背景:炎癥與腫瘤之間有著密切的聯(lián)系,據(jù)報(bào)道HIF-1α是癌癥中一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子,IL-1β是炎癥中重要的標(biāo)志物。白芷是一種可以用來治療偏頭痛、牙痛和癌癥的傳統(tǒng)的中藥。從白芷中分離出來的歐前胡素是香豆素類化合物,擁有多種生物活性,包含抗腫瘤活性,但是我們并不了解歐前胡素遏制HIF-1α介導(dǎo)的腫瘤生長的作用機(jī)制。白介素-1β（IL-1β）是炎癥、感染和自身免疫疾病中具有重要作用的細(xì)胞因子。據(jù)報(bào)道鋅指蛋白91（ZFP91）參與各種生物學(xué)過程,但對于ZFP91調(diào)節(jié)IL-1β的表達(dá)機(jī)制尚未明確,該研究首次揭示ZFP91可促進(jìn)pro-IL-1β的產(chǎn)生和IL-1β的分泌。目的:（1）研究目的是揭示歐前胡素對于人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞中的HIF-1α信號(hào)通路的影響,闡明其抗腫瘤作用機(jī)理。（2）我們旨在闡明在巨噬細(xì)胞中ZFP91促進(jìn)pro-IL-1β產(chǎn)生和IL-1β分泌的作用機(jī)制。方法:（1）主要實(shí)驗(yàn)方法有熒光素酶報(bào)告基因法、MTT法、蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)法、免疫熒光法、逆轉(zhuǎn)錄PCR法、流式細(xì)胞法、集落形成實(shí)驗(yàn)法、EdU標(biāo)記免疫熒光法、裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)法、免疫組化實(shí)驗(yàn)法和酶聯(lián)免疫吸附法。（2）主要分析方法有... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省211工程院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ＨＩＦ－ｌａ蛋白質(zhì)合成的調(diào)節(jié)??１??

圖２氧氣依賴性的ＨＩＦ－１降解的調(diào)節(jié)??ＨＩＦ－ｌａ蛋白降解受氧氣依賴性脯氨酰羥化酶羥化作用調(diào)控，其靶向作用于??Ｅ３泛素蛋白連接酶的泛素化（圖２）。脯氨酰羥化酶結(jié)構(gòu)域蛋白（ＰＨＤ）?１－３修??飾ＨＩＦ－ｌａ的脯氨酸（Ｐｒｏ）?－４０２和－５６４的羥基化［１Ｑ’１１］。ＨＩＦ－ｌａ與腫瘤抑制蛋白??ＶＨＬ的相互作用需要Ｐｒｏ－４０２和Ｐｒｏ－５６４的羥基化［１２４５］。ＶＨＬ是Ｅ３泛素－蛋白連??接酶的識(shí)別組分，其靶向作用于ＨＩＦ－ｌａ使其通過蛋白酶體路徑降解。通過乙酰??轉(zhuǎn)移酶ＡＲＤ１使ＨＩＦ－ｌｃｔ上５３２位賴氨酸乙酰化增強(qiáng)了?ＶＨＬ與ＨＩＦ－ｌａ的相互作??用，促進(jìn)其泛素化和降解［１６］。通過ＦＩＨ－１?（抑制ＨＩＦ－１的因子）的作用，ＨＩＦ－ｌａ??轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域功能也被〇２調(diào)節(jié)［１７－１９］。ＦＩＨ－１通過天冬酰胺（Ａｓｎ）?－８０３的羥化作用??介導(dǎo)其轉(zhuǎn)錄激活，其防止ＨＩＦ－ｌａ與共激活因子ｐ３００和ＣＢＰ結(jié)合［２（）＿２２］。與ＶＨＬ??或Ｐ３００／ＣＢＰ相互作用的ＨＩＦ－ｌａ結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)分析表明，羥基化是一種明顯改??２??

或ＡＰ－１上調(diào)從而上調(diào)各種信號(hào)傳導(dǎo)成分（包括ＮＬＲＰ３、ｐｒｏ－ＩＬ－１?Ｐ和ｐｒｏ－ＩＬ－１８?）??的基因。Ｓｉｇｎａｌｌｌ涉及通過ＮＬＲＰ３識(shí)別ＰＡＭＰＳ或ＤＡＭＰｓ，從而促進(jìn)了?ＡＳＣ和??ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１向復(fù)合物的募集（圖３）。Ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１在基質(zhì)復(fù)合體中的聚集啟動(dòng)??了其自身裂解為ｐｌ〇?（ｌＯｋＤａ）和ｐ２０?（２０ｋＤａ）的二個(gè)亞基，其通過異二聚化形??成有活性的半胱天冬酶－１酶［４４］。最近，己經(jīng)表明，除了?ｃａｓｐａｓｅ－丨之外，ｃａｓｐａｓｅ－８??也能夠?qū)ⅲ穑颍铮桑蹋椋鸬鞍姿饧庸こ善浠钚孕问�。這是由Ｍａｅｌｆａｉｔ及其同事首次??報(bào)道的，他們證明?Ｔｏｌｌ?ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１?ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｏｍａｉｎ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎｄｕｃｉｎｇ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ??５??


本文編號(hào)：3618028