肥胖癥是多種因素引起的慢性代謝性疾病,主要表現(xiàn)為體內脂肪組織異�；蜻^量積累,是糖尿病、心血管疾病、腫瘤等若干慢性疾病的主要風險因素。目前治療肥胖的主要方法是藥物療法,療效顯著,但是副作用大,且易產生耐藥性,臨床上對治療肥胖藥物的應用仍有待探討。天然產物的藥物由于其對疾病的預防和治療效果顯著,副作用小,被廣泛應用于疾病治療的研究。表沒食子兒茶素沒食子酸酯（簡稱EGCG）,是從茶葉中分離得到的兒茶素類單體,在綠茶中含量最高且具有較高的生物活性。國內外許多研究表明EGCG具有降脂減肥作用,但是EGCG減肥作用的分子機理尚不明確,也有一些研究顯示EGCG的作用效果不明顯。本文通過體內、體外實驗探討了EGCG對成熟脂肪細胞的降脂作用以及對脂代謝相關基因表達的影響,為進一步了解EGCG降脂減肥作用以及為改善EGCG降脂作用的分子機制提供理論參考。本研究通過體外誘導分化培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細胞,EGCG處理后成熟脂肪細胞脂滴明顯減小,且表現(xiàn)為時間和濃度依賴性;EGCG并未影響細胞活性,與對照組相比,EGCG處理組與脂代謝相關因子的m RNA表達水平顯著降低;同時檢測到EGCG處理后AMPK的表達顯... 

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    第一節(jié) 肥胖
        1.1 肥胖的簡介
        1.2 肥胖的治療
    第二節(jié) 茶多酚
        2.1 茶多酚的簡介
        2.2 茶多酚藥理作用
    第三節(jié) 兒茶素
        3.1 兒茶素的簡介
        3.2 EGCG的概述
        3.3 EGCG的藥理作用
        3.4 EGCG降脂作用的研究進展
    第四節(jié) 研究的目的和意義
第二章 研究內容
    第一節(jié) 實驗材料與儀器
        1.1 誘導分化 3T3-L1前脂肪細胞
            1.1.1 實驗材料
            1.1.2 實驗儀器
            1.1.3 配制誘導培養(yǎng)基
        1.2 EGCG對 3T3-L1前脂肪細胞的影響
            1.2.1 實驗材料
            1.2.2 實驗儀器
            1.2.3 試劑配制
        1.3 建立高脂肥胖模型
            1.3.1 實驗材料
            1.3.2 實驗設置
    第二節(jié) 實驗方法
        2.1 體外實驗
            2.1.1 3T3-L1前脂肪細胞的分化
            2.1.2 3T3-L1脂肪細胞的鑒定（油紅O染色鑒定）
        2.2 EGCG處理 3T3-L1脂肪細胞
        2.3 MTT實驗
        2.4 Western blot
            2.4.1 3T3-L1細胞蛋白提取
            2.4.2 SDS－PAGE電泳
            2.4.3 抗體孵育
        2.5 RT-PCR
            2.5.1 RNA提取
            2.5.2 RNA的評價與鑒定
            2.5.3 實時熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）
        2.6 口服葡萄糖耐量實驗
        2.7 胰島素耐量實驗
        2.8 動物組織中脂類的檢測
            2.8.1 總膽固醇（TG）檢測
            2.8.2 甘油三酯（TG）檢測
            2.8.3 游離脂肪酸檢測
        2.9 統(tǒng)計學分析
    第三節(jié) 結果分析
        3.1 EGCG降低成熟 3T3-L1脂肪細胞脂滴大小并改變脂肪代謝
            3.1.1 EGCG處理成熟 3T3-L1細胞未影響細胞活性
            3.1.2 EGCG降低成熟 3T3-L1脂肪細胞脂滴大小
            3.1.3 EGCG抑制成熟3T3-L1細胞脂代謝相關因子mRNA水平的表達
            3.1.4 EGCG通過抑制PPARγ的表達降低成熟3T3-L1脂肪細胞脂滴大小
            3.1.5 EGCG對AMPK信號通路的影響
        3.2 EGCG對C57BL/6 高脂肥胖小鼠的影響
            3.2.1 EGCG對高脂肥胖小鼠體重的影響
            3.2.2 EGCG對高脂肥胖小鼠血液生化指標的影響
            3.2.3 EGCG對高脂肥胖小鼠肝臟中甘油三酯、游離脂肪酸、膽固醇的影響
            3.2.4 EGCG對不同脂肪組織脂代謝相關因子mRNA表達的影響
            3.2.5 EGCG對高脂肥胖小鼠糖代謝的影響
    第四節(jié) 討論
    第五節(jié) 結論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]EGCG的抗前列腺癌作用與IGF信號通路系統(tǒng)的關系及其機制研究[D]. 盧強.中南大學 2010
[2]茶兒茶素氧化聚合物及其生物活性的研究[D]. 李春美.華中農業(yè)大學 2000



本文編號：3732485