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異牡荊素調(diào)控MnSOD/p-CaMKⅡ表達(dá)抑制NCI-H460細(xì)胞致瘤性的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-07 10:44
  目的:研究異牡荊素(ISOV)對人非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞源性干樣細(xì)胞(LCSLC)MnSOD/p-CaMK II信號通路及致瘤性的影響。方法:1.用10%血清DMEM培養(yǎng)基體外培養(yǎng)人非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞,無血清干細(xì)胞條件培養(yǎng)基超低粘附培養(yǎng)法得到LCSLC,并分別進(jìn)行擴(kuò)增。不同濃度ISOV(1.0、3.0、10.0 μng/mL)處理 LCSLC。蛋白質(zhì)印跡法檢測 LCSLC 的 MnSOD、p-CaMKⅡ及干細(xì)胞標(biāo)記物CD133、CD44、ALDH1蛋白表達(dá)水平。腫瘤球形成實(shí)驗(yàn)、創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測LCSLC致瘤性。糖酵解代謝試劑盒測定乳酸代謝水平。2.表達(dá)MnSOD shRNA腺病毒感染敲低LCSLC MnSOD基因,蛋白質(zhì)印跡法檢測MnSOD、p-CaMKⅡ、干細(xì)胞標(biāo)記物(CD133、CD44和ALDHI)蛋白表達(dá)。腫瘤球形成實(shí)驗(yàn)、創(chuàng)口愈合實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測致瘤性。糖酵解代謝試劑盒測定乳酸代謝水平。3.MnSOD shRNA與ISOV(3μg/mL)聯(lián)合處理LCSLC,蛋白質(zhì)印跡分析MnSOD、... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

異牡荊素調(diào)控MnSOD/p-CaMKⅡ表達(dá)抑制NCI-H460細(xì)胞致瘤性的研究


圖1-1人非小細(xì)胞肺癌NCI-H460細(xì)胞系細(xì)胞的體外培養(yǎng)(20〇x)

球形,瓊脂,人大,傳代培養(yǎng)


數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差。??3.1.3人非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞與LCSLC瓊脂集落形成的比較??如圖1-3顯示,瓊脂集落形成試驗(yàn)結(jié)果顯示,LCSLC在瓊脂中形成的集落??數(shù)明顯多于H460細(xì)胞,且LCSLC所形成的集落,直徑更大。??11??

集落形成率,瓊脂,細(xì)胞系,細(xì)胞


3.1.4?NCI-H460細(xì)胞與LCSLC體外遷移能力的比較??創(chuàng)口愈合試驗(yàn)分別檢測NCI-H460細(xì)胞系細(xì)胞與LCSLC體外細(xì)胞迀移能力??的差異。圖1-4結(jié)果表明:與NCI-H460細(xì)胞比較,LCSLC有更高的體外迀移能??力(P〈0.05)。??12??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]芹菜素對NCI-H446細(xì)胞系球細(xì)胞自我更新和uPAR表達(dá)的影響[J]. 舒玲,袁慶,崔迎紅,孫姝雯,陳阿,陳丹,曹建國,張堅(jiān)松.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(11)
[2]肺癌干細(xì)胞研究進(jìn)展及與中醫(yī)藥關(guān)系的思考[J]. 王爽,徐振曄.  遼寧中醫(yī)雜志. 2012(10)

碩士論文
[1]肺癌治療研究的熱點(diǎn)主題及其演化軌跡分析[D]. 馬明.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號:3216430

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