發(fā)布時間：2025-02-11 19:12

　　 目的:觀察益氣化瘀方聯(lián)合過表達Mash-1修飾的胚胎干細胞對小鼠脊髓損傷的修復作用。方法:采用鉗夾法建立小鼠急性脊髓損傷模型,于造模后第3天將Mash-1修飾的胚胎干細胞移植到脊髓損傷部位,并給予益氣化瘀方干預。通過觀察小鼠的后肢功能評分、脊髓的剩余面積以及神經(jīng)營養(yǎng)因子、炎癥因子和凋亡相關基因的表達改變;并采用免疫熒光檢測OCT3/4、nestin、β-tubulin Ⅲ、GFAP的陽性細胞數(shù)目,分析移植細胞在體內的存活和分化情況。結果:與模型組比較,益氣化瘀方可減少炎癥因子TNF-α和凋亡基因caspase-3的表達,輕微提高小鼠運動功能。與單純干細胞移植組比較,益氣化瘀方聯(lián)合Mash-1修飾胚胎干細胞移植能減少炎癥因子TNF-α的基因表達水平,提高移植細胞的存活數(shù)量,進而改善小鼠的后肢運動評分。結論:益氣化瘀方能減輕脊髓損傷的炎癥反應,增加移植細胞在脊髓損傷部位的存活數(shù)量,促進脊髓損傷的修復。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

圖5 造模后14 d和28d各組神經(jīng)營養(yǎng)因子、炎癥因子和凋亡相關基因的表達情況圖

益氣化瘀方能輕微改善小鼠脊髓損傷后的神經(jīng)功能，可能通過減少炎癥因子IL-1、TNF-α和凋亡相關基因caspase-3的表達，促進神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF、NT-3的表達，進而減輕脊髓的繼發(fā)性損傷。文獻報道，益氣化瘀方可以減輕慢性脊髓損傷和椎間盤退變引起的炎癥反應[7,12]。在之前....

圖1 術后第28天各組小鼠的后肢運動功能照片

術后第1天，假手術組的小鼠后肢的運動功能均為正常，評分值為9分；造模后各造模組的小鼠后肢出現(xiàn)明顯運動功能障礙，評分均為0。術后第7天，即細胞注射和給藥后第4天，干細胞組和聯(lián)合組的小鼠后肢運動功能有部分恢復，與模型組和中藥組比較均具有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。在造模后的第14、2....

圖2 造模后14d和28d時各組脊髓橫切面HE染色圖

從脊髓橫切面HE染色可見，在造模后的14天和28天時，模型組和中藥組小鼠的脊髓橫切面剩余面積明顯減少，與假手術組比較存在統(tǒng)計學差異（P<0.01）。干細胞組和聯(lián)合組的小鼠脊髓剩余面積均有明顯的恢復，與模型組和中藥組比較具有統(tǒng)計學差異（P<0.01）。假手術組、干細胞組和聯(lián)合組三組....

圖3 術后第14d和28d，脊髓組織免疫熒光染色圖

由于CE3胚胎干細胞帶有GFP，因此可在熒光顯微鏡下通過綠色熒光跟蹤移植細胞在體內的存活數(shù)量和所在位置，進一步通過帶紅色熒光的二抗與不同的一抗結合可觀察到移植的細胞在體內的存活和分化情況。免疫熒光染色結果顯示，干細胞組與聯(lián)合組的OCT3/4、nestin、β-tubulinII....

本文編號：4033729