隨著全球氣候變暖和海洋污染物增多等因素的影響,水母暴發(fā)性增長(zhǎng),導(dǎo)致沿海地區(qū)水母蟄傷發(fā)病率逐年增加。水母屬于刺胞動(dòng)物門(mén),在全世界海域分布廣泛,當(dāng)其受到外界刺激后會(huì)同時(shí)釋放大量粘液和刺絲囊毒素作為防御措施。人類(lèi)皮膚與這些物質(zhì)接觸后常見(jiàn)的癥狀為皮膚炎癥反應(yīng)如紅腫、瘙癢等,嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致全身中毒反應(yīng)甚至死亡。水母蟄傷導(dǎo)致的皮膚癥狀在臨床上稱(chēng)為水母皮炎,炎性反應(yīng)伴隨著水母皮炎的整個(gè)過(guò)程,嚴(yán)重影響人們的日常生活和身體健康。由于水母種類(lèi)繁多、捕撈后易自溶,毒素量小易失活導(dǎo)致提取困難,毒素中的毒素蛋白和多肽難以鑒定等原因造成了目前缺乏治療水母蟄傷導(dǎo)致的皮膚炎癥反應(yīng)的特效藥。本文利用組學(xué)研究手段探究不同水母中引起皮膚炎癥反應(yīng)的蛋白,以期尋找在兩種水母中起相同作用的關(guān)鍵蛋白。1、建立了海月水母粘液的收集方法。采用把水母從海水環(huán)境中去除的方法刺激分泌粘液,分別收集0-10 min、10-20 min、20-30 min、30-40 min、40-50 min、50-60 min這6個(gè)時(shí)間段分泌的粘液和水母組織液。結(jié)果顯示海月水母粘液的量在前30 min內(nèi)逐漸減少,在后30 min又逐漸升高�？紤]到自溶和海水的...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

min用15mL離心管收集一次粘液，總用時(shí)60min。在4oC集上清液并分裝儲(chǔ)存于-80°C冰箱中，以備進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)使用織勻漿的制備雙蒸水沖洗并用濾紙擦干表面后，將其置于50mL離心管中。在每個(gè)工作循環(huán)中，工作時(shí)間和休息時(shí)間分別為20s和6水母組織超....

圖1.2海月水母（A.coerulea）應(yīng)激誘導(dǎo)的粘液分泌和自溶（A）每隔10min粘液的分泌量；（B）每隔10min粘液的蛋白濃度；（C）每隔10min粘液的蛋白

所有數(shù)據(jù)均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）。通過(guò)單因素方差（one-wayANOVA）分析和多因素比較的圖基檢驗(yàn)（Tukeytest）確定兩組之間的統(tǒng)計(jì)顯著性差異。p0.05視為具有顯著意義。1.3結(jié)果1.3.1粘液的時(shí)間-蛋白濃度變化通過(guò)將水母從海水中移除來(lái)刺激其粘液的分....

圖1.3海月水母（A.coerulea）的組織液與不同時(shí)間段內(nèi)分泌的粘液的SDS-PAGEFig.1.3SDS-PAGEofcollectedmucusandtissuehomogenateofAureliacoerulea.

g/kg）；（D）粘液在60min內(nèi)的累積蛋白量（mg/kg）；（E）粘液在60min內(nèi)的累積量（m據(jù)均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（n=4），*p<0.05，**p<0.01表明與對(duì)照組相比有顯著性Fig.1.2Stress-inducedmucusse....

圖2.1粘液和組織液的蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)量控制指標(biāo)比較

3個(gè)蛋白上調(diào)、523個(gè)蛋白下調(diào)、267個(gè)蛋白不變（圖2.1A）。由定量比值直方分布圖（圖2.1B）可知粘液組：組織液組的log2(FC)值分布在在6至+6之間，峰值位于2附近。盡管粘液的蛋白質(zhì)數(shù)量遠(yuǎn)小于組織勻漿的蛋白質(zhì)數(shù)量，但兩組的氨基酸（AA）（圖2.1E）....

本文編號(hào)：3975627