本文關(guān)鍵詞：針刺對2型糖尿病大鼠下丘腦GLUT3和GLUT4基因和蛋白的影響

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【摘要】：目的：通過觀察針刺對T2DM大鼠下丘腦GLUT3和GLUT4基因表達和蛋白含量的影響，從分子水平進一步探討GLUTs家族在2型糖尿病大鼠下丘腦胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用，同時對GLUTs家族在針刺治療2型糖尿病效應(yīng)機制中的影響進行初探，探討針刺治療T2DM有效的可能機制，為針灸臨床治療T2DM提供理論依據(jù)。 方法： 1.選擇SD雄性大鼠60只，平均體重220g左右。電腦隨機數(shù)字法產(chǎn)生10只為空白對照組，普通飼料喂養(yǎng)4周；其余50只高脂高糖飼料喂養(yǎng)4周后造模，并篩選合格糖尿病大鼠保留20只，電腦隨機數(shù)字法分為2組，分別為針灸組和模型組，每組10只。總計30只大鼠，分為針刺組、模型組和空白組，每組10只。針刺組大鼠取穴胰俞、足三里、內(nèi)庭，針刺治療時間每次15分鐘，每日1次,連續(xù)治療2周。模型組：與針刺組同樣固定，但不針刺且不作其他任何治療�？瞻捉M：與針刺組同樣固定，但不針刺且不作其他任何治療，療程與針刺組平行。在實驗干預(yù)過程中，針刺組、模型組、空白組各有一只大鼠死亡，取材時每組大鼠各9只。 2.分組干預(yù)2周后，空腹過夜，于次日上午8時，各組SD大鼠用10％水合氯醛(0.35mL／100g)腹腔注射麻醉,左心室采血5ml，靜置分離血清待測指標(biāo)。針刺組、模型組、空白對照組實時取材：斷頭處死，置冰碟上，快速分離下丘腦、股四頭肌，0.9％生理鹽水沖洗表面血液，紗布吸干，液氮中保存。氧化酶測定血糖、肌糖原含量；放免法測定外周胰島素；實時熒光PCR和Western blot測定下丘腦GLUT3和GLUT4基因和蛋白的表達情況。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，采用SPSS13.0for Windows進行數(shù)據(jù)處理，，采用方差分析、ｔ檢驗比較均數(shù)間的差異，以P＜0.05為差異有顯著性。 結(jié)果： 1.高脂高糖喂養(yǎng)4周聯(lián)合低劑量STZ誘導(dǎo)后篩選的T2DM大鼠模型，模型組和針刺組的FPG與空白組相比均顯著升高(P0.01)，提示造模成功。經(jīng)過2周針刺治療后，針刺組的FPG、FINS與模型組比較顯著降低(P0.01，P0.05)。 2.模型組大鼠股四頭肌肌糖原較空白組顯著降低(P0.01);針刺組大鼠股四頭肌較模型組有所升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義。 3.模型組大鼠下丘腦GLUT3mRNA和GLUT3蛋白表達均較空白組顯著降低(P0.01);針刺組大鼠下丘腦GLUT3mRNA和GLUT3蛋白表達均較模型組顯著升高(P0.05，P0.01)。模型組大鼠下丘腦GLUT4mRNA和GLUT4蛋白表達均較空白組顯著降低(P0.01);針刺組大鼠下丘腦GLUT4mRNA和GLUT4蛋白表達均較模型組顯著升高(P0.05，P0.01)。 結(jié)論： 1.針刺能顯著降低T2DM大鼠空腹血糖、空腹胰島素。針刺能糾正T2DM大鼠內(nèi)分泌紊亂，改善胰島素抵抗，是治療2型糖尿病的有效方法。 2.針刺能有效增加T2DM大鼠下丘腦GLUT3、GLUT4mRNA表達和GLUT3、GLUT4蛋白表達。針刺可改善中樞胰島素抵抗轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的受體后缺陷,增加下丘腦葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白的含量，增強了下丘腦葡萄糖轉(zhuǎn)運能力。 3.針刺治療T2DM有效機制可能是通過多途徑、多層次改善胰島素抵抗發(fā)揮作用的。
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R245

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本文編號：1300486