目的證明丹參（Salvia miltiorrhiza Bge.）主要成分丹參總酚酸（Total salvianolic acids,Tsa）具有誘導(dǎo)大鼠腎上腺嗜鉻瘤細(xì)胞PC12細(xì)胞（pheochromocytoma cells,PC12）分化的作用,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal regulated kinase,ERK）及相關(guān)蛋白與Tsa誘導(dǎo)PC12細(xì)胞分化之間的關(guān)系。方法（1）運(yùn)用噻唑藍(lán)溴鹽檢測(cè)法（MTT assay,MTT）檢測(cè)0.01μg·L^-1、0.1μg·L^-1、1μg·L^-1濃度的Tsa對(duì)PC12細(xì)胞是否具有藥物毒性,以此來保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行。（2）檢測(cè)0.01μg·L^-1、0.1μg·L^-1、1μg·L^-1的Tsa對(duì)氧糖剝奪損傷（oxygen and glucose deprivation,OGD）損傷后的PC12細(xì)胞有無修復(fù)作用,進(jìn)一步證明Tsa對(duì)PC12細(xì)胞具有增殖及保護(hù)作用。（3）體... 

【文章來源】：山西省中醫(yī)藥研究院山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
前言
第一部分 不同濃度Tsa對(duì)PC12細(xì)胞活力的影響
    1.材料和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
        2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分組
        2.3 細(xì)胞活性檢測(cè)
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.討論
    5.結(jié)論
第二部分 不同濃度Tsa對(duì)OGD損傷后PC12細(xì)胞存活率的影響
    1.材料和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
        2.2 OGD模型的建立及測(cè)定
        2.3 細(xì)胞活性檢測(cè)
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 OGD模型的檢測(cè)
        3.2 不同濃度Tsa對(duì)OGD模型的修復(fù)作用
    4.討論
    5.結(jié)論
第三部分 不同濃度Tsa誘導(dǎo)PC12細(xì)胞分化機(jī)制的初步研究
    1.材料和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
        2.2 Westernbloting檢測(cè)MAP-2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2及MEK1/2蛋白表達(dá)
        2.3 Westernbloting檢測(cè)MEK抑制劑U0126對(duì)p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表達(dá)的影響
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 Tsa對(duì)PC12細(xì)胞分化的影響
        3.2 Westernbloting檢測(cè)MAP-2蛋白表達(dá)結(jié)果
        3.3 Westernbloting檢測(cè)p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表達(dá)結(jié)果
        3.4 Westernbloting檢測(cè)p-MEK1/2及MEK1/2蛋白表達(dá)結(jié)果
        3.5 MEK抑制劑U0126對(duì)Tsa誘導(dǎo)p-ERK1/2及ERK1/2蛋白的影響
    4.討論
    5.結(jié)論
第四部分 Tsa1μg·L~(-1)誘導(dǎo)PC12細(xì)胞分化機(jī)制的研究
    1.材料和儀器
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 Westernbloting檢測(cè)p-ERK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2及MEK1/2及Ras蛋白表達(dá)
        2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
        2.3 Tsa1μg·L~(-1)處理后PC12細(xì)胞免疫細(xì)胞化學(xué)染色
        2.4 Westernbloting檢測(cè)MEK抑制劑U0126及PD184352對(duì)ERK1/2蛋白表達(dá)的影響
        2.5 MEK抑制劑U0126及PD184352對(duì)Tsa處理后PC12細(xì)胞分化的影響
        2.6 數(shù)據(jù)處理
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 不同時(shí)間點(diǎn)NGF處理PC12細(xì)胞后p-ERK1/2及ERK1/2的表達(dá)
        3.2 不同時(shí)間點(diǎn)Tsa1μg·L~(-1)處理PC12細(xì)胞后p-ERK1/2及ERK1/2的表達(dá)
        3.3 不同時(shí)間點(diǎn)Tsa1μg·L~(-1)處理PC12細(xì)胞的分化情況
        3.4 不同時(shí)間點(diǎn)Tsa1μg·L~(-1)處理PC12細(xì)胞后p-MEK1/2及MEK1/2的表達(dá)
        3.5 不同時(shí)間點(diǎn)Tsa1μg·L~(-1)處理PC12細(xì)胞后Ras蛋白的表達(dá)
        3.6 MEK抑制劑U0126及PD184352對(duì)Tsa誘導(dǎo)p-ERK1/2及ERK1/2蛋白的影響
        3.7 MEK抑制劑U0126及PD184352對(duì)Tsa誘導(dǎo)PC12細(xì)胞分化的影響
    4.討論
    5.結(jié)論
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄1 英文縮略詞
附錄2 Ras/MEK1/2/ERK1/2信號(hào)通路圖
附錄3 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3537565