第一部分大鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定目的:大鼠BMSCs體外分離、培養(yǎng)、純化,觀察細(xì)胞形態(tài)、鑒定細(xì)胞表面標(biāo)志物及細(xì)胞多向分化能力。方法:在體外通過(guò)全骨髓貼壁法培養(yǎng)大鼠BMSCs,并進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記物及細(xì)胞周期分布,分別向成脂、成骨方向誘導(dǎo)分化。結(jié)果:大鼠BMSCs是呈放射狀排列的梭形細(xì)胞集落,可連續(xù)穩(wěn)定傳代3代以上。第3代BMSCs的表面標(biāo)志物CD29、CD44、CD90均呈陽(yáng)性表達(dá),而CD11b呈陰性表達(dá)。成脂、成骨誘導(dǎo)分化好,油紅O染色和茜素紅染色均呈陽(yáng)性。細(xì)胞周期分析顯示BMSCs符合正常細(xì)胞生長(zhǎng)特征且生長(zhǎng)活躍。結(jié)論:全骨髓貼壁法培養(yǎng)大鼠BMSCs較易分離、純化、擴(kuò)增細(xì)胞,所獲細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)研究具有重大意義。第二部分探索D-半乳糖誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的最佳作用濃度目的:探索構(gòu)建D-gal誘導(dǎo)BMSCs衰老的最佳作用濃度。方法:實(shí)驗(yàn)分組如下:正常對(duì)照組(Control組);低濃度組(L組,BMSCs+10g/L D-gal);中濃度組(M組,BMSCs+20g/L D-gal);高濃度組(H組,BMSCs+40g/L D-gal)。CCK-8法檢測(cè)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1大鼠BMSCs形態(tài)學(xué)觀察（×100）

加入1ml碘化丙碇（PI）4℃條件下避光染色30min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析細(xì)胞周期。2結(jié)果2.1BMSCs的形態(tài)學(xué)觀察原代提取的BMSCs在24h后開(kāi)始貼壁，細(xì)胞開(kāi)始伸展，呈現(xiàn)梭形、橢圓形或多角形（圖1.1A）；48h后貼壁細(xì)胞增多，有細(xì)胞集落形成；....

圖1.2大鼠BMSCs表面標(biāo)志物的表達(dá)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文注：A原代BMSCs24h首次換液；B原代BMSCs生長(zhǎng)5d的細(xì)胞形態(tài)；C原代BMSCs傳至第3代的細(xì)胞形態(tài)2.2BMSCs表面標(biāo)志物鑒定及成骨、成脂分化能力2.2.1BMSCs表面標(biāo)志物的鑒定流式細(xì)胞儀分析結(jié)果示....

圖1.3大鼠BMSCs多向分化能力的鑒定

圖1.2大鼠BMSCs表面標(biāo)志物的表達(dá)Figure1.2SurfacemarkersexpressionofratBMSCs注：ACD29,99.7%；BCD44,99.75%；CCD90,98.09%；DCD11b,2.87%2.2.2BMSCs....

圖1.4第3代大鼠BMSCs周期分布

圖1.4第3代大鼠BMSCs周期分布Figure1.4Cellcycleofthe3rdpassagera/G1期：65.59%，G2/M期：11.16%，S期：23由于其自我更新和多向分化潛能在機(jī)體損傷修骨或軟骨及肌細(xì)胞方向分化[2,3]....

本文編號(hào)：3958658