目的:探討芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱綄θ四I小球系膜細(xì)胞（HMC）核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）/血紅素加氧酶（HO-1）信號通路的影響。方法:體外培養(yǎng)HMC細(xì)胞,制備芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱降拇笫蠛幯?并用芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱剿幬镅甯深A(yù),實(shí)驗(yàn)分5組,即正常對照組（A組）、高糖組（B組）、芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱降蛣┝拷M（C組）、芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱街袆┝拷M（D組）、芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱礁邉┝拷M（E組）。A組HMC給予正常大鼠血清的培養(yǎng)液（血清濃度10%）培養(yǎng),B組HMC予含正常大鼠血清的高糖培養(yǎng)液（血清濃度10%）培養(yǎng),C組予含芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱降蛣┝亢幯宓母咛桥囵B(yǎng)液（血清濃度10%）培養(yǎng)干預(yù),D組予含10%芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱街袆┝亢幯宓母咛桥囵B(yǎng)液（血清濃度10%）培養(yǎng)干預(yù),E組予含10%芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱礁邉┝亢幯宓母咛桥囵B(yǎng)液（血清濃度10%）培養(yǎng)干預(yù),分別于培養(yǎng)48 h末收集細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測定。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測方法分析Nrf2及HO-1的表達(dá);運(yùn)用Western Blot的方法從蛋白質(zhì)水平觀察芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱綄MC Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)的影響。Real-time PCR定量分析的方法在基因水平探究芪黃補(bǔ)腎泄... 

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【文章目錄】：
1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物
    1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
    1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
    1.4 主要配制試劑及其配制方法
2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
    2.1 HMC的培養(yǎng)和傳代
    2.2 芪黃補(bǔ)腎泄?jié)岱胶幯宓闹苽?br>    2.3 實(shí)驗(yàn)分組及藥物處理
    2.4 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測Nrf2和HO-1的表達(dá)
    2.5 Western blot測定各組系膜細(xì)胞中Nrf2和HO-1蛋白的表達(dá)
    2.6 Real-time PCR定量分析HO-1mRNA表達(dá)
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 Nrf2、HO-1的表達(dá)結(jié)果
    3.2 Western blot測定各組系膜細(xì)胞中Nrf2、HO-1蛋白的表達(dá)
    3.3 Real-time PCR定量分析HO-1mRNA表達(dá)
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Musashi-1、COX-2、Nrf-2在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義[J]. 曹娟,鄭偉,朱柯斌,楊海濤,沈親親.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2017 (06)
[2]糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制及治療進(jìn)展[J]. 余翠,熊錢穎,王李卓,高家林.  醫(yī)學(xué)綜述. 2015(21)



本文編號：3730980