目的觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β相關(guān)激酶1（TAK1）抑制劑（NG25）對(duì)人肝癌細(xì)胞系HepG2脂滴積累的影響,并探討其作用機(jī)制。方法取HepG2細(xì)胞并分為兩組,處理組細(xì)胞加入2μmol/L NG25處理24 h,對(duì)照組加入等體積DMSO處理24 h,兩組均同時(shí)用終濃度為250μmol/L脂肪酸（OA、PA各125μmol/L）共同孵育,采用油紅O染色觀察細(xì)胞脂滴積累情況（油紅O染色紅光強(qiáng)度）,熒光定量PCR法和蛋白免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡DNA分裂因子樣效應(yīng)因子C（CIDEC）mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量,雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞熒光素酶活性。另取HepG2細(xì)胞并分為3組,恢復(fù)組細(xì)胞預(yù)先轉(zhuǎn)染1μg質(zhì)粒PPARγ后再加入2μmol/L NG25處理24 h,處理組細(xì)胞加入2μmol/L NG25處理24 h,對(duì)照組細(xì)胞加入等體積DMSO處理24 h,3組同時(shí)用終濃度250μmol/L脂肪酸（OA、PA各125μmol/L）共同孵育,熒光定量PCR法和蛋白免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞CIDEC mRNA、蛋白。結(jié)果與對(duì)照組比較,處理組油紅O染色紅光強(qiáng)度... 

【文章來(lái)源】：山東醫(yī)藥. 2020,60(24)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及主要試劑
    1.2 NG25處理的HepG2細(xì)胞油紅O染色紅光強(qiáng)度觀察
    1.3 NG25處理的HepG2細(xì)胞PPARγ mRNA、蛋白及PPARγ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性檢測(cè)
    1.4 NG25處理的HepG2細(xì)胞CIDEC mRNA、蛋白檢測(cè)
    1.5 超表達(dá)PPARγ的HepG2細(xì)胞CIDEC mRNA、蛋白檢測(cè)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 處理組和對(duì)照組油紅O染色紅光強(qiáng)度比較
    2.2 處理組和對(duì)照組PPARγ mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量及PPARγ啟動(dòng)子熒光素酶活性比較
    2.3 處理組和對(duì)照組CIDEC mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量比較
    2.4 恢復(fù)組、處理組、對(duì)照組CIDEC mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量比較
3 討論



本文編號(hào)：3431229