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中風(fēng)膏預(yù)適應(yīng)對腦缺血損傷的延遲保護(hù)作用及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2021-10-12 00:16
  目的:研究中風(fēng)膏預(yù)適應(yīng)激發(fā)腦缺血耐受(Ischemic Tolerance,IT),進(jìn)而產(chǎn)生內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)對腦缺血及再灌注損傷發(fā)揮延遲保護(hù)作用,并探究其作用機(jī)制。方法:72只SPF級♂SD大鼠,體重280±20g,采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為正常組(K),假手術(shù)組(J),腦缺血再灌注組(IR),腦缺血預(yù)適應(yīng)延遲保護(hù)模型3天(M3)、5天(M5)、7天(M7)組,中風(fēng)膏預(yù)適應(yīng)延遲保護(hù)3天(Z3)、5天(Z5)、7天(Z7)組。K組普通飼養(yǎng),與其他組相同抓取;J組僅暴露左側(cè)CCA、ECA及ICA,但不阻斷MCA;IR組參照Longa方法建立大鼠腦缺血再灌注(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)模型;M組依照Longa方法建立腦缺血預(yù)適應(yīng)(Ischemic preconditioning,IPC)模型;Z組:預(yù)先給予中風(fēng)膏懸濁液,再建立CIRI模型。實(shí)驗(yàn)大鼠在麻醉清醒后,分別觀察其一般情況、神經(jīng)功能缺損評分;各組大鼠進(jìn)行腦組織HE染色觀察;采用比色法檢測腦組織中NO量及NOS活性;ELISA法檢測腦組織蛋白激酶C(PKC)、熱休克蛋白(HSP70)... 

【文章來源】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞對照表
前言
實(shí)驗(yàn)研究
    1.材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.4 其他所需材料
        1.5 實(shí)驗(yàn)藥物
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.0 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
        2.1 實(shí)驗(yàn)動物分組
        2.2 各組大鼠干預(yù)和模型的建立方法
        2.3 給藥方法
        2.4 模型成功鑒定標(biāo)準(zhǔn)
        2.5 造模中注意事項(xiàng)
        2.6 腦組織的獲取
        2.7 實(shí)驗(yàn)觀察項(xiàng)目及指標(biāo)
            2.7.1 大鼠一般狀況觀察
            2.7.2 神經(jīng)功能評分
            2.7.3 觀察中風(fēng)膏對再灌注大鼠腦組織形態(tài)學(xué)的影響
            2.7.4 采用比色法檢測腦組織中NO、NOS活力
            2.7.5 采用ELISA法檢測腦組織PKC、HSP70濃度
            2.7.6 采用免疫組化方法檢測組織區(qū)NOS、PKC、HSP70蛋白陽性神經(jīng)元數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)
            2.7.7 采用RT-PCR技術(shù)檢測腦組織NOSmRNA、PKCmRNA、HSP70mRNA的表達(dá)
        2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 各實(shí)驗(yàn)組大鼠生活狀態(tài)觀察
        3.2 中風(fēng)膏對大鼠神經(jīng)功能評分的影響
        3.3 中風(fēng)膏對各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)的影響
        3.4 中風(fēng)膏對大鼠大腦組織中NO含量、NOS活力的影響
        3.5 中風(fēng)膏對大鼠腦組織中PKC、HSP70濃度的影響
        3.6 中風(fēng)膏對大鼠腦組織中NOS、HSP70、PKC陽性細(xì)胞數(shù)的影響
        3.7 中風(fēng)膏對大鼠腦組織中NOSmRNA、PKCmRNA、HSP70mRNA表達(dá)的影響
    4.討論
        4.1 實(shí)驗(yàn)動物選擇及模型制備合理性研究
            4.1.1 實(shí)驗(yàn)動物種類選擇
            4.1.2 實(shí)驗(yàn)動物性別選擇
            4.1.3 實(shí)驗(yàn)動物體重選擇
            4.1.4 腦缺血預(yù)適應(yīng)模型合理性的研究
        4.2 IPC保護(hù)機(jī)制研究
            4.2.1 抑制腦缺血后的氧化應(yīng)激
            4.2.2 抑制腦缺血后的炎癥反應(yīng)
            4.2.3 抗凋亡基因
            4.2.4 穩(wěn)定代謝平衡,減輕Ca2+超載
        4.3 中藥預(yù)適應(yīng)現(xiàn)代研究
        4.4 中風(fēng)膏主要組成治療中風(fēng)研究
        4.5 中風(fēng)膏在ICVD中的應(yīng)用研究
        4.6 中風(fēng)膏對實(shí)驗(yàn)大鼠一般情況的影響
        4.7 中風(fēng)膏對神經(jīng)功能評分的影響
        4.8 中風(fēng)膏對各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)影響
        4.9 中風(fēng)膏對腦組織NO、NOS的影響
        4.10 中風(fēng)膏對腦組織PKC的影響
        4.11 中風(fēng)膏對腦組織HSP70的影響
        4.12 NO、NO、PKC、HSP與腦缺血預(yù)適應(yīng)之間的關(guān)系
    5.結(jié)語
        5.1 結(jié)論
        5.2 體會與展望
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
附錄1 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物合格證書
附錄2 實(shí)驗(yàn)動物設(shè)施使用證明


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[6]馬云枝教授辨治缺血性中風(fēng)學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)[D]. 張曉陽.河南中醫(yī)藥大學(xué) 2016
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[8]李莉治療缺血性中風(fēng)急性期學(xué)術(shù)思想總結(jié)及清火通絡(luò)湯治療缺血性中風(fēng)的臨床研究[D]. 高磊.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[9]國醫(yī)大師朱良春教授治療缺血性中風(fēng)病的學(xué)術(shù)思想及臨證經(jīng)驗(yàn)[D]. 田華.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[10]補(bǔ)陽還五湯對缺血性腦中風(fēng)急性期大鼠腦組織NO\NO、TXA2\PGI2的影響[D]. 張迪權(quán).遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2015



本文編號:3431517

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