發(fā)布時間：2021-12-02 18:11

　　穿心蓮是我國的傳統(tǒng)中藥,具備多種藥效作用。穿心蓮內(nèi)酯是中藥穿心蓮中發(fā)揮藥效的主要成分,具有抗炎作用,然而其發(fā)揮抗炎作用的分子機(jī)制還尚不明確。炎癥是一個動物機(jī)體和病原體相互作用的復(fù)雜過程,這些復(fù)雜的相互作用的結(jié)果是使巨噬細(xì)胞激活,活化的巨噬細(xì)胞能夠消除入侵的有傳染性的微生物和觸發(fā)釋放以TNF-α,IL-1β和IL-6為代表的炎性細(xì)胞因子,使機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)。已有研究表明,LPS可誘發(fā)炎癥,且為主要成分,NF-κB和MAPKs是LPS信號傳導(dǎo)過程中兩條極其經(jīng)典的路徑。因此,本試驗進(jìn)一步研究穿心蓮內(nèi)酯對LPS誘導(dǎo)的炎性反應(yīng)的抗炎作用及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,為穿心蓮內(nèi)酯的治療作用提供理論基礎(chǔ)。本試驗首先在RAW264.7小鼠單核-巨噬細(xì)胞上探究穿心蓮內(nèi)酯的抗炎機(jī)制。采用LPS刺激RAW264.7小鼠單核-巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)炎癥模型,并分別加入不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯（25、12.5、6.25 μg/mL）。分別采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和熒光定量PCR法（qRT-PCR）測定促炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量和mRNA表達(dá)水平;采用凝膠遷移試驗（EMSA）來測定核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）... 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖５穿心蓮內(nèi)酯對ＮＦ－ｋＢ通路中轉(zhuǎn)錄因子ｐ６５蛋白入核表達(dá)的影響??

２．６乳腺組織病理組織學(xué)觀察??乳腺組織病理切片觀察穿心蓮內(nèi)酯對ＬＰＳ誘導(dǎo)小鼠乳腺炎病理組織學(xué)的影??響。如圖８所示，對照組，小鼠乳腺腺泡結(jié)構(gòu)完整，未看到明顯的病理變化；??ＬＰＳ組，外膜間質(zhì)有淋巴細(xì)胞，腺泡上皮細(xì)胞脫落，有明顯充血情況，空泡變性；??地塞米松組，腺泡未脫落，治療效果最好；穿心蓮內(nèi)酯低劑量組，腺泡分泌粘液，??有上皮細(xì)胞脫落，充血明顯，治效果一般，外模結(jié)構(gòu)清晰；穿心蓮內(nèi)酯中劑量組，??輕微充血，有上皮細(xì)胞脫落，癥狀減輕，外膜結(jié)構(gòu)清晰；穿心蓮內(nèi)酯高劑量組，??可以看到腺泡飽滿，充血不明顯，癥狀明顯減輕，外膜未見淋巴細(xì)胞，正常腺泡??較多，個別有脫落。??畫■關(guān)??ｌ?＿＿??圖８不同處理組小鼠乳腺病理組織學(xué)切片（ＨＥ染色，ｘ４〇〇）??Ｆｉｇ．?８?Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ?ｓｅｃｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｍａｍｍａｒｙ?ｇｌａｎｄ?ｉｎ?ｄｉｆＴｃｒｃｎｔ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｇｒｏｕｐｓ?ｏｆ?ｍｉｃｅ?（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ?ａｎｄ?ｅｏｓｉｎ??ｓｔａｉｎｉｎｇ

