目的:本研究旨在應(yīng)用牛蒡子中木脂素類(lèi)成分牛蒡酚F（Lappaol F,LAF）對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行干預(yù),觀察LAF對(duì)多種腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、侵襲的影響;研究LAF對(duì)致癌基因Yes-Associated Protein（YAP）及其靶基因表達(dá)的影響;進(jìn)一步研究LAF對(duì)YAP的調(diào)控方式,從而探討LAF抗腫瘤作用的機(jī)制。方法:（1）磺酰羅丹明B法檢測(cè)LAF對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞、人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞、人前列腺癌PC3細(xì)胞、人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖活性的影響;（2）Annexin V-FITC/PI雙染-流式檢測(cè)法,檢測(cè)不同濃度的LAF對(duì)四種腫瘤細(xì)胞凋亡的影響;（3）多功能實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記細(xì)胞分析儀研究LAF對(duì)Hela細(xì)胞和MDA-MB-231細(xì)胞遷移和侵襲的抑制作用;（4）Western Blot法檢測(cè)LAF對(duì)YAP表達(dá)水平的影響,以及對(duì)YAP靶基因（BIRC5、Bcl-2、C-myc）表達(dá)的影響;（5）免疫熒光法檢測(cè)LAF對(duì)YAP在亞細(xì)胞水平定位表達(dá)的影響;（6）Western Blot法檢測(cè)YAP調(diào)控蛋白14-3-3 σ的表達(dá)水平;（7）siRNA干擾法敲減14-3-3σ表達(dá),通... 

【文章來(lái)源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１不同濃度的ＬＡＦ對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響（４８ｈ）??

圖１－２?ＬＡＦ?（５〇ｕｍｏｌ／Ｌ）作用不同時(shí)間對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的影響??表１－１?ＬＡＦ抑制Ｈｅｌａ細(xì)胞存活率（％）列表（２４ｈ）??ＬＡＦ（?ｕｍｏｌ／Ｌ）?細(xì)胞存活率（％）??￣０?１００．?００?＋?０．?００??１０?９３．?１５?士?７．?０４??２５?８１．?４８±３．?９７＊??５０?７５．?３４?±２．?７０＊??７５?５９．?５９?±１６．?８６???注：首先對(duì)劑量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，￣ＬＡＦ１０ｕｍｏｌ／Ｌ組、ＬＡＦ２５ｕｍｏｌ／Ｌ組、ＬＡＦ５０?ｙ?ｍｏｌ／Ｌ組、??ＬＡＦ７５ｕｎｉｏｌ／Ｌ?組的?Ｓｉｇ＞０．０５，說(shuō)明?ＬＡＦ１０ｕｍｏｌ／Ｌ?組、ＬＡＦ２５ｕｍｏｌ／Ｌ?組、ＬＡＦ５０ｕｍｏｌ／Ｌ?組、??ＬＡＦ７５?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組數(shù)據(jù)皆符合正態(tài)分布。其次進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，本組五個(gè)方差齊性檢驗(yàn)戶０．?００２，??不符合方差齊性假設(shè)，故組間采用Ｇａｍｅｓ－Ｈｏｗｅｌｌ檢驗(yàn)方法進(jìn)行比較。與正常對(duì)照組相比，ＬＡＦ不??同濃度藥物組的細(xì)胞活力值皆顯著降低（ＬＡＦｌＯｐｍｏｌ／Ｌ組ｒａ對(duì)照組，戶０．?５７６；?ＬＡＦ２５ｌｉｍｏｌ／Ｌ??組?ｒｓ對(duì)照組，／Ｋ）．?０４６；ＬＡＦ５０?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組?ｋｓ對(duì)照組，蘆０？?０１２；ＬＡＦ７５?ｕ?ｍｏｌ／Ｌ組?ｋｓ對(duì)照組，／Ｍ）．?１５７）。??當(dāng)Ｋ０．?０５時(shí)，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義。戶＜０．０５?（＊）。??表１－２?ＬＡＦ抑制Ｈｅｌａ細(xì)胞存活率（％）列表（４８ｈ）??

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果??ＬＡＦ對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響??由圖２－１所示，ＬＡＦ?（２５?ｉｉｍｏｌ／Ｌ－７５?ｙｍｏｌ／Ｌ）作用４８ｈ后，能夠誘導(dǎo)Ｈｅｌａ細(xì)??胞、ＳＷ４８０細(xì)胞、ＰＣ３細(xì)胞和ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細(xì)胞的凋亡，ｆｌ該作用具有明顯的濃度梯度。??即隨著ＬＡＦ濃度的增加，其促進(jìn)四種腫瘤細(xì)胞凋亡的作用也明顯ｉ曽強(qiáng)。各細(xì)胞流式凋??亡圖見(jiàn)圖２－２至２－５，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表２－１至２－４。??１００－，??—ｈｅｌａ??＼〇?８０－?Ａ?—?ＳＷ４８０??＾?—?ＰＣ３??？?６０－?—?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??１：??〇?Ｔ?■■?Ｉ—，?１?＊??０?２０?４０?６０?８０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（?ｕｍｏｌ／Ｌ）??圖２－１?ＬＡＦ對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響（４８ｈ）??２１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]牛蒡子的化學(xué)成分研究與抗腫瘤作用初步研究[D]. 劉抗倫.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3418348