目的:1、建立濾紙輔助細(xì)胞膜(Cell membrane-coated filter papers,CMFPs)垂釣的方法,應(yīng)用于篩選天然產(chǎn)物中潛在的活性成分,為新藥研發(fā)提供新方法。2、從西蘭花種子中提取蘿卜硫素(Sulforaphane,SFN),為做成SFN制劑提供前期準(zhǔn)備。方法:以兔紅細(xì)胞為原材料,用低滲溶脹法獲取紅細(xì)胞膜(Cell membranes,CMs)。以物理吸附的原理,將CMs固定于濾紙上。通過CMs溶液固定前后的差值,優(yōu)選出固定CMs量最大的濾紙。通過異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)和細(xì)胞膜紅色熒光探針(1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethy-lindocarbocyanine perchlorate,Di I)對(duì)CMs染色,在倒置熒光顯微鏡下觀察CMs,CMFPs和濾紙的熒光,確定CMs可以被固定在濾紙上。以維拉帕米,硫脲混合藥液對(duì)CMFPs垂釣法進(jìn)行選擇性評(píng)價(jià)。將CMFPs應(yīng)用于垂釣白芷藥液中的潛在活性成分,與CMs垂釣的方法進(jìn)行比較,并對(duì)活性成分進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究和分子對(duì)接評(píng)價(jià)...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、濾紙輔助細(xì)胞膜垂釣技術(shù)
    1.1 材料與儀器
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 CMs低滲溶脹破碎
        1.2.2 CMs的固定及上膜量的測(cè)定
        1.2.3 白芷提取液的準(zhǔn)備
        1.2.4 CMs的FITC染色及DiI染色
        1.2.5 CMFPs垂釣
        1.2.6 CMs垂釣
        1.2.7 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析
        1.2.8 活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 上膜量
        1.3.2 CMs熒光標(biāo)記
        1.3.3 CMFPs垂釣法的選擇性評(píng)價(jià)
        1.3.4 CMFPs垂釣白芷提取液
        1.3.5 與CMs垂釣法比較
        1.3.6 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析
        1.3.7 分子對(duì)接結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
二、蘿卜硫素提取初探
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 SFN的粗提取
        2.2.2 高效液相色譜法
        2.2.3 酶解反應(yīng)不同pH條件的考察
        2.2.4 SFN粗提取物的純化
        2.2.5 SFN純化物的鑒別
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 SFN粗提取物及標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖
        2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.3 酶解反應(yīng)不同pH條件的考察結(jié)果
        2.3.4 薄層色譜結(jié)果
        2.3.5 純化產(chǎn)物與標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖對(duì)比
        2.3.6 SFN的純化得率
        2.3.7 質(zhì)譜圖結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3860645