目的觀察清達(dá)顆粒(QDG)對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞抗氧化作用,探討其與p38MAPK/Nrf2/HO-1抗氧化信號(hào)通路的可能聯(lián)系。方法體外培育BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞,采用MTT法篩選合適的藥物濃度,之后采用LPS(1μg/mL)誘導(dǎo)炎癥模型,將其分為對(duì)照組、LPS組、LPS+QDG組,并LPS+QDG組設(shè)置31.25μg/mL、62.50μg/mL、125.00μg/mL 3個(gè)質(zhì)量濃度亞組,檢測(cè)各組細(xì)胞活性氧(ROS)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的表達(dá)情況,Western Blot法檢測(cè)磷酸化p38MAPK(p-p38)、p38MAPK(p38)、轉(zhuǎn)錄因子Nrf2、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2、血紅素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表達(dá)情況以及p38抑制劑干預(yù)LPS誘導(dǎo)的炎癥細(xì)胞HO-1蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 LPS+QDG組ROS、TNF-α、MDA的釋放抑制受到一定程度上促進(jìn)GSH-Px的釋放,并升高p-p38、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2以及HO-1蛋白的表達(dá)。p38抑制劑干預(yù)后下調(diào)了LPS+QDG組HO-1蛋白的表達(dá)。結(jié)論清達(dá)顆�？捎行p...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 藥物與細(xì)胞株
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.4 清達(dá)顆粒母液的制備
    1.5 BV-2細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
        1.5.1 MTT法檢測(cè)不同濃度LPS對(duì)BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
        1.5.2 MTT法檢測(cè)不同濃度清達(dá)顆粒對(duì)BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
        1.5.3 MTT法檢測(cè)清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
        1.5.4 ROS含量檢測(cè)
        1.5.5 ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液中TNF-α濃度
        1.5.6 MDA含量測(cè)定
        1.5.7 GSH-Px含量測(cè)定
        1.5.8 Western Blot法檢測(cè)Nrf2、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表達(dá)及p38抑制劑(LY2228820)干預(yù)LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞后HO-1蛋白的表達(dá)情況
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 不同濃度LPS對(duì)BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
    2.2 不同濃度清達(dá)顆粒對(duì)BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
    2.3 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞的細(xì)胞活力影響
    2.4 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞中ROS含量影響
    2.5 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞上清液中TNF-α濃度影響
    2.6 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞上清液中MDA含量的影響
    2.7 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞中GSH-Px含量的影響
    2.8 清達(dá)顆粒對(duì)LPS干預(yù)的BV-2細(xì)胞的Nrf2、細(xì)胞核內(nèi)Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表達(dá)的影響以及p38抑制劑作用下清達(dá)顆粒干預(yù)LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞HO-1蛋白表達(dá)的影響
3 討 論



本文編號(hào)：3765020