目的探討牡荊素調(diào)節(jié)自噬與自噬流介導(dǎo)缺氧復(fù)氧大鼠原代心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。方法采用原代心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧（H/R）模擬缺血再灌注損傷。CCK-8檢測(cè)心肌細(xì)胞的活力。試劑盒檢測(cè)心肌細(xì)胞上清液中乳酸脫氫酶（LDH）水平。2′,7′-二氯熒光黃雙乙酸鹽（DCFH-DA）檢測(cè)原代心肌細(xì)胞中活性氧（ROS）的水平。自噬雙標(biāo)記腺病毒（mRFP-GFP-LC3）轉(zhuǎn)染原代心肌細(xì)胞,觀察自噬小體和自噬溶酶體數(shù)量。Western blot檢測(cè)LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1、P62蛋白的表達(dá)。結(jié)果大鼠原代心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧后, H/R組心肌細(xì)胞活力顯著降低,LDH漏出增多,心肌細(xì)胞內(nèi)ROS水平明顯升高,而牡荊素各劑量組可提高缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞活力,抑制心肌細(xì)胞的LDH釋放,降低心肌細(xì)胞中ROS水平。心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染mRFP-GFP-LC3病毒后,檢測(cè)結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組比較,H/R組心肌細(xì)胞出現(xiàn)明顯的自噬和自噬流增強(qiáng),而牡荊素各劑量組可抑制心肌細(xì)胞H/R后的自噬和自噬流增強(qiáng),減少心肌細(xì)胞內(nèi)自噬小體的累積。另外,Western blot結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組比較,H/R組原代心肌細(xì)胞中自噬蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,55(08)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

牡荊素對(duì)正常培養(yǎng)大鼠原代心肌細(xì)胞活力的影響(n=6)

mRFP-GFP-LC3結(jié)果顯示,與正常對(duì)照組比較,缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)后H/R組心肌細(xì)胞出現(xiàn)明顯的自噬和自噬流增強(qiáng),并且心肌細(xì)胞LC3Ⅱ蛋白表達(dá)增加(F=16.11,P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ比值增大,提示H/R后心肌細(xì)胞中自噬小體累積增加,自噬溶酶體隨之增多;而牡荊素各劑量組可抑制H/R后心肌細(xì)胞的自噬和自噬流增強(qiáng),LC3Ⅱ蛋白表達(dá)減少,LC3Ⅱ/Ⅰ比值減小,心肌細(xì)胞內(nèi)自噬小體的累積受抑制。結(jié)果見圖4。圖3 牡荊素對(duì)H/R損傷心肌細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響(n=6)

牡荊素對(duì)H/R損傷心肌細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響(n=6)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]二苯乙烯苷減輕小鼠急性腦缺血再灌注后的氧化應(yīng)激損傷及其對(duì)自噬的影響[J]. 張奇龍,薛威,徐博涵,唐虹,江勤,董六一.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(08)
[2]《中國(guó)心血管病報(bào)告2018》概要[J]. 胡盛壽,高潤(rùn)霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,陳偉偉.  中國(guó)循環(huán)雜志. 2019(03)
[3]注射用牡荊素與葛根素注射液抗大鼠心肌缺血/再灌注損傷量效關(guān)系的研究[J]. 王亞男,彭成鳳,甄毅嵐,董六一.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(03)



本文編號(hào)：3581167