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電針預(yù)處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和機(jī)制

發(fā)布時間:2017-10-17 17:40

  本文關(guān)鍵詞:電針預(yù)處理對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和機(jī)制


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【摘要】:電針預(yù)處理是近年來提出的減輕靶器官缺血再灌注損傷的一種新方法,是指基于傳統(tǒng)針灸學(xué)的理論,在針上通以接近人體生物電的微量脈沖電流,在相應(yīng)穴位進(jìn)行針與電的雙重刺激,以達(dá)到防治疾病的一種療法。目前的研究業(yè)已證實(shí),在心臟、脊髓、腦等器官中,電針預(yù)處理具有誘導(dǎo)其缺血耐受的效應(yīng),但是在腎臟中,電針預(yù)處理是否具有類似的保護(hù)作用,目前尚未見相關(guān)報道。故本實(shí)驗(yàn)選取與腎臟泌尿系統(tǒng)功能關(guān)系最為密切的腎俞穴,運(yùn)用電針重復(fù)刺激后建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型,分別從腎功能、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)調(diào)控基因的角度,研究重復(fù)電針預(yù)處理對腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和相關(guān)分子機(jī)制。 目的: 研究電針預(yù)處理對腎臟缺血再灌注的保護(hù)作用以及對腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響,探討電針預(yù)處理減少腎小管上皮細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。 方法: 健康成年雄性SD大鼠50只,體重260~320g,采用隨機(jī)數(shù)字表法,將大鼠隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組(S組),腎臟缺血再灌注損傷組(I/R組)、戊巴比妥鈉+I/R組(PB+I/R組)和針刺腎俞穴預(yù)處理+I/R組(EA+I/R組)。S組僅游離雙側(cè)腎蒂45min后關(guān)腹;I/R組建立模型,無創(chuàng)血管夾鉗夾雙側(cè)腎蒂45min;PB+I/R組每天腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg,連續(xù)注射5d,最后1次處理24h后開始制備模型;EA+I/R組每天采用戊巴比妥鈉麻醉后電針刺激腎俞穴30min,連續(xù)5d,最后1次處理24h后開始制備模型。建模后1d、3d和7d時留取靜脈血標(biāo)本和腎臟組織,測定血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)濃度,進(jìn)行腎臟組織學(xué)評分(HSK評分)。并通過免疫組織化學(xué)和Western印跡等研究方法,對各組腎組織中的細(xì)胞凋亡相關(guān)分子(Bcl-2、Bax、Fas、Fasl、)及腎小管上皮細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)進(jìn)行檢測,初步探討重復(fù)電針預(yù)處理減輕腎臟缺血再灌注損傷的分子機(jī)制。 結(jié)果: 血清指標(biāo)學(xué)顯示,I/R組和PB+I/R組的各項(xiàng)指標(biāo)之間比較均無明顯差異。與PB+I/R組相比較,建模后第3d和7d, EA+I/R組的BUN、Scr明顯降低(P0.05)。建模后第7d, EA+I/R組的BUN、Scr降至S組水平,而PB+I/R組則高于S組水平(P0.05)。 通過光鏡和電鏡等形態(tài)學(xué)觀察,I/R組和PB+I/R組大鼠腎組織中可見間質(zhì)水腫,殘存的腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣消失,大量上皮細(xì)胞脫落、壞死,電鏡下可見線粒體消失、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少、染色質(zhì)變性等。EA+I/R組大鼠腎組織中間質(zhì)輕度水腫,部分腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣脫落,可見少量管型,電鏡下可見細(xì)胞器相對擴(kuò)張,核染色質(zhì)邊聚等,腎小管損傷程度在建模后第3天明顯低于前兩組。 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,建模后第3d,與I/R組和PB+I/R組比較,EA+I/R組的腎小管上皮細(xì)胞AI、Bax、Fas和FasL表達(dá)水平降低,腎小管上皮細(xì)胞PCNA和Bcl-2表達(dá)水平升高(P0.05)。 結(jié)論: 在急性腎臟缺血后,采用重復(fù)電針預(yù)處理刺激腎俞穴方式,可以降低腎臟缺血再灌注損傷大鼠的血尿素氮和血肌酐,對缺血再灌注損傷大鼠的腎功能具有保護(hù)作用。形態(tài)學(xué)觀察提示,電針預(yù)處理可以穩(wěn)定缺血再灌注損傷大鼠腎小管上皮細(xì)胞的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu),減少腎小管上皮細(xì)胞的凋亡和壞死,減輕腎小管損傷。 重復(fù)電針預(yù)處理主要通過對外源性死亡受體凋亡途徑啟動分子Fas、Fasl和內(nèi)源性線粒體凋亡途徑啟動分子Bcl-2、Bax表達(dá)的調(diào)節(jié)來發(fā)揮抑制腎小管上皮細(xì)胞凋亡的作用,與缺血再灌注損傷相比,外源性途徑仍然發(fā)揮相對較弱的促進(jìn)凋亡作用,而內(nèi)源性途徑則主要發(fā)揮抑制凋亡的作用。
【關(guān)鍵詞】:電針 腎俞穴 預(yù)處理 缺血再灌注損傷 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞增殖 腎小管上皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R245;R692
【目錄】:
  • 摘要3-6
  • ABSTRACT6-11
  • 前言11-13
  • 文獻(xiàn)回顧13-21
  • 材料與方法21-25
  • 結(jié)果25-28
  • 討論28-30
  • 小結(jié)30-31
  • 參考文獻(xiàn)31-40
  • 附錄40-43
  • 碩士期間發(fā)表論文情況43-44
  • 英文縮略詞表44-45
  • 致謝45-46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 龔華渠;楊天德;陶軍;;高滲鹽液預(yù)處理對大鼠缺血再灌注腎組織細(xì)胞間黏附分子-1表達(dá)的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年07期

2 劉宏寶;趙峰;許國雙;張鵬;陳威;王漢民;劉曉渭;于艷;陳光磊;張豐;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對缺血再灌注損傷腎小管上皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2008年03期

3 魏日胞;李平;丁瑞;師鎖柱;;葡天膠囊對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2010年04期

4 陳軍寧;王昌明;;腎缺血再灌注損傷的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)信息;2010年07期

5 黃朔;李明振;張洪波;何其勇;姜珊;金琦;;丹參對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用機(jī)制的研究[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2010年33期



本文編號:1050167

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