目的探討石見穿多糖通過Wnt/β-catenin信號通路調(diào)控骨肉瘤細胞的遷移和侵襲。方法不同濃度石見穿多糖(0、0.25、0.5、1 mg/mL)處理人OS MG63細胞24 h,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,Transwell小室實驗檢測細胞侵襲能力,RT-PCR檢測人OS細胞β-catenin mRNA表達,Western blot檢測人OS MG63細胞Vimentin、E-cadherin蛋白表達。結(jié)果石見穿多糖抑制細胞遷移、侵襲(P<0.01),降低β-catenin mRNA及Vimentin蛋白表達(P<0.05,P<0.01),促進E-cadherin蛋白表達(P<0.01),且上述作用呈現(xiàn)劑量依賴性。結(jié)論石見穿多糖能抑制人OS MG63細胞的遷移和侵襲能力,這種作用可能通過抑制Wnt/β-catenin信號通路,從而阻斷EMT過程而引起的。

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圖1劃痕檢測各組人OSMG63細胞遷移(×40)

石見穿多糖組劃痕比值(24h/0h)高于對照組(P<0.01),且隨著藥物濃度的增加,劃痕比值隨之增加,呈劑量依賴性,說明石見穿多糖能抑制細胞的遷移。Transwell結(jié)果顯示,石見穿多糖組細胞透過上室Matrigel膠的數(shù)量少于對照組(P<0.01),隨著石見穿多糖濃度的增....

圖2Transwell檢測各組人OSMG63細胞侵襲能力(×20)

圖1劃痕檢測各組人OSMG63細胞遷移(×40)表1石見穿多糖對人OSMG63細胞遷移、侵襲能力的影響(xˉ±s,n=3)Tab.1EffectsofSBPsonthemigrationandinvasionabilityofhumanO....

圖3RT-PCR檢測各組人OSMG63細胞β-cateninamRNA表達

石見穿多糖組β-cateninmRNA表達低于對照組(P<0.01),且隨著藥物濃度的增加,β-cateninmRNA的表達逐漸減弱。見圖3、表2。3.3石見穿多糖對人OSMG63細胞E-cadherin、Vimentin蛋白表達的影響

圖4Westernblot檢測各組人OSMG63細胞蛋白表達

石見穿多糖組細胞E-cadherin蛋白的表達高于對照組(P<0.01),且隨著藥物濃度的增加,呈劑量依賴性;石見穿多糖組細胞Vimentin蛋白表達弱于對照組(P<0.05,P<0.01),且該抑制作用隨著藥物濃度的增加而增加。見圖4、表2。表2石見穿多糖對人OSMG63....

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