【目的】本研究選擇肝癌H22惡性腹水模型為研究對(duì)象,觀察三物白散對(duì)小鼠惡性腹水中H22細(xì)胞的生存率、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、Bcl-2蛋白表達(dá)情況的影響,從而觀察三物白散干預(yù)小鼠肝癌H22細(xì)胞惡性腹水的效果,并初步探討其作用機(jī)制。【方法】1.H22腹水瘤小鼠模型的建立:于小鼠的右下腹部腹腔注射0.1mL肝癌H22腹水瘤細(xì)胞懸液(含H22腹水瘤細(xì)胞1×10⁶個(gè)),觀察小鼠的一般情況、體重增長(zhǎng)情況、腹部增大情況,當(dāng)腹部明顯變大時(shí),實(shí)驗(yàn)者用手指輕輕晃動(dòng)小鼠腹部,能夠感覺(jué)的細(xì)微波動(dòng)感即為造模成功。2.三物白散干預(yù)惡性腹水研究:將造模成功的60只KM小鼠在造模48h后,隨機(jī)分為5個(gè)組分別為模型組、陽(yáng)性組、三物白散高劑量組、三物白散中劑量組、三物白散低劑量組,每組12只。分組后開(kāi)始藥物干預(yù),連續(xù)用藥干預(yù)7天,末次給藥之后稱取體重,用隨機(jī)麻醉處死每組小鼠半數(shù)(每組6只),無(wú)菌條件下開(kāi)腹取腹水,測(cè)量腹水量及用臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)方法測(cè)量H22肝癌細(xì)胞數(shù)量。繪制小鼠體重變化曲線、腹水形成箱狀圖,計(jì)算H22肝癌細(xì)胞生存率。每組余下的6只小鼠繼續(xù)飼養(yǎng)直至死亡,記錄生存期并繪制生存期箱狀圖。3.三物白...

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
縮略詞表
引言
實(shí)驗(yàn)一 H22腹水瘤小鼠模型的建立
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 實(shí)驗(yàn)藥品及主要試劑
        1.4 主要試劑配置方法
        1.5 實(shí)驗(yàn)主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 分組方法
        2.3 造模方法
        2.4 觀察指標(biāo)與方法
    3.統(tǒng)計(jì)方法
    4.結(jié)果
        4.1 一般情況觀察
        4.2 小鼠的腹水生成情況
        4.3 小鼠體重變化曲線
    5.小結(jié)
實(shí)驗(yàn)二 三物白散干預(yù)惡性腹水研究
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 實(shí)驗(yàn)藥品及主要試劑
        1.4 主要試劑配置方法
        1.5 藥液制備與劑量計(jì)算
        1.6 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.7 主要耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 造模方法
        2.2 分組方法與給藥方法
        2.3 觀察指標(biāo)與方法
    3.統(tǒng)計(jì)方法
    4.結(jié)果
        4.1 一般情況觀察
        4.2 惡性腹水形成情況觀察
        4.3 小鼠體重變化情況
        4.4 小鼠生存期觀察
        4.5 臺(tái)盼藍(lán)拒染法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞生存率
實(shí)驗(yàn)三 三物白散干預(yù)惡性腹水與細(xì)胞凋亡、周期及BCL-2蛋白表達(dá)的關(guān)系
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 實(shí)驗(yàn)藥品及主要試劑
        1.4 主要抗體
        1.5 主要試劑的配置方法
        1.6 藥液制備與劑量計(jì)算
        1.7 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.8 主要耗材
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 造模方法
        2.2 分組方法與給藥方法
        2.3 FCM檢測(cè)細(xì)胞周期
        2.4 FCM檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.5 Western Blot檢測(cè)H22細(xì)胞中Bcl-2蛋白表達(dá)
    3.統(tǒng)計(jì)方法
    4.結(jié)果
        4.1 FCM檢測(cè)腹水腫瘤細(xì)胞周期
        4.2 FCM檢測(cè)腹水腫瘤細(xì)胞凋亡
        4.3 WB檢測(cè)腹水瘤細(xì)胞bcl-2蛋白
討論
    1.關(guān)于惡性腹水模型
    2.關(guān)于陽(yáng)性干預(yù)藥物的選擇
    3.三物白散干預(yù)惡性腹水的學(xué)理
        3.1 惡性腹水的中醫(yī)認(rèn)識(shí)
        3.2 三物白散的功效
        3.3 三物白散干預(yù)惡性腹水的學(xué)理
    4.三物白散干預(yù)惡性腹水的有效性
        4.1 三物白散灌胃H22小鼠可以抑制其惡性腹水的產(chǎn)生并且可以改善其生存質(zhì)量
        4.2 三物白散灌胃荷H22小鼠可以延長(zhǎng)其生存期
        4.3 三物白散可以降低小鼠腹水中H22細(xì)胞的生存率
    5.三物白散抑制H22荷瘤小鼠惡性腹水生成的機(jī)制
        5.1 三物白散對(duì)肝癌H22細(xì)胞周期的影響
        5.2 三物白散誘導(dǎo)肝癌H22細(xì)胞凋亡
        5.3 三物白散調(diào)控H22細(xì)胞中Bcl-2的表達(dá)
結(jié)論
創(chuàng)新性與特色
問(wèn)題與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附件一：綜述
    參考文獻(xiàn)
附件二：在校期間公開(kāi)發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果



本文編號(hào)：3789036