沙門氏菌分布廣泛,大多數(shù)可在人和動物體內(nèi)寄生,引發(fā)人畜患有傷寒、腹瀉、胃腸炎和敗血癥等疾病。作為無論是養(yǎng)殖業(yè)還是醫(yī)藥臨床使用最廣泛的—β-內(nèi)酰胺抗菌藥物,其原本治療效果非常好,但由于人類長期大量不合理應(yīng)用該類抗菌藥物,導(dǎo)致由其引發(fā)的耐藥性問題日益嚴(yán)峻,因此如何降低或消除細(xì)菌耐藥性成為人類面臨的嚴(yán)峻考驗。本研究選取從貴州省貴陽市、六盤水市、畢節(jié)市等8個地區(qū)的規(guī)�；B(yǎng)殖場中分離鑒定得到的110株豬源沙門氏菌,采用微量肉湯稀釋法,參照參照CLSI(美國臨床試驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會)標(biāo)準(zhǔn)測定其對常用的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物敏感性,并通過PCR擴(kuò)增方法檢測主要耐藥基因攜帶情況�？疾炝瞬糠种兴帉δ退幧抽T氏菌的抑制作用和質(zhì)粒消除效果,并應(yīng)用聯(lián)合抑菌試驗方法考察了中藥與抗菌藥物聯(lián)合后對耐藥沙門氏菌的抑制效果。結(jié)果表明,試驗菌株對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥性十分嚴(yán)重,其中對頭孢他啶的耐藥率為100%,其次是氨芐西林和阿莫西林分別是79.09%和75.54%,耐藥率最低的是頭孢噻呋為40.91%,頭孢氨芐耐藥率為44.55%。110株分離鑒定的沙門氏菌TEM基因檢出率為85%,OXA為75%,CTX-M為46%,含兩種...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    1 沙門氏菌的危害及耐藥性研究
        1.1 沙門氏菌概述
        1.2 沙門氏菌的危害
        1.3 沙門氏菌耐藥現(xiàn)狀
    2 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物相關(guān)研究
        2.1 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物簡介
        2.2 β-內(nèi)酰胺類藥物抗菌機(jī)制
        2.3 沙門氏菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥機(jī)理
    3 中藥對細(xì)菌耐藥質(zhì)粒消除研究
        3.1 耐藥質(zhì)粒研究概況
        3.2 中藥消除耐藥質(zhì)粒研究現(xiàn)狀
        3.3 中藥消除耐藥質(zhì)粒機(jī)制
        3.4 中藥消除耐藥質(zhì)粒特點
    4 聯(lián)合抑菌作用相關(guān)研究
    5 本研究的目的與意義
第一章 沙門氏菌對β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性測定
    1 試驗材料
        1.1 主要試驗藥品與試劑
        1.2 培養(yǎng)基
        1.3 試驗儀器
        1.4 菌株
    2 試驗方法
        2.1 沙門氏菌活化與純化
        2.2 沙門氏菌鑒定
            2.2.1 分子生物學(xué)鑒定
            2.2.2 革蘭氏染色
            2.2.3 生化試驗
        2.3 沙門氏菌藥物敏感性試驗
            2.3.1 抗菌藥物儲備液制備
            2.3.2 抗菌藥物工作液制備
            2.3.3 藥敏試驗使用抗菌藥物濃度范圍要求
            2.3.4 菌液的制備
            2.3.5 MIC值測定
            2.3.6 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)
    3 試驗結(jié)果
        3.1 沙門氏菌鑒定結(jié)果
            3.1.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
            3.1.2 分子生物學(xué)鑒定結(jié)果
        3.2 藥物敏感性試驗結(jié)果
        3.3 半數(shù)抑菌濃度(MIC50)和有效抑菌濃度(MIC90)
        3.4 多重耐藥統(tǒng)計結(jié)果
    4 討論
第二章 沙門氏菌β-內(nèi)酰胺類耐藥基因的檢測
    1 試驗材料
        1.1 試驗菌株
        1.2 試驗藥品與試劑
        1.3 主要試驗儀器與設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 引物設(shè)計與合成
        2.2 菌株的活化
        2.3 沙門氏菌DNA提取
        2.4 PCR反應(yīng)條件建立
        2.5 耐藥基因的凝膠電泳檢測
        2.6 產(chǎn)物的回收、克隆及測序
    3 結(jié)果
    4 討論
第三章 中藥對沙門氏菌β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性影響的研究
    1 試驗材料
        1.1 供試菌株
        1.2 試驗藥品
        1.3 試驗試劑
        1.4 試驗儀器
    2 試驗方法
        2.1 各種培養(yǎng)基的制備
        2.2 菌液的制備
        2.3 中藥有效成分的提取
        2.4 最小抑菌濃度的測定
            2.4.1 中藥培養(yǎng)液的制備
            2.4.2 細(xì)菌的接種和培養(yǎng)
            2.4.3 結(jié)果判定
        2.5 細(xì)菌耐藥性的消除
            2.5.1 中藥作用耐藥細(xì)菌
            2.5.2 含藥物平板的制備
            2.5.3 細(xì)菌的影印培養(yǎng)
            2.5.4 耐藥性消除菌落的篩選
        2.6 消除子耐藥性檢測
        2.7 耐藥性消除前后菌株質(zhì)粒的提取
        2.8 傳代觀察不同菌株耐藥消除后MIC
    3 結(jié)果與分析
        3.1 中藥提取物對沙門氏菌最小抑菌濃度的測定
        3.2 影印培養(yǎng)后耐藥性消除試驗結(jié)果
        3.3 耐藥性消除前后菌株質(zhì)粒圖譜變化情況
        3.4 五種中藥作用后耐藥性消除子表型
        3.5 耐藥性消除子傳代后耐藥水平的變化
    4 討論
        4.1 中藥的抑菌作用效果
        4.2 不同中藥對細(xì)菌耐藥質(zhì)粒消除
        4.3 細(xì)菌耐藥性消除前后質(zhì)粒圖普和耐藥表型變化
        4.4 耐藥性消除子MIC測定結(jié)果分析
第四章 聯(lián)合抑菌作用研究
    1 試驗材料
        1.1 試驗藥品與試劑
        1.2 試驗儀器
        1.3 試驗樣本
    2 試驗方法
        2.1 培養(yǎng)基的制備
        2.2 菌液的制備
        2.3 中藥有效成分的提取
        2.4 最小抑菌濃度的測定
            2.4.1 中藥提取物最小抑菌濃度(MIC)的測定
            2.4.2 頭孢他啶最小抑菌濃度(MIC)的測定
            2.4.3 中西藥物聯(lián)合對耐藥菌作用的測定
            2.4.4 聯(lián)合藥敏試驗結(jié)果判定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 中藥提取物和抗菌藥物單用MIC測定結(jié)果
        3.2 中藥提取物與抗菌藥聯(lián)合作用抑菌結(jié)果
    4 討論
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
附錄



本文編號：3780287