本文關(guān)鍵詞：電針預(yù)處理對腦缺血大鼠血腦屏障保護(hù)效應(yīng)及AQP-4、Claudin-5的影響

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【摘要】：目的觀察百會、水溝穴不同時(shí)程電針預(yù)處理(electroacupuncture preconditioning, EAP)對大腦中動脈阻塞(middle cerebral artery occulusion, MCAO)缺血大鼠腦含水量的影響,同時(shí)觀察電針預(yù)處理對腦缺血大鼠血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的影響,并從電針預(yù)處理對AQP-4與Claudin-5的影響角度,進(jìn)一步探討電針預(yù)處理對繼發(fā)腦缺血大鼠血腦屏障保護(hù)效應(yīng)的可能機(jī)制。 方法實(shí)驗(yàn)一：將32只清潔級健康雄性SD大鼠隨機(jī)分成4組(n=8)：假手術(shù)組、模型組、電針預(yù)處理7天組(EAP7天組)及電針預(yù)處理15天組(EAP15天組),各預(yù)處理組大鼠進(jìn)行相應(yīng)時(shí)程的電針預(yù)處理后,各預(yù)處理組與模型組大鼠建立右側(cè)MCAO模型,假手術(shù)組除不結(jié)扎及插線栓外,全過程同模型組,并對缺血再灌注大鼠模型進(jìn)行質(zhì)量控制,造模術(shù)前后監(jiān)測大腦中動脈血流,缺血再灌注麻醉清醒后進(jìn)行神經(jīng)功能評分。造模術(shù)后24h取材進(jìn)行腦含水量測定。另選取小批量SD大鼠16只隨機(jī)分成模型組及電針預(yù)處理15天組,實(shí)驗(yàn)處理與同名組別的大鼠相同,采用透射電鏡觀察血腦屏障的超微結(jié)構(gòu)變化。實(shí)驗(yàn)二：將64只清潔級健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=16)：假手術(shù)組、模型對照組、EAP7天組及EAP15天組,每組16只,喂養(yǎng)及處理同實(shí)驗(yàn)一,取材時(shí)各組再隨機(jī)分成2個(gè)亞組(n=8),一組用免疫組化法檢測AQP-4與Claudin5免疫陽性細(xì)胞表達(dá),另一組用熒光定量PCR法檢測AQP-4與Claudin-5mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果大鼠MCAO模型質(zhì)量控制情況良好,EAP組及模型組大鼠MCAO術(shù)后腦血流均下降為基礎(chǔ)值的45±10%,MCAO缺血再灌注大鼠麻醉清醒后,模型組、EAP7天組及EAP15天組大鼠神經(jīng)功能評分明顯高于假手術(shù)組(P0.01),EAP7天組的神經(jīng)功能評分明顯低于模型組(P0.05),EAP15天組的神經(jīng)功能評分較模型組明顯降低(P0.01),且明顯低于EAP7天組(P0.05)；模型組及EAP組大鼠大腦缺血側(cè)血腦屏障AQP-4表達(dá)較假手術(shù)組明顯上調(diào),EAP7天組與EAP15天組AQP-4表達(dá)較模型組明顯下調(diào)(P0.01),EAP15天組AQP-4表達(dá)較EAP7天組也明顯下調(diào)(P0.05)；EAP組及模型組Claudin-5表達(dá)較假手術(shù)組明顯下調(diào),與模型組比較,EAP7天組與EAP15天組Claudin-5表達(dá)明顯上調(diào)(P0.01),且EAP15天組Claudin-5表達(dá)較EAP7天組明顯上調(diào)(P0.01)。 結(jié)論1.電針預(yù)處理可減輕腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能缺損、腦水腫及血腦屏障超微結(jié)構(gòu)損害；2.電針預(yù)處理對腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障AQP-4的表達(dá)有抑制作用,而對Claudin-5的表達(dá)有促進(jìn)作用；3.電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障的保護(hù)作用可能是通過調(diào)節(jié)AQP-4及Claudin-5表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的；4.長時(shí)程積累的電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障具有更明顯的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：電針 預(yù)處理 腦缺血 血腦屏障 AQP-4 Claudin-5
【學(xué)位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R245
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 實(shí)驗(yàn)研究11-38
• 一、實(shí)驗(yàn)一 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障保護(hù)效應(yīng)的研究11-19
• (一) 實(shí)驗(yàn)材料11-12
• 1. 實(shí)驗(yàn)動物11
• 2. 實(shí)驗(yàn)試劑11
• 3. 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備11
• 4. 試劑配制及用具制作11-12
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法12-15
• 1. 動物分組12
• 2. 電針預(yù)處理方法12
• 3. 腦缺血再灌注大鼠模型的建立及質(zhì)量控制12-14
• 4. 腦含水量的測定14
• 5. 血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的觀察14
• 6. 統(tǒng)計(jì)方法14-15
• (三) 結(jié)果15-17
• 1. 腦缺血再灌注大鼠模型質(zhì)量控制結(jié)果15-16
• 2. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠腦含水量的影響16
• 3. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的影響16-17
• (四) 小結(jié)17-19
• 二、實(shí)驗(yàn)二 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障AQP-4、Claudin-5的影響19-28
• (一) 實(shí)驗(yàn)材料19-22
• 1. 實(shí)驗(yàn)動物19
• 2. 實(shí)驗(yàn)試劑19-20
• 3. 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備20-21
• 4. 試劑配制及用具制作21-22
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法22-25
• 1. 動物分組22
• 2. 電針預(yù)處理方法22
• 3. 腦缺血再灌注大鼠模型的建立及質(zhì)量控制22
• 4. 血腦屏障AQP-4與Claudin-5陽性細(xì)胞的檢測22-23
• 5. 血腦屏障AQP-4與Claudin-5 mRNA的檢測23-25
• 6. 統(tǒng)計(jì)方法25
• (三) 結(jié)果25-26
• 1. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障AQP-4、Claudin-5陽性細(xì)胞表達(dá)的影響25-26
• 2. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障AQP-4、Claudin-5 mRNA表達(dá)的影響26
• (四) 小結(jié)26-28
• 三、分析與討論28-38
• (一) 腦缺血耐受與針灸預(yù)處理28-32
• 1. 腦缺血耐受的概念28
• 2. 誘導(dǎo)腦缺血耐受的預(yù)處理方式28-30
• 3. 針灸預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受的機(jī)制研究概況30-32
• (二) 血腦屏障及AQP-4、Claudin-5在血腦屏障中的作用32-33
• 1. 血腦屏障的生理病理特點(diǎn)32
• 2. AQP-4在血腦屏障中的作用32-33
• 3. Claudin-5在血腦屏障中的作用33
• (三) 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障功能及形態(tài)保護(hù)效應(yīng)33-34
• (四) 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障AQP-4、Claudin-5的影響34-35
• 1. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障AQP-4的影響34-35
• 2. 電針預(yù)處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障Claudin-5的影響35
• (五) 血流監(jiān)測下的MCAO大鼠模型造模方法35-36
• (六) 選穴依據(jù)與電針參數(shù)依據(jù)36-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-46
• 附圖46-50
• 常用英文縮略詞50-51
• 致謝51-52
• 文獻(xiàn)綜述52-59
• 參考文獻(xiàn)56-59

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1022718