目的:龍膽苦苷（Gentiopicroside,GPS）,來源于龍膽屬植物龍膽的干燥根及根莖,具有多種藥理活性。由于用小分子抑制劑調(diào)節(jié)P2x7R-NLRP3炎癥小體的激活可能是治療和預(yù)防酒精性肝病的潛在治療方法,因此,我們研究了這個過程是否會被GPS調(diào)節(jié)。方法:通過用酒精（5g/kg）灌胃建立小鼠急性酒精性脂肪肝的體內(nèi)模型。然后通過用50mM乙醇處理HepG2細胞或用LPS處理RAW264.7巨噬細胞和小鼠骨髓來源的巨噬細胞（bone marrow-derived macrophages,BMDM）,隨后用 3mM ATP刺激,建立體外模型。結(jié)果:在小鼠急性酒精性脂肪肝模型中,GPS顯著降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine Amino transferase,ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspartatetransaminase,AST）和積累的甘油三酯（Triglyceride,TG）的含量。GPS能夠升高LKB1/AMPK的水平,而且與膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1（Sterol Regulatory Element-binding Protein-1,SREBP-1）和乙酰輔酶a羧化酶（Acet... 

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 實驗材料和方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 動物實驗過程
        1.2.3 生化指標(biāo)測定
        1.2.4 肝組織學(xué)分析
        1.2.5 HepG2細胞油紅O染色
        1.2.6 免疫組化實驗
        1.2.7 免疫熒光實驗
        1.2.8 小鼠原代骨髓巨噬細胞分離及體外培養(yǎng)
        1.2.9 實時PCR實驗
        1.2.10 蛋白印跡分析實驗
        1.2.11 Caspase-1活性檢測實驗
        1.2.12 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
        1.2.13 SiRNA轉(zhuǎn)染實驗
        1.2.14 統(tǒng)計學(xué)分析
第二章 實驗結(jié)果
    2.1 龍膽苦苷改善酒精引起的肝臟脂肪變性
    2.2 龍膽苦苷通過減少脂肪生成和促進脂質(zhì)氧化來緩解酒精引起的脂肪沉積
    2.3 龍膽苦苷在由酒精引起的小鼠肝臟脂肪變性中通過阻斷P2x7R抑制NLRP3炎癥小體的活化
    2.4 龍膽苦苷通過調(diào)節(jié)P2x7R-NLRP3炎癥小體的激活改善酒精引起的肝細胞脂質(zhì)沉積
    2.5 P2x7R激活是酒精誘導(dǎo)肝細胞脂質(zhì)沉積的上游關(guān)鍵受體
    2.6 龍膽苦苷基于P2x7R阻斷炎癥小體活化所致的巨噬細胞IL-1 β釋放
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻
致謝



本文編號：3668842