目的觀察柴胡皂苷d（SSd）對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的人肝星狀細(xì)胞LX-2活化后細(xì)胞內(nèi)ROS形成、NLRP3炎性小體表達(dá)的影響,探討NLRP3炎性小體活化的上游信號(hào),及SSd對(duì)線粒體ROS-NLRP3信號(hào)通路的調(diào)控作用,為SSd在治療肝纖維化疾病的應(yīng)用提供臨床依據(jù)。方法體外培養(yǎng)人肝星狀細(xì)胞LX-2,采用H₂O₂活化LX-2細(xì)胞,干預(yù)組加入線粒體阻斷劑MitoTEMPOL、中藥單體SSd孵育24h后再經(jīng)過(guò)H₂O₂處理細(xì)胞,采用線粒體膜電位（JC-1）檢測(cè)、ATP檢測(cè)觀察線粒體受損情況;ROS檢測(cè)觀察活性氧生成情況;Western blot法、RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞NLRP3、ASC、Caspase-1的表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組比較,JC-1檢測(cè)、ATP檢測(cè)顯示LX-2活化后（單純H₂O₂組）因細(xì)胞增殖JC-1顯示紅色熒光為主、ATP水平明顯升高（細(xì)胞功能正常）,P<0.01,ROS生成增多（P<0.01）,NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白及基因表達(dá)隨... 

【文章來(lái)源】：時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2020,31(04)北大核心CSCD

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LX-2細(xì)胞氧化應(yīng)激后JC-1變化,SSd、MitoTEMPOL對(duì)氧化應(yīng)激的LX-2細(xì)胞JC-1的影響

LX-2細(xì)胞氧化應(yīng)激后JC-1變化,SSd、MitoTEMPOL對(duì)氧化應(yīng)激的LX-2細(xì)胞JC-1的影響

與空白對(duì)照組相比,H2O2處理LX-2細(xì)胞后ATP明顯升高(P<0.01),表明氧化應(yīng)激處理使細(xì)胞增殖,功能正常;MitoTEMPOL阻斷劑處理后加入H2O2、SSd組處理后加入H2O2,ATP濃度相比于單純H2O2組有明顯下降(P<0.01)。提示MitoTEMPOL+H2O2處理細(xì)胞后,線粒體阻斷劑能清除線粒體內(nèi)的ROS,ATP生成可能隨之減少;SSd+H2O2組表明SSd使LX-2細(xì)胞增殖受到抑制或損傷,使細(xì)胞線粒體膜電位損傷,ATP濃度較對(duì)照組相比有降低。MitoTEMPOL、SSd組較對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.1.3 LX-2細(xì)胞內(nèi)ROS檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3509737