肥胖癥是多種因素引起的慢性代謝性疾病,主要表現(xiàn)為體內(nèi)脂肪組織異�；蜻^(guò)量積累,是糖尿病、心血管疾病、腫瘤等若干慢性疾病的主要風(fēng)險(xiǎn)因素。目前治療肥胖的主要方法是藥物療法,療效顯著,但是副作用大,且易產(chǎn)生耐藥性,臨床上對(duì)治療肥胖藥物的應(yīng)用仍有待探討。天然產(chǎn)物的藥物由于其對(duì)疾病的預(yù)防和治療效果顯著,副作用小,被廣泛應(yīng)用于疾病治療的研究。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（簡(jiǎn)稱EGCG）,是從茶葉中分離得到的兒茶素類單體,在綠茶中含量最高且具有較高的生物活性。國(guó)內(nèi)外許多研究表明EGCG具有降脂減肥作用,但是EGCG減肥作用的分子機(jī)理尚不明確,也有一些研究顯示EGCG的作用效果不明顯。本文通過(guò)體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)探討了EGCG對(duì)成熟脂肪細(xì)胞的降脂作用以及對(duì)脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響,為進(jìn)一步了解EGCG降脂減肥作用以及為改善EGCG降脂作用的分子機(jī)制提供理論參考。本研究通過(guò)體外誘導(dǎo)分化培養(yǎng)3T3-L1前脂肪細(xì)胞,EGCG處理后成熟脂肪細(xì)胞脂滴明顯減小,且表現(xiàn)為時(shí)間和濃度依賴性;EGCG并未影響細(xì)胞活性,與對(duì)照組相比,EGCG處理組與脂代謝相關(guān)因子的m RNA表達(dá)水平顯著降低;同時(shí)檢測(cè)到EGCG處理后AMPK的表達(dá)顯... 

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    第一節(jié) 肥胖
        1.1 肥胖的簡(jiǎn)介
        1.2 肥胖的治療
    第二節(jié) 茶多酚
        2.1 茶多酚的簡(jiǎn)介
        2.2 茶多酚藥理作用
    第三節(jié) 兒茶素
        3.1 兒茶素的簡(jiǎn)介
        3.2 EGCG的概述
        3.3 EGCG的藥理作用
        3.4 EGCG降脂作用的研究進(jìn)展
    第四節(jié) 研究的目的和意義
第二章 研究?jī)?nèi)容
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        1.1 誘導(dǎo)分化 3T3-L1前脂肪細(xì)胞
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.1.3 配制誘導(dǎo)培養(yǎng)基
        1.2 EGCG對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的影響
            1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            1.2.3 試劑配制
        1.3 建立高脂肥胖模型
            1.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.3.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)置
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 體外實(shí)驗(yàn)
            2.1.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化
            2.1.2 3T3-L1脂肪細(xì)胞的鑒定（油紅O染色鑒定）
        2.2 EGCG處理 3T3-L1脂肪細(xì)胞
        2.3 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.4 Western blot
            2.4.1 3T3-L1細(xì)胞蛋白提取
            2.4.2 SDS－PAGE電泳
            2.4.3 抗體孵育
        2.5 RT-PCR
            2.5.1 RNA提取
            2.5.2 RNA的評(píng)價(jià)與鑒定
            2.5.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）
        2.6 口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)
        2.7 胰島素耐量實(shí)驗(yàn)
        2.8 動(dòng)物組織中脂類的檢測(cè)
            2.8.1 總膽固醇（TG）檢測(cè)
            2.8.2 甘油三酯（TG）檢測(cè)
            2.8.3 游離脂肪酸檢測(cè)
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    第三節(jié) 結(jié)果分析
        3.1 EGCG降低成熟 3T3-L1脂肪細(xì)胞脂滴大小并改變脂肪代謝
            3.1.1 EGCG處理成熟 3T3-L1細(xì)胞未影響細(xì)胞活性
            3.1.2 EGCG降低成熟 3T3-L1脂肪細(xì)胞脂滴大小
            3.1.3 EGCG抑制成熟3T3-L1細(xì)胞脂代謝相關(guān)因子mRNA水平的表達(dá)
            3.1.4 EGCG通過(guò)抑制PPARγ的表達(dá)降低成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞脂滴大小
            3.1.5 EGCG對(duì)AMPK信號(hào)通路的影響
        3.2 EGCG對(duì)C57BL/6 高脂肥胖小鼠的影響
            3.2.1 EGCG對(duì)高脂肥胖小鼠體重的影響
            3.2.2 EGCG對(duì)高脂肥胖小鼠血液生化指標(biāo)的影響
            3.2.3 EGCG對(duì)高脂肥胖小鼠肝臟中甘油三酯、游離脂肪酸、膽固醇的影響
            3.2.4 EGCG對(duì)不同脂肪組織脂代謝相關(guān)因子mRNA表達(dá)的影響
            3.2.5 EGCG對(duì)高脂肥胖小鼠糖代謝的影響
    第四節(jié) 討論
    第五節(jié) 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3732485