阿爾茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）嚴重危害老年人的身心健康和生活質(zhì)量,已成為世界各地備受關(guān)注的公共健康問題。但AD發(fā)病機制復雜,目前尚無有效的藥物治療,因此研究預(yù)防AD的有效方法迫在眉睫。資料顯示具有抗氧化、抗炎及神經(jīng)保護功能成分的天然產(chǎn)物在干預(yù)AD等神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病方面有著重要的作用。寧夏枸杞是我國藥食同源的名貴中藥材,枸杞多糖作為其主要活性成分,因具有抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老和神經(jīng)保護等作用,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面的研究日益受到關(guān)注。本研究從氧化損傷和炎癥相關(guān)途徑來考察枸杞多糖對AD是否具有預(yù)防作用。建立Aβ42誘導的神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y氧化損傷AD模型,考察枸杞多糖預(yù)處理對Aβ42誘導的SH-SY5Y細胞氧化損傷的影響。采用MTT法測定各組細胞活力,LDH法測定各組細胞毒性,THT熒光染色法檢測枸杞多糖體外對Aβ42的聚集和解聚的影響,試劑盒比色法檢測ROS、SOD、CAT、GSH、GSSG、MDA 水平,Western blot 檢測 Nrf2、PI3K/Akt、NFкB 信號通路相關(guān)蛋白表達。結(jié)果顯示枸杞多糖預(yù)處理能減輕Aβ42誘導的S... 

【文章來源】：寧夏大學寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＡＰ的產(chǎn)生［１７］??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?Ａｐ＂７】??

正常情況下，微管相關(guān)磷酸酶和激酶之間的平衡維持ｔａｕ蛋白磷酸化和去磷酸化狀態(tài)。病理??條件下，激酶上調(diào)和磷酸酶下調(diào)導致ｔａｕ蛋白過度磷酸化，產(chǎn)生雙螺旋不溶性絲狀體和纏結(jié)團塊??導致神經(jīng)元變性和突觸功能障礙，這些絲狀體和纏結(jié)團塊稱為ＮＦＴ，如圖１－２所示［２３］。在ＡＤ發(fā)??生過程中，ＮＦＴ在神經(jīng)細胞體內(nèi)形成，是一種相對不溶性蛋白復合物，即使在受影響的神經(jīng)細胞??死亡后也能存活下來，它們可能在細胞外釋放。釋放后，這些胞外ＮＦＴ被星形膠質(zhì)細胞和小膠??質(zhì)細胞吞嗤＝ＮＦＴ通常出現(xiàn)在Ｍｅｙｎｅｒｔ的海馬、內(nèi)嗅皮質(zhì)、杏仁核、中縫背核和基底核［２４］。??－Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ??＼ｗ．?ｉ＊＊?Ｋｌｏａｓｅｖ?＆?＾?Ｐｈｏｓｐｂａｐａｓｅｓ??二?Ｕ，ｔ??Ｈｙｐｅｒ??ｐｂｏｓｐｈｏｎｌａｉｅｄ?ｔａｕ??Ｊ?Ｄｅｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ??參＾?一—一??ＮＦＴ??圖１－２?ｔａｕ蛋白纏結(jié)的形成ｐ３］??『２３＂｜??Ｆｉｇ．?１－２?Ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｔａｕ?ｔａｎｇｌｅ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ??－３－??

Ｎｒｆ２作為能夠激活內(nèi)源性抗氧化應(yīng)激通路的轉(zhuǎn)錄因子，活性受Ｋｅａｐｌ調(diào)控。Ｎｒｆ２屬于轉(zhuǎn)錄因??子ＣＮＣ?（ｃａｐ－ｎ－ｃｏｌｌａｒ）堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子家族，是由２．２ｋＤ基因?qū)幋a的相對分子質(zhì)量為??６６０００的蛋白。Ｎｒｆ２有７個高度保守的結(jié)構(gòu)域，即Ｎｅｈｌ－Ｎｅｈ７，，如圖１－３所示［４８］。Ｎｅｈｌ有一??個堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，與小分子肌腱纖維瘤蛋白（ｍｕｓｃｌｏａｐｏｎｅｕｒｏｔｉｃ?ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ?ｐｒｏｔｅｉｎ，??Ｍａｆ）形成異源二聚體，結(jié)合位于許多防御酶基因調(diào)控區(qū)的抗氧化劑／親電子反應(yīng)元件％。價１１２??在Ｎｒｆ２的Ｎ－末端，與Ｋｅａｐｌ結(jié)合被錨定于細胞質(zhì)中，對Ｎｒ￡２轉(zhuǎn)錄活性起負性調(diào)節(jié)作用［５２］。Ｎｅｈ３??位于Ｎｒｆ２的Ｃ－末端，激活ＡＲＥ調(diào)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄［５３］。Ｎｅｈ４、Ｎｅｈ５是含酸性殘基的兩個獨立??轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)域，啟動下游基因轉(zhuǎn)錄［５４］。Ｎｅｈ６主要參與Ｎｒｆ２降解，Ｎｅｈ６對Ｎｒｆ２的轉(zhuǎn)錄起負調(diào)節(jié)作??用．但不依賴于Ｋｅａｐｌ［５５］。Ｎｅｈ７是與視黃醇類Ｘ受體相互作用的區(qū)域［５６］。受１＊￡２調(diào)控的抗氧??化酶有?ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＰｘ、ＨＯ－１?等。??ＡＲＥ在機體抗氧化應(yīng)激中發(fā)揮關(guān)鍵作用，可誘導ＨＯ－１等抗氧化酶的表達。ＡＲＥ是特異的??ＤＮＡ－啟動于結(jié)合序列，位于某些細胞保護基因的上游啟動子區(qū)域［５６］。ＡＲＥ分布于生物體內(nèi)，通??過減少細胞受到的損傷來維持穩(wěn)態(tài)。??Ｃ?ｏｎｓｅｒｖ?ｅｄ?ｄｏｍａｉｎｓ?ｏｆ?ｈｌｃａｐｌ??ｎｈ￣－—?ｉｔ＜Ｈ?＇＂ＩＴＴＯ?￣?ｎｍｉｍ?．．＾＂ｖｒｏｏＨ??ｗｎ


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