發(fā)布時(shí)間：2021-11-28 04:07

　　目的:評價(jià)雷公藤紅素（celastrol,cel）在棕櫚酸誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡中的協(xié)同毒性作用及其可能的機(jī)制,為雷公藤紅素更廣泛的應(yīng)用,降低心臟毒副反應(yīng)提供理論依據(jù)。方法:心肌細(xì)胞H9c2生長至匯合度達(dá)到約80%時(shí),用不同濃度雷公藤紅素（100、200、400、800、1600 nmol/L）處理心肌細(xì)胞H9c2,其中Dox作為陽性對照。雷公藤紅素聯(lián)合棕櫚酸（PA,0.1 mmol/L）處理心肌細(xì)胞H9c2或原代心肌細(xì)胞,CCK-8及蛋白印跡法分別檢測細(xì)胞活力和胞內(nèi)Cleaved caspase 3,p-AMPKα,AMPKα,p-JNK,JNK,LC3,β-actin的表達(dá)水平;采用ROS檢測試劑盒和酶標(biāo)儀檢測心肌細(xì)胞內(nèi)ROS水平的變化。結(jié)果:1、不同濃度雷公藤紅素單獨(dú)作用H9c2 12h,結(jié)果顯示雷公藤紅素濃度在800 nmol/L及以下時(shí),對心肌細(xì)胞活力和激活型caspase3產(chǎn)物沒有明顯影響（p>0.05）,濃度達(dá)到1600 nmol/L時(shí),心肌細(xì)胞活力下降,胞內(nèi)激活型caspase3產(chǎn)物增加,對心肌細(xì)胞表現(xiàn)出明顯毒性作用（p<0.05）。2、不同濃度雷公藤紅素與棕櫚酸... 

【文章來源】：湖北科技學(xué)院湖北省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PA單獨(dú)處理心肌細(xì)胞H9c2不同時(shí)間(x±s,n=3)

圖 2 雷公藤紅素對心肌細(xì)胞毒性評價(jià)( x±s, n=3)。A 分析不同濃度雷公藤紅素對心肌細(xì)胞活力的影響，其中棕櫚酸和阿霉素作為陽性對照，與 CON 組相比，*p<0.05；B 分析不同濃度雷公藤紅素對胞內(nèi)激活型 caspase3 積累的影響，與 CON 組相比，*p<0.05。3.雷公藤紅素聯(lián)合 PA 處理心肌細(xì)胞 H9c2采用 CCK8 試劑盒，PA 能夠明顯下調(diào) H9c2 細(xì)胞活力，而聯(lián)合雷公藤紅素產(chǎn)生正向協(xié)同作用，結(jié)果顯示（圖 3-A），如 400 nmol/L 的雷公藤紅素與棕櫚酸共同作用，細(xì)胞活力僅為棕櫚酸單獨(dú)處理組的 50%。蛋白質(zhì)印跡分析發(fā)現(xiàn)，采用不同濃度雷公藤紅素預(yù)處理原代心肌細(xì)胞及 H9c2 細(xì)胞 1 h，再加 PA，兩者同時(shí)處理心肌細(xì)胞 24 h 后，檢測 caspase3 的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，低劑量的雷公藤紅素（200，400 nmol/L）和 PA 同時(shí)處理心肌細(xì)胞時(shí)，明顯增加激活型 caspase3的積累。結(jié)果顯示（圖 3-B），且各組數(shù)據(jù) p<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖 3 低劑量雷公藤紅素與棕櫚酸的協(xié)同毒性作用檢測 ( x±s, n=3)。櫚酸對 H9c2 細(xì)胞活力的影響，與 CON 組相比，*p<0.05，與 PA 組相比量雷公藤紅素聯(lián)合棕櫚酸對 H9c2 胞內(nèi)激活型 caspase3 的積累的影響*p<0.05；與 PA 組相比，#p<0.05。4.雷公藤紅素聯(lián)合 PA 處理原代心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)印跡分析發(fā)現(xiàn)，采用不同濃度雷公藤紅素預(yù)處理心β

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3523671