【目的】本研究選擇肝癌H22惡性腹水模型為研究對象,觀察三物白散對小鼠惡性腹水中H22細胞的生存率、細胞凋亡、細胞周期、Bcl-2蛋白表達情況的影響,從而觀察三物白散干預小鼠肝癌H22細胞惡性腹水的效果,并初步探討其作用機制�！痉椒ā�1.H22腹水瘤小鼠模型的建立:于小鼠的右下腹部腹腔注射0.1mL肝癌H22腹水瘤細胞懸液(含H22腹水瘤細胞1×10⁶個),觀察小鼠的一般情況、體重增長情況、腹部增大情況,當腹部明顯變大時,實驗者用手指輕輕晃動小鼠腹部,能夠感覺的細微波動感即為造模成功。2.三物白散干預惡性腹水研究:將造模成功的60只KM小鼠在造模48h后,隨機分為5個組分別為模型組、陽性組、三物白散高劑量組、三物白散中劑量組、三物白散低劑量組,每組12只。分組后開始藥物干預,連續(xù)用藥干預7天,末次給藥之后稱取體重,用隨機麻醉處死每組小鼠半數(shù)(每組6只),無菌條件下開腹取腹水,測量腹水量及用臺盼藍計數(shù)方法測量H22肝癌細胞數(shù)量。繪制小鼠體重變化曲線、腹水形成箱狀圖,計算H22肝癌細胞生存率。每組余下的6只小鼠繼續(xù)飼養(yǎng)直至死亡,記錄生存期并繪制生存期箱狀圖。3.三物白...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
縮略詞表
引言
實驗一 H22腹水瘤小鼠模型的建立
    1.實驗材料
        1.1 細胞
        1.2 實驗動物
        1.3 實驗藥品及主要試劑
        1.4 主要試劑配置方法
        1.5 實驗主要儀器
    2.實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 分組方法
        2.3 造模方法
        2.4 觀察指標與方法
    3.統(tǒng)計方法
    4.結(jié)果
        4.1 一般情況觀察
        4.2 小鼠的腹水生成情況
        4.3 小鼠體重變化曲線
    5.小結(jié)
實驗二 三物白散干預惡性腹水研究
    1.實驗材料
        1.1 細胞
        1.2 實驗動物
        1.3 實驗藥品及主要試劑
        1.4 主要試劑配置方法
        1.5 藥液制備與劑量計算
        1.6 主要實驗儀器
        1.7 主要耗材
    2.實驗方法
        2.1 造模方法
        2.2 分組方法與給藥方法
        2.3 觀察指標與方法
    3.統(tǒng)計方法
    4.結(jié)果
        4.1 一般情況觀察
        4.2 惡性腹水形成情況觀察
        4.3 小鼠體重變化情況
        4.4 小鼠生存期觀察
        4.5 臺盼藍拒染法檢測腫瘤細胞生存率
實驗三 三物白散干預惡性腹水與細胞凋亡、周期及BCL-2蛋白表達的關(guān)系
    1.實驗材料
        1.1 細胞
        1.2 實驗動物
        1.3 實驗藥品及主要試劑
        1.4 主要抗體
        1.5 主要試劑的配置方法
        1.6 藥液制備與劑量計算
        1.7 主要實驗儀器
        1.8 主要耗材
    2.實驗方法
        2.1 造模方法
        2.2 分組方法與給藥方法
        2.3 FCM檢測細胞周期
        2.4 FCM檢測細胞凋亡
        2.5 Western Blot檢測H22細胞中Bcl-2蛋白表達
    3.統(tǒng)計方法
    4.結(jié)果
        4.1 FCM檢測腹水腫瘤細胞周期
        4.2 FCM檢測腹水腫瘤細胞凋亡
        4.3 WB檢測腹水瘤細胞bcl-2蛋白
討論
    1.關(guān)于惡性腹水模型
    2.關(guān)于陽性干預藥物的選擇
    3.三物白散干預惡性腹水的學理
        3.1 惡性腹水的中醫(yī)認識
        3.2 三物白散的功效
        3.3 三物白散干預惡性腹水的學理
    4.三物白散干預惡性腹水的有效性
        4.1 三物白散灌胃H22小鼠可以抑制其惡性腹水的產(chǎn)生并且可以改善其生存質(zhì)量
        4.2 三物白散灌胃荷H22小鼠可以延長其生存期
        4.3 三物白散可以降低小鼠腹水中H22細胞的生存率
    5.三物白散抑制H22荷瘤小鼠惡性腹水生成的機制
        5.1 三物白散對肝癌H22細胞周期的影響
        5.2 三物白散誘導肝癌H22細胞凋亡
        5.3 三物白散調(diào)控H22細胞中Bcl-2的表達
結(jié)論
創(chuàng)新性與特色
問題與展望
致謝
參考文獻
附件一：綜述
    參考文獻
附件二：在校期間公開發(fā)表的學術(shù)論文、專著及科研成果



本文編號：3789036