目的:篩選抗諾卡氏菌有效復(fù)方（中藥復(fù)方DS）,制備中藥復(fù)方DS最佳提取物,為中藥復(fù)方提取物抗諾卡氏菌研制提供參考。方法:（1）測(cè)定諾卡氏菌數(shù)目與吸光度關(guān)系,建立菌懸液中諾卡氏菌計(jì)數(shù)方法。利用微量肉湯稀釋法,以恩諾沙星對(duì)諾卡氏菌的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度為指標(biāo),建立體外抑菌效果評(píng)價(jià)方法,篩選出抗諾卡氏菌效果最佳的中藥復(fù)方DS。（2）采用紫外-可見(jiàn)分光光度法建立中藥復(fù)方DS提取物化學(xué)評(píng)價(jià)方法,考察中藥復(fù)方DS提取方法、溶媒、粉碎度、溶媒用量、提取時(shí)間以及提取次數(shù);使用L₉（3⁴）正交設(shè)計(jì)試驗(yàn),選取粉碎度、溶媒用量、提取時(shí)間和提取次數(shù)因素,優(yōu)選出中藥復(fù)方DS最佳提取工藝。（3）以石油醚—乙酸乙酯（8:2）為展開(kāi)劑,應(yīng)用薄層色譜法對(duì)中藥復(fù)方DS最佳提取物進(jìn)行定性鑒別。選用流動(dòng)相:甲醇—水（80:20）,色譜柱:Eclipse XDB—C₁₈柱（4.6mm×150mm,5mm）,柱溫:25℃,檢測(cè)波長(zhǎng):270nm,檢測(cè)器:DAD,分析時(shí)間:30min,流速:1.0ml/min,使用高效液相色譜法測(cè)定中藥復(fù)方DS最佳提取物中指標(biāo)成... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

諾卡氏菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)

圖 2-2 諾卡氏菌菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)2.4 MIC（最低抑菌濃度）實(shí)驗(yàn)將恩諾沙星溶液二倍梯度稀釋?zhuān)謩e加入等量 1.16×106CFU/ml 諾卡氏菌菌液中，密封，28℃培養(yǎng) 4d，肉眼觀(guān)察培養(yǎng)物最低無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者，即為藥物的 MIC值。2.5 MBC（最低殺菌濃度）實(shí)驗(yàn)將恩諾沙星溶液二倍梯度稀釋?zhuān)謩e加入等量 1.16×106CFU/ml 諾卡氏菌菌液中，密封，28℃培養(yǎng) 4d，吸取未見(jiàn)諾卡氏菌生長(zhǎng)的各培養(yǎng)物 0.1ml，移種至無(wú)菌腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基上，涂勻，密封，28℃培養(yǎng) 4d，菌落數(shù)少于 5 個(gè)即藥物的 MBC 值。結(jié)果見(jiàn)表 2-1。

對(duì)照品C紫外-可見(jiàn)分光光度法掃描圖

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3571470