糖尿病是由于體內(nèi)胰島素相對分泌不足或缺乏而導(dǎo)致無法有效利用葡萄糖,使機(jī)體血糖異常偏高的一種慢性代謝異常疾病。糖尿病患病人數(shù)多、發(fā)病率高,且呈上升趨勢,是威脅人類健康的第三大慢性病。2型糖尿病的患病人數(shù)占全部糖尿病的90⁹5%,胰島素抵抗是其主要的致病原因�，F(xiàn)有降糖藥物作用方式較為單一,長期服用兼具不同程度的副作用。因此,從天然產(chǎn)物中提取和開發(fā)輔助降血糖的功能性成分是非常值得的研究方向。海藻種類繁多,具有豐富的功能活性物質(zhì),且易于獲得。綠藻滸苔(Enteromorpha prolifera)屬綠藻門綠藻綱石莼目石莼科,廣泛分布于我國沿海潮間帶,含有豐富的營養(yǎng)功能物質(zhì),作為食藥同源植物食用已有很長的歷史。本文主要研究了滸苔水提取物和醇提取物降血糖及調(diào)節(jié)腸道菌群的效果與作用機(jī)制。研究結(jié)果如下:滸苔水提取物是取水提醇沉上清液的物質(zhì)(EPW)及其中分子量小于3000 Da的組分(EPW3)為研究對象,利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC-MS)技術(shù)鑒定出EPW3的主要化學(xué)組分為eriodictyol-O-glucuronide、kaempferol、O-glucuroni...

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 糖尿病簡介
        1.1.1 糖尿病以病因?qū)W為基準(zhǔn)的分類
        1.1.2 糖尿病的發(fā)病機(jī)制
        1.1.3 對糖尿病的用藥
    1.2 滸苔概況和海藻活性物質(zhì)研究
        1.2.1 海藻水提取物的降血糖功效研究
        1.2.2 海藻醇提取物的降血糖功效研究
    1.3 腸道菌群與2型糖尿病
    1.4 立題意義
    1.5 技術(shù)路線
第二章 滸苔水提取物的降血糖活性研究
    2.1 引言
    2.2 試驗材料、試劑與儀器
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗試劑
        2.2.3 試驗儀器
    2.3 試驗方法
        2.3.1 制備滸苔水提活性物質(zhì)
        2.3.2 超濾
        2.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步篩選
        2.3.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法鑒定
        2.3.5 試驗動物及飼料和藥物配置
        2.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
        2.3.7 小鼠血糖和體重的測定
        2.3.8 小鼠口服糖耐量的測定
        2.3.9 肝臟和腎臟組織切片形態(tài)學(xué)觀察
        2.3.10 熒光定量法測定IRS1/PI3K/AKT信號通路靶基因mRNA表達(dá)
        2.3.11 蛋白免疫印跡法測定IRS1/PI3K/AKT信號通路靶蛋白表達(dá)
        2.3.12 基于16S rDNA擴(kuò)增子測序技術(shù)的小鼠腸道菌群變化分析
        2.3.13 實驗數(shù)據(jù)處理及圖形分析
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
        2.4.2 EPW3 中的植物化學(xué)成分分析
        2.4.3 小鼠狀態(tài)變化觀察
        2.4.4 EPW及 EPW3對2 型糖尿病小鼠體重和空腹血糖值的影響
        2.4.5 EPW及 EPW3對2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影響
        2.4.6 EPW及 EPW3 對糖尿病小鼠肝臟及腎臟組織病理觀察
        2.4.7 EPW及 EPW3對IRS1/PI3K/AKT信號通路表達(dá)水平的影響
        2.4.8 EPW及 EPW3 給藥對小鼠腸道菌群的影響
    2.5 討論與小結(jié)
第三章 滸苔醇提取物的降血糖活性研究
    3.1 引言
    3.2 試驗材料、試劑與儀器
        3.2.1 試驗材料
        3.2.2 試驗試劑
        3.2.3 試驗儀器
    3.3 試驗方法
        3.3.1 滸苔55%醇提物制備
        3.3.2 超濾
        3.3.3 基于α-葡萄糖苷酶抑制活性的初步篩選
        3.3.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法成分
        3.3.5 試驗動物及飼料和藥物配置
        3.3.6 糖尿病小鼠模型的建立
        3.3.7 小鼠血糖和體重的測定
        3.3.8 小鼠糖口服耐量的測定
        3.3.9 肝臟和腎臟組織切片形態(tài)學(xué)觀察
        3.3.10 熒光定量法測定靶基因PI3K/JNK1的mRNA表達(dá)
        3.3.11 蛋白免疫印跡法測定靶基因PI3K/JNK1 的蛋白表達(dá)
        3.3.12 基于16S rDNA擴(kuò)增子測序技術(shù)的小鼠腸道菌群變化分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 α-葡萄糖苷酶活性初步抑制率
        3.4.2 EPE中的植物化學(xué)成分分析
        3.4.3 EPE對2 型糖尿病小鼠體重和空腹血糖值的影響
        3.4.4 EPE對2 型糖尿病小鼠口服糖耐量的影響
        3.4.5 EPE對糖尿病小鼠肝臟及腎臟組織病理觀察
        3.4.6 EPE對胰島素信號通路靶基因mRNA和蛋白表達(dá)水平的影響
        3.4.7 EPE給藥對小鼠腸道菌群的影響
        3.4.8 生化指標(biāo)、基因表達(dá)水平與腸道微生物的相關(guān)性分析
        3.4.9 滸苔醇提取物和水提取物降血糖和調(diào)節(jié)腸道菌群的功效比較
    3.5 討論與小結(jié)
第四章 滸苔寡糖的降血糖活性初步研究
    4.1 引言
    4.2 試驗材料、儀器與試劑
        4.2.1 試驗材料
        4.2.2 試驗試劑
        4.2.3 試驗儀器
    4.3 試驗方法
        4.3.1 滸苔多糖制備
        4.3.2 寡糖酸解法制備及分離純化
        4.3.3 紅外光譜測定
        4.3.4 電噴霧質(zhì)譜測定寡糖分子質(zhì)量
        4.3.5 氣相色譜測定單糖組成
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 寡糖制備與分離純化
        4.4.2 滸苔寡糖的紅外光譜
        4.4.3 滸苔寡糖的單糖組成分析
        4.4.4 質(zhì)譜分析
        4.4.5 α-葡萄糖苷酶體外活性抑制效果
    4.5 討論與小結(jié)
總結(jié)與展望
    1 本文總結(jié)
    2 展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝



本文編號：3837601