目的:槲皮素(Quercetin,Que),是日常食物存在的黃酮醇類物質(zhì),已經(jīng)有大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)槲皮素能夠改善多種原因引起的內(nèi)皮功能障礙,抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng),但目前在心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中,仍然缺乏實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)槲皮素預(yù)處理與心肌細(xì)胞的NOS/NO信號(hào)通路的潛在關(guān)系。本課題擬構(gòu)建體外心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型,深入探討缺氧復(fù)氧損傷后槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞中NOS/NO信號(hào)通路的影響以及其心肌保護(hù)作用機(jī)制。進(jìn)一步探討NOS/NO信號(hào)通路中eNOS、iNOS和n NOS三者扮演的角色,闡述槲皮素可能的作用機(jī)制。方法:選取H9c2心肌細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,構(gòu)建缺氧復(fù)氧損傷(A/R)模型,模擬體內(nèi)缺血再灌注(I/R)模型。MTS比色法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率,分光光度法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(LDH)的活性,采用Western blotting(免疫印跡)檢測(cè)eNOS、iNOS和n NOS及抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá),分光光度法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性,流式細(xì)胞儀測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫及全稱和中文對(duì)照表
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 主要材料及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)操作方法
        2.3.1 H9c2心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.3.2 H9c2心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧(A/R)損傷模型的構(gòu)建
        2.3.3 分組及實(shí)驗(yàn)處理
        2.3.4 Western blotting法檢測(cè)H9c2心肌細(xì)胞中蛋白的表達(dá)
        2.3.5 觀察指標(biāo)及方法
    2.4 數(shù)據(jù)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞存活率的影響
    3.2 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后乳酸脫氫酶(LDH)活性的影響
    3.3 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后一氧化氮合酶(NOS)表達(dá)的影響
    3.4 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后一氧化氮(NO)釋放的影響
    3.5 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后MDA及SOD、GSH-Px的影響
    3.6 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后ROS水平的影響
    3.7 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后Bcl-2表達(dá)的影響
    3.8 槲皮素預(yù)處理對(duì)H9c2心肌細(xì)胞A/R損傷后細(xì)胞凋亡的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3968869