針康法對局灶性腦缺血大鼠膠質(zhì)細胞環(huán)境和細胞凋亡的影響
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【摘要】:目的 觀察針康法對局灶性腦缺血大鼠缺血區(qū)BDNF、S100β、GFAP蛋白和BDNF、Caspase-3基因的表達,探討該方法促進腦缺血大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的可能機制。 方法 建立大鼠永久性局灶性腦缺血模型,將240只大鼠按隨機數(shù)字法分為5組:假手術(shù)組、模型組、針刺組、康復(fù)組、針康組,每組各48只。每組再按3、7、14、21天分為4亞組,每組12只。假手術(shù)組、模型組不進行任何干預(yù),針刺組采用頭穴叢刺治療,康復(fù)組采用跑臺訓(xùn)練,針康組采用頭穴叢刺結(jié)合跑臺訓(xùn)練治療。各時間點采用Bederson's神經(jīng)功能評分觀察大鼠神經(jīng)功能的變化,采用免疫組化檢測各組大鼠缺血區(qū)BDNF、S100β、 GFAP蛋白的表達變化,采用實時熒光定量PCR檢測BDNFmRNA. Caspase-3mRNA的表達。 結(jié)果 1神經(jīng)功能評分:與假手術(shù)組比較,各時間點,各組神經(jīng)功能評分降低,有顯著性差異(P0.01);術(shù)后7d,14d與模型組比較,針刺組,康復(fù)組,針康組神經(jīng)功能評分降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);術(shù)后7d,14d與針刺組,康復(fù)組比較,針康組神經(jīng)功能評分降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);各時間點,與針刺組比較,康復(fù)組神經(jīng)功能評分趨勢一致,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2缺血區(qū)皮層BDNF的表達:術(shù)后3d,7d,14d,21d與假手術(shù)組比較,各組BDNF陽性細胞表達增加(p0.01);術(shù)后7d,14d,與模型組相比,針刺組、康復(fù)組、針康組BDNF陽性細胞表達增加(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組、康復(fù)組比較,針康組BDNF陽性細胞表達增加(p0.05)。 3缺血區(qū)皮層S100β的表達:術(shù)后3d,7d,14d,21d與假手術(shù)組比較,各組S100β陽性細胞表達增加(p0.01);術(shù)后7d,14d,與模型組相比,針刺組、康復(fù)組、針康組S100β陽性細胞表達增加(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組、康復(fù)組比較,針康組S100β陽性細胞表達增加(p0.05)。 4缺血區(qū)GFAP蛋白的表達:術(shù)后3d,7d,14d,21d與假手術(shù)組比較,各組GFAP陽性細胞表達增加(p0.01);術(shù)后7d,14d,與模型組相比,針刺組、康復(fù)組、針康組GFAP陽性細胞表達增加(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組、康復(fù)組比較,針康組GFAP陽性細胞表達增加(p0.05)。 5腦缺血大鼠BDNFmRNA的表達:各時間點,與假手術(shù)比較,各組BDNFmRNA的表達增加(p0.01);術(shù)后7d,14d,與模型組相比,針刺組、康復(fù)組、針康組BDNFmRNA的表達增加(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組、康復(fù)組比較,針康組BDNFmRNA的表達增加(p0.05)。 6腦缺血大鼠Caspase-3mRNA表達:各時間點,與假手術(shù)比較,模型組Caspase-3mRNA表達增加(p0.01);術(shù)后7d,14d,與模型組相比,針刺組、康復(fù)組、針康組Caspase-3mRNA表達減少(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組、康復(fù)組比較,針康組Caspase-3mRNA表達減少(p0.05);術(shù)后7d,14d,與針刺組比較,康復(fù)組Caspase-3mRNA的表達無明顯差異,(P0.05)。 結(jié)論 1.針康法能促進局灶性腦缺血后大鼠神經(jīng)功能康復(fù),且針康法優(yōu)于單純針刺和康復(fù)。 2.針康法能夠促進局灶性腦缺血大鼠皮質(zhì)缺血區(qū)周圍GFAP,S100β的表達,促進膠質(zhì)細胞活化,從而保護神經(jīng)元,進而起到腦保護作用,且針康法優(yōu)于單純針刺和康復(fù)。 3.針康法能促進局灶腦缺血后BDNFmRNA的表達增加,保護神經(jīng)元,與BDNF蛋白表達趨勢一致,并且隨時間遞增其表達增加,且針康法優(yōu)于單純針刺和康復(fù)。 4.針康法能抑制局灶腦缺血后Caspase-3mRNA的表達,減少細胞凋亡,促進神經(jīng)恢復(fù),并且隨時間遞增其表達降低,且針康法優(yōu)于單純針刺和康復(fù)。 5.針康法能夠調(diào)控腦缺血后膠質(zhì)細胞環(huán)境,抑制神經(jīng)細胞凋亡途徑,這可能是針康法促進腦缺血神經(jīng)恢復(fù)的機制之一。
【學(xué)位授予單位】:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R245
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