目的:本研究旨在應用牛蒡子中木脂素類成分牛蒡酚F（Lappaol F,LAF）對腫瘤細胞進行干預,觀察LAF對多種腫瘤細胞增殖、凋亡、遷移、侵襲的影響;研究LAF對致癌基因Yes-Associated Protein（YAP）及其靶基因表達的影響;進一步研究LAF對YAP的調(diào)控方式,從而探討LAF抗腫瘤作用的機制。方法:（1）磺酰羅丹明B法檢測LAF對人宮頸癌Hela細胞、人結(jié)腸癌SW480細胞、人前列腺癌PC3細胞、人乳腺癌MDA-MB-231細胞增殖活性的影響;（2）Annexin V-FITC/PI雙染-流式檢測法,檢測不同濃度的LAF對四種腫瘤細胞凋亡的影響;（3）多功能實時無標記細胞分析儀研究LAF對Hela細胞和MDA-MB-231細胞遷移和侵襲的抑制作用;（4）Western Blot法檢測LAF對YAP表達水平的影響,以及對YAP靶基因（BIRC5、Bcl-2、C-myc）表達的影響;（5）免疫熒光法檢測LAF對YAP在亞細胞水平定位表達的影響;（6）Western Blot法檢測YAP調(diào)控蛋白14-3-3 σ的表達水平;（7）siRNA干擾法敲減14-3-3σ表達,通... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學廣東省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１不同濃度的ＬＡＦ對腫瘤細胞增殖的影響（４８ｈ）??

圖１－２?ＬＡＦ?（５〇ｕｍｏｌ／Ｌ）作用不同時間對腫瘤細胞增殖的影響??表１－１?ＬＡＦ抑制Ｈｅｌａ細胞存活率（％）列表（２４ｈ）??ＬＡＦ（?ｕｍｏｌ／Ｌ）?細胞存活率（％）??￣０?１００．?００?＋?０．?００??１０?９３．?１５?士?７．?０４??２５?８１．?４８±３．?９７＊??５０?７５．?３４?±２．?７０＊??７５?５９．?５９?±１６．?８６???注：首先對劑量資料進行正態(tài)性檢驗，￣ＬＡＦ１０ｕｍｏｌ／Ｌ組、ＬＡＦ２５ｕｍｏｌ／Ｌ組、ＬＡＦ５０?ｙ?ｍｏｌ／Ｌ組、??ＬＡＦ７５ｕｎｉｏｌ／Ｌ?組的?Ｓｉｇ＞０．０５，說明?ＬＡＦ１０ｕｍｏｌ／Ｌ?組、ＬＡＦ２５ｕｍｏｌ／Ｌ?組、ＬＡＦ５０ｕｍｏｌ／Ｌ?組、??ＬＡＦ７５?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組數(shù)據(jù)皆符合正態(tài)分布。其次進行方差齊性檢驗，本組五個方差齊性檢驗戶０．?００２，??不符合方差齊性假設(shè)，故組間采用Ｇａｍｅｓ－Ｈｏｗｅｌｌ檢驗方法進行比較。與正常對照組相比，ＬＡＦ不??同濃度藥物組的細胞活力值皆顯著降低（ＬＡＦｌＯｐｍｏｌ／Ｌ組ｒａ對照組，戶０．?５７６；?ＬＡＦ２５ｌｉｍｏｌ／Ｌ??組?ｒｓ對照組，／Ｋ）．?０４６；ＬＡＦ５０?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組?ｋｓ對照組，蘆０？?０１２；ＬＡＦ７５?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組?ｋｓ對照組，／Ｍ）．?１５７）。??當Ｋ０．?０５時，表示差異有統(tǒng)計學的意義。戶＜０．０５?（＊）。??表１－２?ＬＡＦ抑制Ｈｅｌａ細胞存活率（％）列表（４８ｈ）??

三、實驗結(jié)果??ＬＡＦ對腫瘤細胞凋亡的影響??由圖２－１所示，ＬＡＦ?（２５?ｉｉｍｏｌ／Ｌ－７５?ｙｍｏｌ／Ｌ）作用４８ｈ后，能夠誘導Ｈｅｌａ細??胞、ＳＷ４８０細胞、ＰＣ３細胞和ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞的凋亡，ｆｌ該作用具有明顯的濃度梯度。??即隨著ＬＡＦ濃度的增加，其促進四種腫瘤細胞凋亡的作用也明顯ｉ曽強。各細胞流式凋??亡圖見圖２－２至２－５，具體數(shù)據(jù)見表２－１至２－４。??１００－，??—ｈｅｌａ??＼〇?８０－?Ａ?—?ＳＷ４８０??＾?—?ＰＣ３??？?６０－?—?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??１：??〇?Ｔ?■■?Ｉ—，?１?＊??０?２０?４０?６０?８０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（?ｕｍｏｌ／Ｌ）??圖２－１?ＬＡＦ對腫瘤細胞凋亡的影響（４８ｈ）??２１??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]DNA損傷關(guān)卡蛋白1和Yes相關(guān)蛋白1在卵巢癌患者中的表達及與卵巢癌患者預后的相關(guān)性[J]. 高潔凡.  中國婦幼保健. 2017(12)
[2]結(jié)直腸癌中Yap、TAZ的表達及意義[J]. 陳海濱,王立姣,趙建軍.  廣東醫(yī)學. 2016(18)
[3]Yes相關(guān)蛋白在腫瘤中作用的研究進展[J]. 周曉明,毛幸,吳小濤.  現(xiàn)代醫(yī)學. 2016(04)
[4]牛蒡子苷元通過抑制PI3-K/Akt信號通路誘導肝癌細胞凋亡[J]. 王靜泓,姜孝新,曾樂平,劉煉,周輝,劉玉冰.  腫瘤藥學. 2015(06)
[5]YAP與腫瘤干細胞相關(guān)性研究進展[J]. 李海欣,何娜,鄭紅.  中國腫瘤臨床. 2015(14)
[6]牛蒡子苷元與順鉑聯(lián)合對人肺癌H460細胞系增殖和凋亡的影響[J]. 王煥勤,王靜.  醫(yī)藥論壇雜志. 2015(02)
[7]牛蒡子苷元抗腫瘤血管生成作用研究[J]. 何凡,孫小玲,宿亞柳,孫東,康廷國.  中藥藥理與臨床. 2014(04)
[8]牛蒡子苷與苷元誘導人前列腺癌PC3細胞非凋亡性死亡的研究[J]. 李孝慶,楊瑞儀,劉抗倫,沈小玲,胡英杰.  廣州中醫(yī)藥大學學報. 2013(04)
[9]牛蒡子苷元復方抗流感病毒的實驗研究[J]. 符林春,徐培平,劉妮,楊子峰,張奉學,胡英杰.  中藥新藥與臨床藥理. 2008(04)
[10]紫杉醇對肺腺癌A549細胞株增殖和凋亡的影響[J]. 高寶安,杜春玲,陳世雄,丁文柏,楊俊.  天津醫(yī)藥. 2008(02)

碩士論文
[1]牛蒡子的化學成分研究與抗腫瘤作用初步研究[D]. 劉抗倫.廣州中醫(yī)藥大學 2008



本文編號：3418348