朊病毒病(Prion disease),又稱可傳播性海綿狀腦病(Transmissible spongiform encephalopathies,TSE),是一類侵襲人和多種動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的退行性疾病,其潛伏期長,致死率100%。神經(jīng)生長因子(neurogrowth factor,NGF)對神經(jīng)的生長、分化、發(fā)育以及神經(jīng)元存活具有重要作用。臨床研究表明,NGF對阿爾茲海默癥和帕金森綜合征等神經(jīng)退行性疾病有一定治療效果,但在朊病毒病中研究甚少。近期研究顯示,白藜蘆醇具有清除朊病毒復(fù)制的能力,對朊病毒病有一定的治療潛力。為了明確朊病毒感染前后和白藜蘆醇清除朊病毒后神經(jīng)生長因子(NGF)及其上游級聯(lián)反應(yīng)調(diào)控因子的潛在變化。我們通過Western blot、免疫組織熒光、細胞免疫熒光實驗,檢測了小鼠中胚層腦(SMB)細胞系及細胞裂解液顱內(nèi)接種的小鼠中NGF及其上游調(diào)控因子表達水平的變化情況。體外和體內(nèi)實驗結(jié)果顯示,朊病毒感染后NGF表達水平顯著降低,經(jīng)白藜蘆醇處理去除朊病毒后NGF含量得到一定程度的恢復(fù)。并且形態(tài)學(xué)分析結(jié)果顯示顱內(nèi)NGF信號主要與神經(jīng)元共定位,與增殖的星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 朊病毒病
        1.1.1 朊病毒病
        1.1.2 朊病毒病的感染途徑及致病過程
        1.1.3 朊病毒病的診斷
    1.2 朊病毒
        1.2.1 朊病毒的發(fā)展
        1.2.2 正常朊蛋白(PrPC)
        1.2.3 異常朊蛋白(PrPSc)
        1.2.4 PrPC向 PrPSc轉(zhuǎn)變的分子機制
    1.3 NGF及其上游激酶研究進展
        1.3.1 NGF的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 NGF與中樞神經(jīng)系統(tǒng)
        1.3.3 NGF與阿爾茲海默癥
        1.3.4 NGF作為AD和 PD的治療策略
        1.3.5 NGF上游相關(guān)激酶研究進展
    1.4 白藜蘆醇
        1.4.1 白藜蘆醇簡介
        1.4.2 白藜蘆醇與阿爾茲海默癥
        1.4.3 白藜蘆醇與帕金森綜合征
        1.4.4 白藜蘆醇與朊病毒病
2 材料與方法
    2.1 實驗儀器和材料
        2.1.1 朊病毒毒株、細胞和動物模型
        2.1.2 主要儀器及設(shè)備
        2.1.3 細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑耗材
        2.1.4 免疫印跡相關(guān)試劑耗材
        2.1.5 免疫細胞熒光及免疫組織熒光相關(guān)試劑耗材
        2.1.6 常用培養(yǎng)基與試劑旳配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 腦組織勻漿的制備
        2.2.3 細胞裂解液的制備
        2.2.4 免疫印跡(Western blot)
        2.2.5 免疫熒光(IFA)及蘇木素-伊紅染色法(HE染色)
        2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 在體外和體內(nèi)用白藜蘆醇清除PrPSc可恢復(fù)NGF的表達水平
    3.2 小鼠腦組織中NGF主要在神經(jīng)元表達,與增殖的星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞無共定位
    3.3 朊病毒感染導(dǎo)致CREB活性降低并可通過白藜蘆醇清除朊病毒后部分逆轉(zhuǎn)
    3.4 朊病毒感染過程中NGF相關(guān)上游激酶CaMKIV和 CaMKK2 水平下降在白藜蘆醇清除朊病毒后部分恢復(fù)
    3.5 白藜蘆醇清除朊病毒后能夠恢復(fù)朊病毒感染對CaMKK2 活性的抑制
4 討論
5 全文結(jié)論
附錄
參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3836413