本文關(guān)鍵詞：電針對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨p38表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《瀘州醫(yī)學(xué)院》 2013年

電針對(duì)兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨p38表達(dá)的影響

王江林  

【摘要】：目的：骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，，OA）又叫作退行性骨關(guān)節(jié)病，好發(fā)于中老年人，以關(guān)節(jié)軟骨進(jìn)行性退化變性、軟骨下骨質(zhì)反應(yīng)性變化及關(guān)節(jié)邊緣的骨贅形成為病理特點(diǎn)，是負(fù)重關(guān)節(jié)的常見疾病。絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPKs)是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)傳遞者，參與了多種生理過(guò)程的調(diào)節(jié)，被認(rèn)為在OA發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。軟骨中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)是MAPKs中的亞型之一，它在軟骨細(xì)胞凋亡、細(xì)胞因子產(chǎn)生、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)及缺血再灌注損傷中起重要作用，它參與膠原蛋白網(wǎng)絡(luò)斷裂，蛋白多糖降解，是反映OA病變程度的特異性指標(biāo)，在正常軟骨中少見，但在OA軟骨中則有明顯升高。針灸能疏通經(jīng)絡(luò)、調(diào)和陰陽(yáng),能促進(jìn)細(xì)胞增殖、蛋白質(zhì)合成、刺激膠原和細(xì)胞因子生成，可以促進(jìn)軟骨、韌帶和肌腱等組織損傷的修復(fù)，對(duì)OA具有鎮(zhèn)痛、消腫、改善關(guān)節(jié)活動(dòng)功能的作用。本課題通過(guò)觀察電針治療對(duì)兔膝OA的軟骨大體形態(tài)變化、軟骨細(xì)胞病理改變，以及對(duì)軟骨細(xì)胞p38表達(dá)的影響，探討電針對(duì)兔膝OA模型軟骨細(xì)胞修復(fù)的影響及作用機(jī)制。方法：（1）對(duì)象和干預(yù)措施：健康新西蘭大耳兔36只，隨機(jī)分為三組，每組12只。正常組12只兔常規(guī)飼養(yǎng)，不給予任何干預(yù)措施。模型組12只兔和電針治療組12只兔都采用通過(guò)管型石膏將左膝關(guān)節(jié)保持于伸直位制動(dòng)固定的方法建立本實(shí)驗(yàn)所需OA模型。正常組和模型組在飼養(yǎng)6周后通過(guò)耳緣靜脈注入空氣處死，切開左膝關(guān)節(jié)，取內(nèi)側(cè)髁軟骨觀察造模后相關(guān)指標(biāo)變化。治療組12只兔飼養(yǎng)6周后進(jìn)行電針治療14d，以同樣的方法處死并觀察治療后相同指標(biāo)改變情況。電針治療采取患膝關(guān)節(jié)“內(nèi)膝眼、外膝眼、陽(yáng)陵泉、血海、足三里和梁丘”6個(gè)穴位電針治療，電壓6V,疏波4HZ，密波20HZ，脈沖寬度0.5ms，輸出強(qiáng)度2mA，每天1次，每次電針30min，連續(xù)治療14d。（2）觀察指標(biāo)：①觀察三組兔軟骨標(biāo)本的大體形態(tài)變化；②將軟骨標(biāo)本制成切片，HE染色和甲苯胺藍(lán)染色，光鏡觀察相關(guān)指標(biāo)的變化，并且按Mankin’s評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分，用抗兔的p38試劑盒檢測(cè)左膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)髁軟骨p38含量的表達(dá)變化.（3）統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用SPSS13.0for WINDOWS進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所得數(shù)值結(jié)果采用x±s表示，以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P0.01有顯著性差異。結(jié)果：(1)軟骨大體觀察：正常對(duì)照組兔左膝關(guān)節(jié)無(wú)明顯的關(guān)節(jié)積液，軟骨面外觀光滑呈藍(lán)白色，顏色深且明亮，基本無(wú)裂紋，軟骨結(jié)構(gòu)Mankin’s評(píng)分為0分。模型組左膝關(guān)節(jié)基本上都出現(xiàn)關(guān)節(jié)積液，關(guān)節(jié)面粗糙，甚至部分部位出現(xiàn)糜爛，全部軟骨表面呈灰黃色，光澤度明顯降低，表面略有不平，較粗糙；電針治療組只有部分兔膝關(guān)節(jié)出現(xiàn)關(guān)節(jié)積液及滑膜增生，軟骨改變?nèi)匀灰源植跒橹�，但程度較模型組較輕；電針治療組與模型組的軟骨結(jié)構(gòu)按Mankin’s評(píng)分比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。（2）HE染色和甲苯胺藍(lán)染色觀察：正常對(duì)照組HE染色顯示軟骨表面基本平整，軟骨層的大小勻稱；細(xì)胞大小一致，潮線完整性好且甲苯胺藍(lán)染色按規(guī)律均勻分布；模型組用HE染色可見軟骨明顯變薄，軟骨表面出現(xiàn)裂隙，軟骨細(xì)胞大量簇聚且數(shù)量明顯減少，可見潮線紊亂同時(shí)甲苯胺藍(lán)染色也顯著變淡；電針治療組光鏡觀察示軟骨細(xì)胞分布比較整齊且細(xì)胞數(shù)較模型組有所增多，軟骨表面相對(duì)平整，裂隙少，軟骨層厚度較模型組厚，也有潮線紊亂，甲苯胺藍(lán)染色程度失染較輕。正常對(duì)照組與模型組、模型組與電針治療組按Mankin’s評(píng)分比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。（3）軟骨免疫組化p38測(cè)定：正常對(duì)照組僅在表層軟骨細(xì)胞內(nèi)偶見p38弱陽(yáng)性表達(dá)，為胞漿內(nèi)少量黃褐色顆粒；模型組中軟骨細(xì)胞基質(zhì)、胞漿中都有p38表達(dá)，全層可見，尤以中層密度最高，成熟軟骨細(xì)胞中最多，為深黃褐色顆粒；電針治療組中，軟骨表層可見散在的軟骨細(xì)胞胞漿中存在p38表達(dá)，為淺黃褐色顆粒。在統(tǒng)計(jì)學(xué)上正常對(duì)照組與模型組、模型組與電針治療組間比較，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:（1）本研究采取管型石膏將兔左膝關(guān)節(jié)保持于伸直位加壓制動(dòng)固定的方法制作兔膝OA模型揭示了OA的病理變化，本實(shí)驗(yàn)中造模成功。（2）p38具有加快軟骨細(xì)胞凋亡，降解關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ECM）的作用，對(duì)加重軟骨退變、破壞有著十分重要的影響。（3）電針治療膝OA有效，其作用機(jī)制可能與抑制軟骨p38的表達(dá)、減少軟骨細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)基質(zhì)合成等有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R245
【目錄】：

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