2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)目前已經(jīng)跨越了年齡限制,成為人類首屈一指的高發(fā)病之一,這與高甜度高脂肪的飲食習(xí)慣密不可分。機(jī)體超量攝入糖與脂肪會(huì)使胰島β細(xì)胞功能受損以及胰島素抵抗,繼而引發(fā)2型糖尿病。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)反應(yīng)啟動(dòng)胰島β細(xì)胞的凋亡程序與糖尿病的發(fā)生息息相關(guān)。本課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,�；撬峥赏ㄟ^(guò)抑制胰島β細(xì)胞系INS-1細(xì)胞高脂高糖誘導(dǎo)的ERS介導(dǎo)的IRE1-caspase12凋亡相關(guān)信號(hào)通路中的關(guān)鍵作用蛋白表達(dá)來(lái)緩解應(yīng)激,抑制胰島β細(xì)胞凋亡。本試驗(yàn)以高脂高糖處理后的胰島β細(xì)胞系INS-1細(xì)胞為研究對(duì)象,考察牛磺酸對(duì)ERS介導(dǎo)的CHOP凋亡相關(guān)信號(hào)通路與JNK凋亡相關(guān)信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白表達(dá),探討�；撬岚l(fā)揮作用的機(jī)制。選擇將INS-1細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),分為四組,分別為空白對(duì)照組(C組,1640培養(yǎng)基)、牛磺酸對(duì)照組(T組,1640+�；撬�)、高脂高糖組(H組,1640+高脂高糖)、高脂高糖牛磺酸組(HT組,1640+高脂高糖+�；撬�)、分別培養(yǎng)12 h、24 h及48 h后進(jìn)行檢...

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 ERS與糖尿病
        1.1.1 ERS與未折疊蛋白反應(yīng)
        1.1.2 ERS的信號(hào)通路與細(xì)胞凋亡
        1.1.3 ERS與糖尿病
    1.2 INS-1 細(xì)胞系的概況
    1.3 牛磺酸
        1.3.1 �；撬岣攀�
        1.3.2 �；撬崤c糖尿病
        1.3.3 牛磺酸與ERS
    1.4 本研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)試劑
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 INS-1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 棕櫚酸溶液配制
        2.2.3 熒光單標(biāo)試驗(yàn)
        2.2.4 蛋白表達(dá)量檢測(cè)
3 結(jié)果與分析
    3.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激啟動(dòng)上游因子ATF6、XBP1、IRE1 和凋亡相關(guān)因子p-eif2α熒光平均密度值
        3.1.1 ATF6 的熒光表達(dá)結(jié)果
        3.1.2 XBP1 的熒光表達(dá)結(jié)果
        3.1.3 IRE1 的熒光表達(dá)結(jié)果
        3.1.4 p-eif2α的熒光表達(dá)結(jié)果
    3.2 �；撬釋�(duì)CHOP凋亡信號(hào)通路及JNK凋亡信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響
        3.2.1 PERK與 p-PERK的蛋白表達(dá)量
        3.2.2 ATF6 的蛋白表達(dá)量
        3.2.3 XBP1 的蛋白表達(dá)量
        3.2.4 eif2α與 p-eif2α的蛋白表達(dá)量
        3.2.5 EDEM的蛋白表達(dá)量
        3.2.6 ASK1 的蛋白表達(dá)量
        3.2.7 CHOP與 p-CHOP的蛋白表達(dá)量
        3.2.8 BCL-2 的蛋白表達(dá)量
        3.2.9 JNK與 p-JNK的蛋白表達(dá)量
4 討論
    4.1 牛磺酸對(duì)ERS啟動(dòng)因子蛋白表達(dá)的影響
    4.2 �；撬釋�(duì)JNK信號(hào)通路JNK、XBP1、EDEM、BCL-2、ASK1、p-JNK的蛋白表達(dá)的影響
    4.3 �；撬釋�(duì)CHOP通路中ATF6、PERK、P-PERK、p-eif2α、eif2α、CHOP、p-CHOP的蛋白表達(dá)的影響
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文



本文編號(hào)：3845983