研究目的非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指非酒精和其他明確因素所致的代謝綜合征,彌漫性肝細(xì)胞中大泡性的脂肪病變是NAFLD的主要病理特征,有單純性脂肪肝、非酒精性脂肪肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）和肝硬化三個階段。非酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制目前尚不清楚,比較被認(rèn)可的發(fā)病機(jī)制是“二次打擊”學(xué)說。瑞香素（Daphnetin,DAP）是從瑞香屬（DaphneLinn）植物長白瑞香中提取出來的有效成分,具有良好的抗氧化、抗炎活性。目前尚未見瑞香素對非酒精脂肪肝影響的文獻(xiàn)報道。本文以油酸處理的HepG2細(xì)胞作為非酒精性脂肪肝炎體外研究模型,從脂代謝、胰島素敏感性和氧化應(yīng)激三方面,研究了瑞香素對NASH的預(yù)防和治療作用及其機(jī)制。實(shí)驗(yàn)方法HepG2細(xì)胞經(jīng)0.5 mM油酸（oleic acid,OA）處理24h作為體外研究NASH的細(xì)胞模型,DAP給藥方式分為預(yù)防模式與治療模式兩類。在預(yù)防模式時,HepG2細(xì)胞用OA和DAP（5、20、50μM）同時處理24h;在治療模式時,HepG2細(xì)胞先用... 

【文章來源】：湖北大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１瑞香素對ＮＡＳＨ模型細(xì)胞存活率的影響??

本實(shí)驗(yàn)主要研宄不同濃度的瑞香素對非酒精性脂肪肝的預(yù)防和治療作用，ＨｅｐＧ２細(xì)??胞作為非酒精性脂肪肝炎的體外模型細(xì)胞，首先檢測不同濃度５ｐＭ、２０ｐＭ、５０＾Ｍ和??ＩＯＯｈＭ的瑞香素對油酸誘導(dǎo)的ＨｅｐＧ２細(xì)胞的存活率是否有影響，處理２４ｈ。如圖３－１所??示，在濃度范圍為如Ｍ－５０ｐＭ時，瑞香素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的存活能力沒有明顯的影響，??但ｌＯＯ＾Ｍ的瑞香素對ＨｅｐＧ２細(xì)胞有輕微的增殖效果。根據(jù)該ＭＴＴ結(jié)果，瑞香素給藥??低、中、高劑量確定為扣Ｍ、２〇ｎＭ和５０ｐＭ。??１?ｍｉｌｌ??＿＿＿＿＿＿??ＤＵＳＯ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｓ＾ｉＭ?２〇ｍ？?ＳＧ＾ｉＭ?１００ｐＭ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＤＡＰ??圖３－１瑞香素對ＮＡＳＨ模型細(xì)胞存活率的影響??３．２瑞香素體外抗ＮＡＳＨ預(yù)防作用研究??３．２．１瑞香素對模型細(xì)胞脂堆積的影響??１２０－１??＃＃??１００．?ｐ—；—??Ｗ－?＊??為?￣￣■—１?＊＊??〇?６０?＊?—］■—?＊＊??■??４０?？??２０．??■?１?ｍ?Ｍ?１，１１，１?１?，??ＯＡ｛０．５?ｍＭ）?＊?＋?＋?＋?＋??ＤＡＰ（ｍＭ）?‘?？?５?２０?５０??圖３－２預(yù)防模式下瑞香素對ＮＡＳＨ模型細(xì)胞脂堆積的影響??２

?本實(shí)驗(yàn)為了研究瑞香素對ＮＡＳＨ模型細(xì)胞脂堆積是否有影響，我們檢測了模型細(xì)胞??內(nèi)甘油三酯（ＴＧ）的含量，結(jié)果如圖３－２所示，圖中的縱坐標(biāo)表示相較于０Ａ模型組細(xì)??胞內(nèi)ＴＧ含量的百分比。濃度為５、２０和５０［ｉＭ的瑞香素和油酸同時處理細(xì)胞２４ｈ。從??圖中可以看出，給予ＯＡ處理后，細(xì)胞內(nèi)ＴＧ含量極顯著升高（＃＃ｐ＜０．０１），同時處理ＤＡＰ??和ＯＡ后，細(xì)胞內(nèi)的ＴＧ含量呈濃度依賴性的降低（＞＜０．０５，?＋＞＜０．０１），其中在瑞香素??的濃度到５〇ｔｉＭ時，胞內(nèi)ＴＧ的含量與模型組有極顯著性差異的降低，該結(jié)果表示瑞香??素可以降低預(yù)防模式下ＮＡＳＨ模型細(xì)胞脂堆積情況。??在生化指標(biāo)的檢測中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中ＴＧ含量在給藥處理后有所下降，為了探索??瑞香素減少脂堆積的機(jī)制，我們檢測了瑞香素處理后的細(xì)胞中脂代謝相關(guān)基因的ｍＲＮＡ??（圖３－３）和蛋白（圖３－４）的表達(dá)。??Ａ?Ｂ?ｃａ？？：?Ｃ??＃?＊?．?？＊＇?？?？?ｒｎ??ｉｕ－ｎ?��？■?■?ｎ?－卜：廠１?ｎ?＇?ｉ??ｎ?ｎ?ｎ?ｉ：：?ｍ?）??！匕?Ｉ??’＊?Ｍ，??…?ｎ?，＇．?－?ｉ??丨

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3489189