目的:探討健骨顆粒氯仿萃取部位通過BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信號通路,對體外成骨細(xì)胞分化的影響。方法:1.藥物的制備運用氯仿對健骨顆粒原方進行萃取,獲得氯仿萃取溶液,經(jīng)蒸發(fā)、干燥最終形成固體,得到健骨顆粒氯仿萃取部位。將充分干燥后的中藥固體,用DMSO配置成30mg/ml的母液,分裝后-20℃凍存?zhèn)溆谩?.細(xì)胞干預(yù)與指標(biāo)檢測從BALB/c小鼠的乳鼠顱蓋骨提取原代成骨細(xì)胞,取第三代細(xì)胞作為實驗對象,設(shè)置健骨顆粒氯仿萃取部位不同藥物濃度組（即0、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml、32ng/ml、64ng/ml藥物濃度組）,MTT實驗檢測各組細(xì)胞的增殖速度,選擇藥物的最佳干預(yù)濃度,作為后續(xù)實驗的藥物濃度。取第三代細(xì)胞,設(shè)空白對照組（加入含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基）、抑制劑組（加入含BMP抑制劑Noggin150ng/ml的完全培養(yǎng)基）、藥物組（加入含健骨顆粒氯仿萃取部位最佳干預(yù)濃度的完全培養(yǎng)基）、抑制劑加藥物組（加入含相應(yīng)濃度Noggin與健骨顆粒氯仿萃取部位的完全培養(yǎng)基）,分別進行相關(guān)干預(yù);實時熒光定量 PCR（Quantitative Re... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞
中文摘要
ABSTRACT
引言
材料和方法
    1. 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗藥物
        1.3 主要實驗試劑
        1.4 主要實驗儀器
        1.5 主要實驗試劑的配制
    2. 實驗方法
        2.1 健骨顆粒氯仿萃取部位的制備
        2.2 成骨細(xì)胞的分離
        2.3 成骨細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代
        2.4 藥物干預(yù)與指標(biāo)檢測
    3. 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
    1. 成骨細(xì)胞分離與培養(yǎng)情況
    2. 成骨細(xì)胞堿性磷酸酶染色結(jié)果
    3. 最佳給藥濃度的選擇
    4. 相關(guān)指標(biāo)MRNA表達(dá)檢測結(jié)果
    5. 相關(guān)指標(biāo)蛋白表達(dá)檢測結(jié)果
討論
    1. 組織塊法聯(lián)合酶消化法,可提高提取原代成骨細(xì)胞的數(shù)量
    2. 補腎健脾法治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中醫(yī)理論基礎(chǔ)
    3. 健骨顆粒氯仿萃取部位對體外成骨細(xì)胞分化與BMP2/SMAD1/RUNX2/OSTERIX通路的影響
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]補腎中藥調(diào)控BMP-Smad信號通路促進牽張成骨的研究進展[J]. 余翔,姜自偉,鄭曉輝,蔡群斌,李悅,黃楓,李康活,金志超,歐陽崇志,孫世棟,黃澤青,呂迪,莫穎杰.  遼寧中醫(yī)雜志. 2017(09)
[2]雌激素影響絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松分子機制研究進展[J]. 孫偉明,劉爽.  中國老年學(xué)雜志. 2017(02)
[3]Noggin基因沉默對BMP和Wnt信號通路表達(dá)的影響[J]. 馬雨楠,游穎,沈歡歡,孫兆增,曾林,法云智.  中國實驗動物學(xué)報. 2016(05)
[4]天然藥物化學(xué)史話:青蒿素——中藥研究的豐碑[J]. 張鐵軍,王于方,劉丹,李力更,郭瑞霞,史清文,董燕平.  中草藥. 2016(19)
[5]當(dāng)歸揮發(fā)油對高血脂模型大鼠的降血脂作用及血管內(nèi)皮保護作用[J]. 吳國泰,劉五州,杜麗東,妥海燕,任遠(yuǎn),郭玫.  中國動脈硬化雜志. 2016(10)
[6]2型糖尿病腎病大鼠腎動脈上BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信號通路的激活[J]. 覃春美,龔財判,魏曉,吳蔚樺,劉建,歐三桃.  中國動脈硬化雜志. 2016(10)
[7]中醫(yī)治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥研究進展[J]. 彭娟娟,王冰,王旭東.  河南中醫(yī). 2016(05)
[8]血管鈣化大鼠腎動脈BMP2/Smad1/Runx2信號通路的表達(dá)[J]. 覃春美,魏曉,龔財判,吳蔚樺,劉建,樊均明,歐三桃.  四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(02)
[9]雌激素缺乏性骨質(zhì)疏松癥的骨代謝研究進展[J]. 王迎彬,黃秀峰,王金花.  右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2016(01)
[10]當(dāng)歸揮發(fā)油對小鼠急性心肌缺血損傷的保護作用[J]. 羅慧英,黃亞紅.  中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2016(02)

博士論文
[1]BMP-Smad信號通路的調(diào)節(jié)及其在成骨分化中的作用[D]. 李麗莉.山東大學(xué) 2013
[2]淫羊藿苷對成骨細(xì)胞增殖分化的影響及機制探討[D]. 高毅.河北醫(yī)科大學(xué) 2013

碩士論文
[1]丹參酮包合物制備及體外抑菌活性研究[D]. 強喆.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]健骨顆粒含藥血清對大鼠成骨細(xì)胞增殖周期的影響及其機理研究[D]. 袁俊.福建中醫(yī)學(xué)院 2007



本文編號：3417984