目的觀察清達顆粒(QDG)對脂多糖(LPS)誘導活化的小膠質細胞抗氧化作用,探討其與p38MAPK/Nrf2/HO-1抗氧化信號通路的可能聯(lián)系。方法體外培育BV-2小膠質細胞,采用MTT法篩選合適的藥物濃度,之后采用LPS(1μg/mL)誘導炎癥模型,將其分為對照組、LPS組、LPS+QDG組,并LPS+QDG組設置31.25μg/mL、62.50μg/mL、125.00μg/mL 3個質量濃度亞組,檢測各組細胞活性氧(ROS)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的表達情況,Western Blot法檢測磷酸化p38MAPK(p-p38)、p38MAPK(p38)、轉錄因子Nrf2、細胞核內(nèi)Nrf2、血紅素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表達情況以及p38抑制劑干預LPS誘導的炎癥細胞HO-1蛋白的表達情況。結果 LPS+QDG組ROS、TNF-α、MDA的釋放抑制受到一定程度上促進GSH-Px的釋放,并升高p-p38、細胞核內(nèi)Nrf2以及HO-1蛋白的表達。p38抑制劑干預后下調(diào)了LPS+QDG組HO-1蛋白的表達。結論清達顆粒可有效減...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 藥物與細胞株
    1.2 實驗試劑
    1.3 實驗儀器
    1.4 清達顆粒母液的制備
    1.5 BV-2細胞培養(yǎng)與傳代
        1.5.1 MTT法檢測不同濃度LPS對BV-2細胞的細胞活力影響
        1.5.2 MTT法檢測不同濃度清達顆粒對BV-2細胞的細胞活力影響
        1.5.3 MTT法檢測清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞的細胞活力影響
        1.5.4 ROS含量檢測
        1.5.5 ELISA檢測細胞上清液中TNF-α濃度
        1.5.6 MDA含量測定
        1.5.7 GSH-Px含量測定
        1.5.8 Western Blot法檢測Nrf2、細胞核內(nèi)Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表達及p38抑制劑(LY2228820)干預LPS誘導的BV-2細胞后HO-1蛋白的表達情況
    1.6 統(tǒng)計學處理
2 結 果
    2.1 不同濃度LPS對BV-2細胞的細胞活力影響
    2.2 不同濃度清達顆粒對BV-2細胞的細胞活力影響
    2.3 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞的細胞活力影響
    2.4 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞中ROS含量影響
    2.5 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞上清液中TNF-α濃度影響
    2.6 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞上清液中MDA含量的影響
    2.7 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞中GSH-Px含量的影響
    2.8 清達顆粒對LPS干預的BV-2細胞的Nrf2、細胞核內(nèi)Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表達的影響以及p38抑制劑作用下清達顆粒干預LPS誘導的BV-2細胞HO-1蛋白表達的影響
3 討 論



本文編號：3765020