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馬鹿茸多肽的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

發(fā)布時(shí)間:2024-12-26 23:20
  目的:本課題主要針對(duì)分子活性物質(zhì)——馬鹿茸多肽的制備工藝及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。具體通過對(duì)馬鹿茸酶解條件的優(yōu)化確定最佳酶解工藝、Tricine-SDS-PAGE電泳技術(shù)測(cè)定酶解后小分子肽大致分布、酶解后得到的多肽粉末中小分子肽的含量及高效液相色譜法測(cè)定酶解后小肽分子量等方面對(duì)馬鹿茸制備工藝及質(zhì)量控制方面分析研究,以期為馬鹿茸多肽的制備和生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和參考方向。材料與方法:1.本實(shí)驗(yàn)利用Alcalase AF 2.4L堿性蛋白酶酶解馬鹿茸生成多肽,采用L9(3~4)正交試驗(yàn),以甲醛滴定法測(cè)得多肽得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)考察酶解時(shí)間、溫度、加酶量以及PH等因素對(duì)酶解工藝的影響,從而選取馬鹿茸酶解最優(yōu)工藝。2.本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)不同Tricine-SDS-PAGE凝膠的濃度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白marker的分離效果比較,選擇適宜凝膠的濃度。通過比較凝膠電泳常用的染色方法,考馬斯亮藍(lán)染色、銀染色兩種染色方法的顯色結(jié)果,選擇適宜的染色方法。分別按已確定的實(shí)驗(yàn)條件,測(cè)定鹿茸水解液酶解前后各分子量多肽的分布規(guī)律。3.本實(shí)驗(yàn)對(duì)馬鹿茸酶解液采用濃縮—超濾—濃縮—冷凍干燥等步驟對(duì)馬鹿茸多肽進(jìn)行干燥得到多肽干粉...

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-4鹿茸提取液多肽分布(考染法)

圖2-4鹿茸提取液多肽分布(考染法)

-34-4鹿茸提取液多肽分布(考染法)圖2-5鹿茸酶解液多肽分布(2-5可知,鹿茸酶解前后多肽分布發(fā)生顯著變化。酶解前多肽以上,而酶解后多肽分子量多集中與5kDa以下,說明馬鹿茸蛋子量較小的小肽。酶解反應(yīng)是一個(gè)十分復(fù)雜的過程,由于酶切割鍵無法斷裂,酶解后....


圖2-5鹿茸酶解液多肽分布(銀染法)

圖2-5鹿茸酶解液多肽分布(銀染法)

-34-4鹿茸提取液多肽分布(考染法)圖2-5鹿茸酶解液多肽分布(2-5可知,鹿茸酶解前后多肽分布發(fā)生顯著變化。酶解前多肽以上,而酶解后多肽分子量多集中與5kDa以下,說明馬鹿茸蛋子量較小的小肽。酶解反應(yīng)是一個(gè)十分復(fù)雜的過程,由于酶切割鍵無法斷裂,酶解后....


圖2-6超濾離心管結(jié)構(gòu)詳解

圖2-6超濾離心管結(jié)構(gòu)詳解

剩余的為無法通過超濾膜的大于5kDa分子量的多肽蛋白,濾液收集管理為分子量小于5kDa的目的多肽蛋白分子,即為樣品溶液1。圖2-6超濾離心管結(jié)構(gòu)詳解1.2.3.2超濾膜分離裝置當(dāng)對(duì)馬鹿茸進(jìn)行大批量酶解時(shí),超濾濃縮管就無法滿足對(duì)多肽酶解液的分離提純,這是需要對(duì)所得樣品進(jìn)行大批量....


圖3-1谷胱甘肽吸收光譜曲線

圖3-1谷胱甘肽吸收光譜曲線

遼寧中醫(yī)藥大學(xué)2018屆碩士學(xué)位論文加入3g碘化鉀,等到完全溶解后,在劇烈攪拌下加入6mol·L-1NaOH,并用純凈水溶解,并定容至500mL。需保存于塑料瓶中。1.3.2.3對(duì)照品溶液的制備:取10.0mg谷胱甘肽,精密稱定,置于10mL容量瓶中,純凈水定容,搖勻即得....



本文編號(hào):4020778

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