２．７穿心蓮內(nèi)酯對ＬＰＳ誘導(dǎo)的乳腺組織細(xì)胞因子ＴＮＦ－ｏｕＩＬ－ｌ（３和ＩＬ－６??分泌的影響??如圖９所示，與對照組相比，ＬＰＳ組中ＴＮＦ－ｃｔ、ＩＬ－ｌｐ和ＩＬ－６分泌量均顯著??升高（尸＜?０．０５）。與ＬＰＳ組相比，穿心蓮內(nèi)醋低、中、高劑量組和地塞米松組??中ＴＮＦ－ａ和［Ｌ－６的分泌量均極顯著降低（／＂＜０．０１?）。穿心蓮內(nèi)酯低劑量組ｆＬ－ｌ［３??的分泌量顯著降低（／＾〈Ｏ．ＯＳ），穿心蓮內(nèi)酯中、高劑量組和地塞米松組ＩＬ－１Ｊ３??的分泌量極顯著降低（尸＜〇．〇丨）。??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]穿心蓮內(nèi)酯對膿毒血癥大鼠肝損傷的保護(hù)作用[J]. 楊新娟.  中成藥. 2015(10)
[2]黃芪總黃酮對脂多糖體外誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞的細(xì)胞因子和NO分泌水平的影響[J]. 張賢,郭澤,張沖,王平,王沙沙,程瑤,張雪梅.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2015(03)
[3]穿心蓮的藥理作用研究進(jìn)展[J]. 王博.  黑龍江科技信息. 2015(08)
[4]穿心蓮內(nèi)酯抗子宮內(nèi)膜異位癥的藥效學(xué)評價[J]. 張莉華,張國紅,郭孫偉,陸文亮,王晶,曹晶,顏璐璐,馬曉慧,周水平.  中國新藥雜志. 2014(14)
[5]姜黃素抑制香煙煙霧提取物刺激巨噬細(xì)胞RAW264.7所致炎癥反應(yīng)[J]. 和平,趙玉杰,劉原,柯蕊,楊芬,楊妮,馮雁京,張立然.  山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2014(05)
[6]穿心蓮內(nèi)酯對糖尿病大鼠血糖及胰腺胰島素樣表皮生長因子-1蛋白的影響[J]. 梁勇剛,石靜,焦向英,王明亮,宋彬妤,王登妮.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2014(04)
[7]Toll樣受體4信號通路在大鼠乳腺炎發(fā)病機(jī)制中作用的研究[J]. 盧勁曄,顧蓓蓓,鄒思湘,苗晉鋒.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2014(03)
[8]穿心蓮內(nèi)酯衍生物對2型糖尿病大鼠的降糖作用及機(jī)制研究[J]. 李珍珠,燕軍,張高小,張在軍,于沛,徐立朋.  中南藥學(xué). 2014(01)
[9]穿心蓮內(nèi)酯對小鼠鎮(zhèn)痛抗炎作用的實驗研究[J]. 夏東利,徐志立,張瑩,代嚴(yán),鄒麗婷.  兒科藥學(xué)雜志. 2013(04)
[10]穿心蓮內(nèi)酯抗銅綠假單胞菌生物被膜及與阿奇霉素協(xié)同抗菌作用[J]. 程惠娟,劉江,張庚.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2012(02)

博士論文
[1]運用CADD探討穿心蓮內(nèi)酯衍生物抑制ALPHA-葡萄糖苷酶的構(gòu)效關(guān)系及構(gòu)建其跨膜轉(zhuǎn)運預(yù)測系統(tǒng)[D]. 徐俊.暨南大學(xué) 2010
[2]MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在重癥急性胰腺炎發(fā)病機(jī)制中的作用[D]. 施新崗.第二軍醫(yī)大學(xué) 2004
[3]CCK-8對LPS誘導(dǎo)大鼠肺間質(zhì)巨噬細(xì)胞活化的抑制作用及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究[D]. 李淑瑾.河北醫(yī)科大學(xué) 2002

碩士論文
[1]黃芪多糖對內(nèi)毒素誘導(dǎo)的U937細(xì)胞分泌炎癥因子的影響及其機(jī)制的研究[D]. 徐荔.北京化工大學(xué) 2011
[2]穿心蓮內(nèi)酯體外抗H1N1感染及其對RLH信號通路影響的研究[D]. 于斌.暨南大學(xué) 2011
[3]穿心蓮內(nèi)酯衍生物的合成（二）[D]. 劉志軍.天津醫(yī)科大學(xué) 2011
[4]防治奶牛乳房炎新型中藥制劑的研究[D]. 連學(xué)昭.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2006



本文編號：3528925