發(fā)布時間：2022-07-16 16:50

　　目的:研究當歸補血湯（DBT）對過氧化氫（H2O2）誘導的小鼠骨髓來源內皮祖細胞（EPCs）氧化應激損傷的保護作用。方法:采用密度梯度離心法獲取小鼠骨髓來源的單核細胞,通過特定培養(yǎng)基培養(yǎng)并鑒定獲得EPCs,實驗分為空白組,模型組,DBT組（100,200,400 mg·L-1）。采用噻唑藍（MTT）比色法測定EPCs細胞存活率,構建H2O2誘導的細胞損傷模型;通過MTT,遷移小室（transwell）,Matrigel基質膠,超氧化物熒光陰離子探針（DHE）,分別檢測EPCs增殖、遷移與體外血管形成能力,以及活性氧（ROS）水平,蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測細胞自噬相關蛋白泛素結合蛋白SQSTM1（p62）,微管相關蛋白1輕鏈3Ⅱ型蛋白（LC3-Ⅱ）的蛋白表達。結果:與空白組比較,模型組EPCs細胞增殖能力、遷移能力、成管腔數(shù)及小管分支長度均顯著降低（P<0.01）,胞內ROS水平顯著升高（P<0.01）,自噬標志性蛋白p62顯著升高（P<0.01）,LC3-Ⅱ蛋白表達降低（P<0.01）;與模型組比較,DBT組能呈濃度依賴性地升高EPCs增殖... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 動物
    1.2 藥物與試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 EPCs的分離培養(yǎng)鑒定與細胞造模
    2.2 DBT培養(yǎng)液的制備與分組
    2.3 MTT比色法檢測細胞增殖能力
    2.4 DHE法檢測胞內ROS水平
    2.5 transwell遷移實驗檢測細胞遷移能力
    2.6 小管形成實驗tube formation法檢測細胞血管形成能力
    2.7 蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測自噬相關蛋白表達
    2.8 統(tǒng)計學分析
3 結果
    3.1 EPCs的培養(yǎng)與鑒定
    3.2 細胞損傷模型的構建
    3.3 對H2O2誘導的EPCs增殖能力的影響
    3.4 對H2O2誘導的EPCs遷移能力的影響
    3.5 對H2O2誘導的EPCs血管形成功能的影響
    3.6 對H2O2損傷的EPCs細胞胞內ROS水平的影響
    3.7 對H2O2損傷的EPCs自噬相關蛋白表達的影響
4 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3662890