肥胖已經(jīng)成為全球范圍最普通的一種代謝性疾病。它與許多疾病密切相關(guān),包括高血壓,2型糖尿病,胰島素抵抗,高血脂,脂肪肝和癌癥以及其他一些慢性疾病。本實驗室前期開展了中藥委陵菜抗糖尿病化學(xué)成分研究,發(fā)現(xiàn)主要活性成分委陵菜黃酮,進一步合成了一系列衍生物,發(fā)現(xiàn)黃酮衍生物Fla-CN具有明顯的抗肥胖和抗糖尿病作用。本課題應(yīng)用3T3-L1小鼠前脂肪細胞和人肝癌HepG2細胞,對黃酮衍生物Fla-CN的體外調(diào)節(jié)脂代謝作用進行評價,并對其調(diào)節(jié)脂代謝作用的分子機制進行研究,為后期藥物篩選模型的選擇和藥物作用靶點研究提供實驗依據(jù)。本文第一部分研究黃酮衍生物Fla-CN抑制脂肪生成作用及機制。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)Fla-CN作用于3T3-L1前脂肪細胞分化的早期階段,劑量依賴性地抑制3T3-L1前脂肪細胞分化,降低細胞內(nèi)脂質(zhì)含量。Fla-CN顯著上調(diào)3T3-L1前脂肪細胞分化過程中AMPK的磷酸化水平,Compound C部分阻斷了Fla-CN對3T3-L1前脂肪細胞分化的抑制作用。Fla-CN顯著上調(diào)細胞分化過程中miR-27a/b的表達水平,轉(zhuǎn)染miR-27a/b抑制劑和同時以Compound C干預(yù)后,Fla... 

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、黃酮衍生物Fla-CN抑制 3T3-L1前脂肪細胞分化作用及其機制
    1.1 對象和方法
        1.1.1 細胞系
        1.1.2 主要試劑與藥品
        1.1.3 主要儀器設(shè)備
        1.1.4 實驗方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞分化的影響
        1.2.2 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞不同分化階段的影響
        1.2.3 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞分化過程中AMPK蛋白表達及其磷酸化水平的影響
        1.2.4 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞分化過程中miR-27a/b表達的影響
        1.2.5 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞分化過程中相關(guān)基因表達的影響
        1.2.6 Fla-CN對 3T3-L1前脂肪細胞分化過程中相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和脂肪特異性蛋白表達的影響
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、黃酮衍生物Fla-CN促進成熟 3T3-L1脂肪細胞脂肪分解作用及其機制
    2.1 對象和方法
        2.1.1 細胞系
        2.1.2 主要試劑和藥品
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 實驗方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞內(nèi)甘油三酯含量影響
        2.2.2 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞外甘油含量影響
        2.2.3 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞外游離脂肪酸含量影響
        2.2.4 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞AMPK和ACC磷酸化水平的影響
        2.2.5 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞miR-29b/c表達影響
        2.2.6 miR-29b/c與AMPK關(guān)系的初步探討
        2.2.7 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞脂肪分解相關(guān)基因表達影響
        2.2.8 Fla-CN對成熟 3T3-L1脂肪細胞甘油三酯水解關(guān)鍵蛋白表達水平的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、黃酮衍生物Fla-CN抑制HepG2細胞脂肪生成作用及其機制
    3.1 對象和方法
        3.1.1 細胞系
        3.1.2 主要試劑和藥品
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
        3.1.4 實驗方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪生成的影響
        3.2.2 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞AMPK和ACC蛋白表達及其磷酸化水平的影響
        3.2.3 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪生成過程中mi R-122 表達水平的影響
        3.2.4 miR-122 與AMPK關(guān)系的初步探討
        3.2.5 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪生成相關(guān)基因表達的影響
        3.2.6 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪酸氧化相關(guān)基因表達的影響
        3.2.7 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪生成相關(guān)蛋白表達的影響
        3.2.8 Fla-CN對高糖誘導(dǎo)HepG2細胞脂肪酸氧化相關(guān)蛋白表達的影響
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 miRNAs與脂代謝
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]脂蛋白脂酶調(diào)控因子研究進展[J]. 姜延志,邢淑華,岑王敏,陳建寧,李學(xué)偉.  遺傳. 2013(07)



本文編號：3702556