目的:探討健骨顆粒氯仿萃取部位通過BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信號(hào)通路,對(duì)體外成骨細(xì)胞分化的影響。方法:1.藥物的制備運(yùn)用氯仿對(duì)健骨顆粒原方進(jìn)行萃取,獲得氯仿萃取溶液,經(jīng)蒸發(fā)、干燥最終形成固體,得到健骨顆粒氯仿萃取部位。將充分干燥后的中藥固體,用DMSO配置成30mg/ml的母液,分裝后-20℃凍存?zhèn)溆谩?.細(xì)胞干預(yù)與指標(biāo)檢測(cè)從BALB/c小鼠的乳鼠顱蓋骨提取原代成骨細(xì)胞,取第三代細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,設(shè)置健骨顆粒氯仿萃取部位不同藥物濃度組（即0、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml、32ng/ml、64ng/ml藥物濃度組）,MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖速度,選擇藥物的最佳干預(yù)濃度,作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的藥物濃度。取第三代細(xì)胞,設(shè)空白對(duì)照組（加入含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基）、抑制劑組（加入含BMP抑制劑Noggin150ng/ml的完全培養(yǎng)基）、藥物組（加入含健骨顆粒氯仿萃取部位最佳干預(yù)濃度的完全培養(yǎng)基）、抑制劑加藥物組（加入含相應(yīng)濃度Noggin與健骨顆粒氯仿萃取部位的完全培養(yǎng)基）,分別進(jìn)行相關(guān)干預(yù);實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（Quantitative Re... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞
中文摘要
ABSTRACT
引言
材料和方法
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.5 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 健骨顆粒氯仿萃取部位的制備
        2.2 成骨細(xì)胞的分離
        2.3 成骨細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代
        2.4 藥物干預(yù)與指標(biāo)檢測(cè)
    3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1. 成骨細(xì)胞分離與培養(yǎng)情況
    2. 成骨細(xì)胞堿性磷酸酶染色結(jié)果
    3. 最佳給藥濃度的選擇
    4. 相關(guān)指標(biāo)MRNA表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
    5. 相關(guān)指標(biāo)蛋白表達(dá)檢測(cè)結(jié)果
討論
    1. 組織塊法聯(lián)合酶消化法,可提高提取原代成骨細(xì)胞的數(shù)量
    2. 補(bǔ)腎健脾法治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中醫(yī)理論基礎(chǔ)
    3. 健骨顆粒氯仿萃取部位對(duì)體外成骨細(xì)胞分化與BMP2/SMAD1/RUNX2/OSTERIX通路的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]BMP-Smad信號(hào)通路的調(diào)節(jié)及其在成骨分化中的作用[D]. 李麗莉.山東大學(xué) 2013
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碩士論文
[1]丹參酮包合物制備及體外抑菌活性研究[D]. 強(qiáng)喆.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
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