3)(3)5-HT1a受體及CRHmRNA的表達(dá)：5-HT1a受體mRNA相對(duì)水平較對(duì)照組下降(P0.05),下丘腦中CRHmRNA相對(duì)水平較對(duì)照組上升(P0.05)。 5.生理鹽水組：(1)行為學(xué)檢測指標(biāo)變化：造模后體重、水平及垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)、開放臂進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間、閉合臂進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間、掙扎次數(shù)、不動(dòng)時(shí)間較造模前均無顯著變化(P0.05),僅蔗糖偏嗜度降低(P0.05)；(2)海馬指數(shù)及下丘腦指數(shù)無顯著變化(P0.05)；(3)5-HT1a受體及CRHmRNA的表達(dá)：5-HT1a受體mRNA相對(duì)水平較對(duì)照組明顯下降(P0.05),下丘腦中CRHmRNA相對(duì)水平較對(duì)照組無顯著差異(P0.05)。 結(jié)論： 1.電針中脘、氣海及“四關(guān)”穴均能夠干預(yù)慢性疲勞大鼠的造模過程,從而表明電針以上穴位能夠?qū)β云诰C合征具有治療作用,并且這種治療作用的穴位間的特異性作用不明顯。 2.電針治療慢性疲勞綜合征可能是通過調(diào)節(jié)海馬中5-HT1a受體及下丘腦中CRH的變化來實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245.97

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2576308