目的:優(yōu)化丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝,分析丹參地上部分揮發(fā)油成分組成及其總萜類含量測(cè)定,體外抗氧化實(shí)驗(yàn)探究丹參地上部分揮發(fā)油抗氧化能力,最后通過體內(nèi)AD小鼠模型藥理實(shí)驗(yàn),對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油的抗AD活性及其作用機(jī)制進(jìn)行探究。以期尋找新的潛在抗AD藥,促進(jìn)丹參植株資源的綜合開發(fā)利用。方法:采用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),優(yōu)化水蒸氣蒸餾法提取丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝;以GC/GC-MS技術(shù)分析丹參地上部分揮發(fā)油成分組成,以α-石竹烯為對(duì)照品,用5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸的顯色原理,建立丹參地上部分揮發(fā)油總萜類含量測(cè)定方法,對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油總萜類含量進(jìn)行測(cè)定;清除DPPH自由基、三氯乙酸還原法測(cè)定丹參地上部分揮發(fā)油體外抗氧化活性;采用腹腔注射D-gal和灌胃給藥AlCl₃的方法建造AD小鼠模型,探究丹參地上部分揮發(fā)油抗AD作用,分別從行為學(xué)水平上應(yīng)用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)和探針試驗(yàn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)AD模型小鼠的學(xué)習(xí)能力和空間記憶能力,從蛋白水平上應(yīng)用蛋白印跡分析（WB）和免疫組化分析（IHC）測(cè)定小鼠腦內(nèi)與AD發(fā)病相關(guān)的Aβ,GFAP,BACE-1和NEP含量,從分... 

【文章來源】：山東中醫(yī)藥大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
提要
Abstract
引言
第一章 丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝優(yōu)化
    1 材料與儀器
        1.1 材料
        1.2 儀器與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝
        2.2 單因素法優(yōu)化丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝
        2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝參數(shù)
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果與分析
        3.1 單因素優(yōu)化丹參地上部分揮發(fā)油提取工藝確定
            3.1.1 不同提取溶液對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油收率影響
            3.1.2 浸漬時(shí)間對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油收率的影響
            3.1.3 蒸餾時(shí)間對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油收率影響
            3.1.4 料液比對(duì)丹參地上部分揮發(fā)油收率的影響
        3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果
        3.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    4 討論與小結(jié)
第二章 丹參地上部分揮發(fā)油成分分析及總萜類含量測(cè)定
    1 材料
        1.1 藥材
        1.2 儀器與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 丹參地上部分揮發(fā)油的提取
        2.2 GC-MS條件
        2.3 總萜類含量的測(cè)定
            2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備
            2.3.2 樣品溶液制備
            2.3.3 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇
            2.3.4 方法學(xué)考察
                2.3.4.1 線性關(guān)系考察
                2.3.4.2 重復(fù)性檢驗(yàn)
                2.3.4.3 精密度檢驗(yàn)
                2.3.4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)
                2.3.4.5 加樣回收試驗(yàn)
    3 結(jié)果與分析
        3.1 丹參地上部分揮發(fā)油GC-MS分析
        3.2 丹參地上部分揮發(fā)油總萜類含量測(cè)定
    4 討論與小結(jié)
第三章 丹參地上部分揮發(fā)油體外抗氧化活性研究
    1 材料
        1.1 藥材
        1.2 儀器與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 丹參地上部分揮發(fā)油的提取
        2.2 三氯乙酸法測(cè)定丹參地上部分揮發(fā)油的還原能力
        2.3 丹參地上部分揮發(fā)油對(duì)DPPH自由基清除能力的測(cè)定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 丹參地上部分揮發(fā)油還原能力的測(cè)定
        3.2 丹參地上部分揮發(fā)油清除DPPH自由基能力測(cè)定
    4 討論與小結(jié)
第四章 丹參地上部分揮發(fā)油體內(nèi)抗AD活性研究
    1 材料
        1.1 藥材
        1.2 儀器
        1.3 小鼠
        1.4 試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 丹參地上部分揮發(fā)油的提取
        2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        2.3 莫里斯水迷宮實(shí)驗(yàn)
        2.4 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)
        2.5 免疫組化實(shí)驗(yàn)
        2.6 蛋白印記分析
            2.6.1 腦組織總蛋白提取與蛋白濃度測(cè)定
            2.6.2 SDS-PAGE凝膠電泳
            2.6.3 轉(zhuǎn)膜
            2.6.4 封閉與孵育
            2.6.5 顯影
        2.7 RT-PCR
        2.8 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 丹參地上部分揮發(fā)油對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
        3.2 丹參地上部分揮發(fā)油對(duì)AD小鼠腦內(nèi)相關(guān)活性分子的影響
        3.3 蛋白水平應(yīng)用免疫組化分析考察AD小鼠腦內(nèi)Aβ和GFAP含量
        3.4 蛋白水平應(yīng)用WB分析考察AD小鼠腦內(nèi)AD相關(guān)蛋白表達(dá)影響
        3.5 基因水平應(yīng)用RT-PCR技術(shù)考察AD小鼠腦內(nèi)相關(guān)炎癥因子和衰老因子表達(dá)
    4 討論與小結(jié)
第五章 結(jié)語
參考文獻(xiàn)
第六章 文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
論文著作


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]Dissecting the hypothalamic pathways that underlie innate behaviors[J]. Xi Zha,Xiaohong Xu.  Neuroscience Bulletin. 2015(06)
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[5]生長(zhǎng)期內(nèi)丹參不同部位中水蘇糖含量的動(dòng)態(tài)變化[J]. 鄭云楓,葛婷,夏彥銘,鄒立思,崔健,彭國(guó)平.  南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)
[6]丹參地上部分正丁醇萃取部位化學(xué)成分檢測(cè)及其抗腦缺血研究[J]. 張寒,賈敏,孫艷平,楊穎.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2014(04)
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[9]HPLC-ELSD同時(shí)測(cè)定丹參注射液中4種糖類成分的含量[J]. 黃利,葛婷,夏蘊(yùn)瓊,楊錦強(qiáng),鄭云楓,朱立靜,劉將.  中國(guó)現(xiàn)代中藥. 2013(06)
[10]丹參地上部分抗腦缺血活性部位篩選[J]. 張寒,賈敏,楊穎.  中藥藥理與臨床. 2013(03)

碩士論文
[1]丹參莖葉資源化學(xué)研究與藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立[D]. 沙秀秀.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]中國(guó)丹參揮發(fā)性成分評(píng)價(jià)與活性分析[D]. 周曉希.陜西師范大學(xué) 2014
[3]丹參葉茶加工工藝及其抗氧化性能研究[D]. 賈士軍.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]野生丹參地上部分抗氧化有效成分的提取分離與鑒定[D]. 于鵬飛.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2009
[5]丹參地上部分化學(xué)成分及抗氧化活性研究[D]. 仲惟燕.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3182893